栽培丹參種質(zhì)資源遺傳多樣性及快速活性測(cè)定研究
發(fā)布時(shí)間：2021-12-02 05:12
丹參（Salvia miltiorrhiza Bunge.）是唇形科（Labiatae）鼠尾草屬（Salvia）的一種主要以根及根莖入藥的草本植物,其種質(zhì)資源豐富,種類繁多。本文以國(guó)內(nèi)30個(gè)地區(qū)的共42個(gè)丹參居群為材料,考察了其種子形狀、大小及部分農(nóng)藝性狀;對(duì)其內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增與分析;對(duì)丹參有效成分丹參酮和丹酚酸合成途徑中的6個(gè)關(guān)鍵酶基因:3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶基因（HMGR）、1-去氧木糖-5-磷酸合酶基因（DXS）、1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸還原異構(gòu)酶基因（DXR）、苯丙氨酸解氨酶基因（PAL）、迷迭香酸合酶基因（RAS）和酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶基因（TAT）的c DNA序列或基因序列設(shè)計(jì)兼并同源引物,分段克隆42個(gè)居群的相應(yīng)基因組基因,以供進(jìn)行遺傳多樣性分析;以四川紅原白花丹參為材料,初步探索了丹參種子活力快速測(cè)定方法。主要研究結(jié)果如下:1.不同居群丹參種子形態(tài)、大小及部分農(nóng)藝性狀觀測(cè)42個(gè)丹參居群的種子考種測(cè)定表明:其長(zhǎng)徑范圍為2.404.05mm,短徑范圍為1.013.00mm,長(zhǎng)短徑比范圍為1....
【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
真核生物rDNA的結(jié)構(gòu)
西南大學(xué)碩士學(xué)位論文8的作用下IPP和其異構(gòu)物DMAPP之間可相互轉(zhuǎn)化[82]，這兩種物質(zhì)是所有萜類化合物的前體物質(zhì)。圖1-2萜類化合物生物合成的MVA途徑和DXP途徑.Fig.1-2Themevalonate（MVA）and1-deoxy-D-xylulose5-phosphate（DXP）pathwaysforbiosynthesisofterpenoids注：虛線箭頭代表多步反應(yīng)Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.4.4丹酚酸類化合物的生物合成途徑及相關(guān)酶的研究丹參中主要的水溶性酚酸類成分，大多數(shù)是在迷迭香酸的結(jié)構(gòu)上進(jìn)一步衍生而來(lái)。到目前為止，迷迭香酸的合成途徑研究的較清楚[90]。迷迭香酸的生源途徑由兩條平行支路即苯丙氨酸途徑和酪氨酸途徑組成。在苯丙氨酸途徑上，苯丙氨酸在苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）的催化下形成肉桂酸，這是苯丙烷類代謝的限速酶[91]，然后肉桂酸經(jīng)肉桂酸-4-羥化酶（cinnamicacid4-hydroxylase,C4H）催化生成4-香豆酸，然后在4-香豆素輔酶A連接酶（4-hydroxycinnamatecoenzymeAligase，4CL）催化下形成4-香豆酰CoA。在酪氨酸支路上，酪氨酸經(jīng)酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（tyrosineaminotransferase,TAT）催化形成4-羥基苯丙酮酸，TAT是酪氨酸代謝的限速酶，然后在4-羥基苯丙酮酸還原酶（4-hydroxyphenylpyruvatereductase,HPPR）的催化形成4-羥基苯乳酸。兩條支路上形成的4-香豆酰輔酶A與4-羥基苯乳酸為迷迭香酸的前體物質(zhì)，在迷迭香酸合成（rosmarinicacidsynthetase,RAS）作用下縮合，形成了兩種2-氧-(4-香豆酰)-3-(4-羥基苯)-乳酸的異構(gòu)體，這是迷迭香酸合成的關(guān)鍵反應(yīng)。最后經(jīng)細(xì)胞色素P450單加氧酶的CYP98亞家族羥化酶的催化，形成了迷迭香[92]。
