化學藥劑誘發(fā)木薯無融合生殖種質(zhì)創(chuàng)制及鑒定研究
發(fā)布時間:2021-11-27 15:57
無融合生殖可以避免作物營養(yǎng)繁殖中復雜病原菌的傳播,固定雜種優(yōu)勢以及保存特定基因型;同時發(fā)生在減數(shù)胚囊中的卵細胞單性無融合生殖(孤雌生殖)是單倍體或純合二倍體材料的主要來源。木薯是我國熱帶地區(qū)重要的經(jīng)濟及能源作物,無融合生殖研究對木薯生產(chǎn)具有重要的育種價值及分子生物學意義。木薯的無融合生殖可通過種間雜交獲得,但發(fā)生頻率很低(1%-2%);瘜W誘導是獲得無融合生殖的一個重要途徑,本試驗主要采用二甲基亞砜(DMSO)、秋水仙素(Col)、安磺靈(Ory)三種藥劑的化學誘導法,通過對木薯雌花發(fā)育四核胚囊到成熟胚囊階段的活體誘導,首次獲得由化學藥劑誘導的木薯無融合生殖種質(zhì),并通過EST-SSR、SRAP分子標記對獲得的無融合生殖類型及遺傳特性進行鑒定和分析。主要研究結(jié)果如下:1、應用化學藥劑對木薯雌花進行無融合生殖誘導,誘導后套袋隔離均可獲得一定比例的稔實率及坐果率,其中稔實率最高達72.66%,坐果率最高為2.44%。三種化學藥劑中,DMSO的誘導效果最佳,與Col和Ory誘導的坐果率差異達到了極顯著水平,試驗所獲的3株無融合生殖子代均由DMSO誘導而來。由此可見,化學藥劑誘導木薯的無融合生殖...
【文章來源】:海南大學海南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
木,無融合生殖田間處理誘導過程
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??蛋白質(zhì)及多糖污染(圖3-3、圖3-4)。經(jīng)過紫外分光光度計檢測,SC5、SC10W及??無融合生殖子代的OD260/280值均在1.7-2.2之間,濃度在1000-3000ng/nl之間。這??表明改良的CTAB法提取的木馨基因組DNA質(zhì)量好,可W用于S化和SRAP標記。??2313〇bp-JW|gBW|??9416bp???圖3-3?SC5、SCIO基因組DNA瓊脂撤t膠電泳檢測結(jié)果??Fig3-3?Electrophoi'esis?of?genomic?DJNA?of?SC5?and?SC10?on?agarose?gel??注:編號1、2泳道為SC5基因組DNA;編號3、4泳道為SCIO基因組DNA。??Notes:?The?templates?of?No.?1,2?are?呂enomic?DN?A?of?SC5;化e?templates?of?No.?3,?4?are?genomic??DMA?of?SCIO.??94?化?bp?—??圖3-4部分子代基因組DNA瓊脂糖巧膠電泳檢測結(jié)果??Fig3-4?Electrophoresis?of?genomic?DN?A?of?FI?on?agarose?gel??3.3.2誘導子代純合性的EST-SS民標記鑒定??(1)引物篩選??用木善SC5和SC10作為模板對1巧對木墓EST-S化標記引物進行篩選,共篩??選出6對能在SC5和SC10中擴増出清晰的兩條帶且?guī)鸵恢碌囊,對應6對等??基因,因此可W選擇該6對引物來鑒定木馨無融合生殖子代的純合性。圖3-5是利用??SC10篩選引物的部分聚丙蹄醜胺凝膠電泳圖
【參考文獻】:
期刊論文
[1]藥物誘導玉米孤雌生殖創(chuàng)造新材料初探[J]. 張增川,尹素芬,李勤,龍德祥,張秀英,徐海軍,陳永剛. 陜西農(nóng)業(yè)科學. 2014(10)
[2]生長調(diào)節(jié)劑對亞麻無融合生殖誘導的初步研究[J]. 康慶華. 中國麻業(yè)科學. 2013(06)
[3]木薯小孢子母細胞減數(shù)分裂觀察及花粉加倍技術研究[J]. 賴杭桂,陳霞,李開棉,歐文軍,葉建秋,莊南生,覃秋林. 熱帶作物學報. 2013(05)
[4]木薯根尖染色體制片方法的優(yōu)化[J]. 王超,王婧菲,莊南生,王英. 熱帶作物學報. 2012(04)
[5]作物孤雌生殖及其應用研究進展[J]. 王亮,邢虎成,揭雨成. 安徽農(nóng)業(yè)科學. 2012(12)
[6]木薯葉片染色體制片技術研究[J]. 張健,郭軍輝,陳雄庭,王穎,王文泉,賴杭桂,吳坤鑫,倪彥艷,黃琴. 熱帶作物學報. 2012(01)
[7]國內(nèi)外木薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展近況[J]. 方佳,濮文輝,張慧堅. 中國農(nóng)學通報. 2010(16)
[8]蘋果屬植物無融合生殖研究進展[J]. 吳曼,王蓓,董彥,沈向,毛志泉. 山東農(nóng)業(yè)科學. 2010(07)
[9]激素對木薯體細胞胚胎發(fā)生與植株再生的影響[J]. 朱文麗,莫饒,李開綿,王文泉. 熱帶作物學報. 2010(04)
[10]植物染色體倍性鑒定方法研究進展[J]. 陶抵輝,李小紅,王利群,周杰良,陳涌,霍穩(wěn)根. 生命科學研究. 2009(05)
博士論文
[1]蒲公英遺傳多樣性與無融合生殖機理研究[D]. 吳志剛.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2013
碩士論文
[1]化學藥劑誘導玉米群體孤雌生殖選育自交系的研究[D]. 于運凱.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[2]馬鈴薯品種的孤雌生殖誘導研究[D]. 高健軍.青海大學 2014
[3]SSR標記在親本和孤雌生殖后代鑒定中的應用[D]. 陽志剛.中南大學 2010
[4]化學誘導水稻雜種及不育系孤雌生殖[D]. 牟春紅.四川農(nóng)業(yè)大學 2003
本文編號:3522609
【文章來源】:海南大學海南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
木,無融合生殖田間處理誘導過程
處理藥處理濃度?^???p?坐果數(shù)種子數(shù)出苗數(shù)出苗率坐果數(shù)種子數(shù)出苗數(shù)出苗率坐果數(shù)種子數(shù)出苗數(shù)出苗率??D?(個)(個)(株)(%)(個)(個)(株)(%)(個)(個)(株)(%)??1?5?3?1?33?10?10?4?40??DMSO?].5?27?23?16?70?5?9?5?56??2?7?4?2?50?3?5?2?40??0.1?2?2?0?0?0?0?0??Col?0.2?3?6?2?33?0?0?0?67?70?34?48.6??0.3?3?5?2?40?0?0?0??0.001?0?0?0?0?0?0??〇巧?0.002?2?3?0?0?0?0