第1章文獻(xiàn)綜述9圖1-3迷迭香酸及相關(guān)代謝物生源途徑Fig.1-3Thebiogenicpathwayofrosmarinicacidandrelatedmetabolites注：虛線箭頭代表多步反應(yīng)Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.5丹參種子活力快速測(cè)定研究進(jìn)展種子的生活力即種子能夠萌發(fā)的潛在能力和胚所具有的生命力，種子活力是種子品質(zhì)判定的重要指標(biāo)，而發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率能夠反映種子質(zhì)量的優(yōu)劣，在發(fā)芽率相同時(shí)，發(fā)芽勢(shì)高的種子表明種子活力較強(qiáng)、播種后的發(fā)芽率較高。種子活力的快速測(cè)定法有氯化三苯基四氮唑法（TTC法）、紅墨水法、溴麝香草酚藍(lán)法（BTB法）等。TTC法測(cè)定種子生活力，準(zhǔn)確率較高，但價(jià)格昂貴；紅墨水法經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，花費(fèi)時(shí)間短，但相比TTC法準(zhǔn)確率低[94]；BTB法通過(guò)測(cè)定呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳改變介質(zhì)的酸堿度來(lái)鑒定種子的生活力，直觀，但實(shí)驗(yàn)中瓊脂凝膠的厚度不易把握。丹參種子形狀為橢圓形或卵圓形，茶褐色，種子小[95]，種子的果皮表面存在黏液物質(zhì)，吸水后黏液物質(zhì)包裹著種子；種胚剝離不易，因此較難利用種胚來(lái)進(jìn)行種子活力的快速測(cè)定。用完整種子進(jìn)行活力測(cè)定，可克服種粒小，胚不易剝離的不足，綜合性較強(qiáng)，因此用完整的丹參種粒的呼吸強(qiáng)度來(lái)測(cè)定種子的活力是可行的。丹參種子的萌發(fā)環(huán)境條件及其在逆境下萌發(fā)的研究較多，楊艷娟等[96]對(duì)紫丹參的萌發(fā)特性進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)紫丹參種子在25℃的條件下發(fā)芽率較高，且萌發(fā)時(shí)需光照。王濤等[97]采用PEG-6000模擬干旱條件測(cè)定種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率，結(jié)果表明，不同種源丹參種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均受到PEG不同程度的影響。張玉等[98]以甘露醇為引發(fā)劑，采用5個(gè)引發(fā)濃度和5個(gè)引發(fā)時(shí)間考察了干旱脅迫處理對(duì)丹參種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率的影響，結(jié)果顯示：甘露醇引發(fā)濃度越高、引發(fā)時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)丹參種
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一株丹參種子內(nèi)生真菌ZJZD3的分離鑒定及其生物活性[J]. 劉玉嬌,宋樂天,郭書欣,盧珊,王德才,李艷玲. 食品工業(yè)科技. 2020(04)
[2]基于ITS序列對(duì)12種石斛屬植物的鑒定研究[J]. 高靜,蔡金龍,陳軍文,謝世清,楊生超,張敬麗. 中藥材. 2019(06)
[3]丹參相關(guān)保健食品的應(yīng)用情況分析[J]. 王艷宏,樊建,李洪晶,欒寧,盛開,陳大忠. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2020(06)
[4]ITS2序列鑒定甘草混淆偽品的研究[J]. 白東東,李新圃,楊峰,羅金印,張行,李宏勝. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2019(03)
[5]棗屬ITS及psbA-trnH序列PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化與驗(yàn)證[J]. 李學(xué)營(yíng),索相敏,白瑞霞,彭建營(yíng),馬寶玲. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(02)
[6]對(duì)丹參素藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 李強(qiáng),曹陳軍,陳奕,唐博宇,何蓮花,盧瓊. 當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2019(10)
[7]紫丹參種子生物學(xué)特性與萌發(fā)特性研究[J]. 楊艷娟,陳光明,資付益,侯彥,李寧芳,余朝良. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(06)
[8]山東省丹參種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 常暉,曾艾林,賈志偉,任振麗,馬存德. 種子. 2019(02)
[9]基于ITS的貴州省30個(gè)樹種的DNA條形碼研究[J]. 成宇,蔡莎莎,舒劍鋒,袁昊,伍穎,凃翠,楊鵬,趙財(cái). 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2018(06)
[10]中藥丹參治療冠心病的藥理成分及作用分析[J]. 鄭云霞,孟萌. 雙足與保健. 2018(17)
博士論文
[1]丹參酚酸類成分生源合成調(diào)控相關(guān)基因的克隆與功能研究[D]. 張順倉(cāng).西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[2]丹參酚酸類成分生源途徑的探索及相關(guān)基因的克隆與功能研究[D]. 邸鵬.第二軍醫(yī)大學(xué) 2012
碩士論文
[1]泰山丹參種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)與優(yōu)良種質(zhì)的篩選[D]. 戰(zhàn)戈.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]丹參種質(zhì)資源收集與評(píng)價(jià)研究[D]. 李星.陜西師范大學(xué) 2008
本文編號(hào)：3527799
【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
真核生物rDNA的結(jié)構(gòu)
西南大學(xué)碩士學(xué)位論文8的作用下IPP和其異構(gòu)物DMAPP之間可相互轉(zhuǎn)化[82]，這兩種物質(zhì)是所有萜類化合物的前體物質(zhì)。圖1-2萜類化合物生物合成的MVA途徑和DXP途徑.Fig.1-2Themevalonate（MVA）and1-deoxy-D-xylulose5-phosphate（DXP）pathwaysforbiosynthesisofterpenoids注：虛線箭頭代表多步反應(yīng)Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.4.4丹酚酸類化合物的生物合成途徑及相關(guān)酶的研究丹參中主要的水溶性酚酸類成分，大多數(shù)是在迷迭香酸的結(jié)構(gòu)上進(jìn)一步衍生而來(lái)。到目前為止，迷迭香酸的合成途徑研究的較清楚[90]。迷迭香酸的生源途徑由兩條平行支路即苯丙氨酸途徑和酪氨酸途徑組成。在苯丙氨酸途徑上，苯丙氨酸在苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）的催化下形成肉桂酸，這是苯丙烷類代謝的限速酶[91]，然后肉桂酸經(jīng)肉桂酸-4-羥化酶（cinnamicacid4-hydroxylase,C4H）催化生成4-香豆酸，然后在4-香豆素輔酶A連接酶（4-hydroxycinnamatecoenzymeAligase，4CL）催化下形成4-香豆酰CoA。在酪氨酸支路上，酪氨酸經(jīng)酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（tyrosineaminotransferase,TAT）催化形成4-羥基苯丙酮酸，TAT是酪氨酸代謝的限速酶，然后在4-羥基苯丙酮酸還原酶（4-hydroxyphenylpyruvatereductase,HPPR）的催化形成4-羥基苯乳酸。兩條支路上形成的4-香豆酰輔酶A與4-羥基苯乳酸為迷迭香酸的前體物質(zhì)，在迷迭香酸合成（rosmarinicacidsynthetase,RAS）作用下縮合，形成了兩種2-氧-(4-香豆酰)-3-(4-羥基苯)-乳酸的異構(gòu)體，這是迷迭香酸合成的關(guān)鍵反應(yīng)。最后經(jīng)細(xì)胞色素P450單加氧酶的CYP98亞家族羥化酶的催化，形成了迷迭香[92]。
第1章文獻(xiàn)綜述9圖1-3迷迭香酸及相關(guān)代謝物生源途徑Fig.1-3Thebiogenicpathwayofrosmarinicacidandrelatedmetabolites注：虛線箭頭代表多步反應(yīng)Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.5丹參種子活力快速測(cè)定研究進(jìn)展種子的生活力即種子能夠萌發(fā)的潛在能力和胚所具有的生命力，種子活力是種子品質(zhì)判定的重要指標(biāo)，而發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率能夠反映種子質(zhì)量的優(yōu)劣，在發(fā)芽率相同時(shí)，發(fā)芽勢(shì)高的種子表明種子活力較強(qiáng)、播種后的發(fā)芽率較高。種子活力的快速測(cè)定法有氯化三苯基四氮唑法（TTC法）、紅墨水法、溴麝香草酚藍(lán)法（BTB法）等。TTC法測(cè)定種子生活力，準(zhǔn)確率較高，但價(jià)格昂貴；紅墨水法經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，花費(fèi)時(shí)間短，但相比TTC法準(zhǔn)確率低[94]；BTB法通過(guò)測(cè)定呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳改變介質(zhì)的酸堿度來(lái)鑒定種子的生活力，直觀，但實(shí)驗(yàn)中瓊脂凝膠的厚度不易把握。丹參種子形狀為橢圓形或卵圓形，茶褐色，種子小[95]，種子的果皮表面存在黏液物質(zhì)，吸水后黏液物質(zhì)包裹著種子；種胚剝離不易，因此較難利用種胚來(lái)進(jìn)行種子活力的快速測(cè)定。用完整種子進(jìn)行活力測(cè)定，可克服種粒小，胚不易剝離的不足，綜合性較強(qiáng)，因此用完整的丹參種粒的呼吸強(qiáng)度來(lái)測(cè)定種子的活力是可行的。丹參種子的萌發(fā)環(huán)境條件及其在逆境下萌發(fā)的研究較多，楊艷娟等[96]對(duì)紫丹參的萌發(fā)特性進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)紫丹參種子在25℃的條件下發(fā)芽率較高，且萌發(fā)時(shí)需光照。王濤等[97]采用PEG-6000模擬干旱條件測(cè)定種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率，結(jié)果表明，不同種源丹參種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均受到PEG不同程度的影響。張玉等[98]以甘露醇為引發(fā)劑，采用5個(gè)引發(fā)濃度和5個(gè)引發(fā)時(shí)間考察了干旱脅迫處理對(duì)丹參種子的發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率的影響，結(jié)果顯示：甘露醇引發(fā)濃度越高、引發(fā)時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)丹參種
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一株丹參種子內(nèi)生真菌ZJZD3的分離鑒定及其生物活性[J]. 劉玉嬌,宋樂天,郭書欣,盧珊,王德才,李艷玲. 食品工業(yè)科技. 2020(04)
[2]基于ITS序列對(duì)12種石斛屬植物的鑒定研究[J]. 高靜,蔡金龍,陳軍文,謝世清,楊生超,張敬麗. 中藥材. 2019(06)
[3]丹參相關(guān)保健食品的應(yīng)用情況分析[J]. 王艷宏,樊建,李洪晶,欒寧,盛開,陳大忠. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2020(06)
[4]ITS2序列鑒定甘草混淆偽品的研究[J]. 白東東,李新圃,楊峰,羅金印,張行,李宏勝. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2019(03)
[5]棗屬ITS及psbA-trnH序列PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化與驗(yàn)證[J]. 李學(xué)營(yíng),索相敏,白瑞霞,彭建營(yíng),馬寶玲. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(02)
[6]對(duì)丹參素藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 李強(qiáng),曹陳軍,陳奕,唐博宇,何蓮花,盧瓊. 當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2019(10)
[7]紫丹參種子生物學(xué)特性與萌發(fā)特性研究[J]. 楊艷娟,陳光明,資付益,侯彥,李寧芳,余朝良. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(06)
[8]山東省丹參種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 常暉,曾艾林,賈志偉,任振麗,馬存德. 種子. 2019(02)
[9]基于ITS的貴州省30個(gè)樹種的DNA條形碼研究[J]. 成宇,蔡莎莎,舒劍鋒,袁昊,伍穎,凃翠,楊鵬,趙財(cái). 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2018(06)
[10]中藥丹參治療冠心病的藥理成分及作用分析[J]. 鄭云霞,孟萌. 雙足與保健. 2018(17)
博士論文
[1]丹參酚酸類成分生源合成調(diào)控相關(guān)基因的克隆與功能研究[D]. 張順倉(cāng).西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[2]丹參酚酸類成分生源途徑的探索及相關(guān)基因的克隆與功能研究[D]. 邸鵬.第二軍醫(yī)大學(xué) 2012
碩士論文
[1]泰山丹參種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)與優(yōu)良種質(zhì)的篩選[D]. 戰(zhàn)戈.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]丹參種質(zhì)資源收集與評(píng)價(jià)研究[D]. 李星.陜西師范大學(xué) 2008
本文編號(hào)：3527799
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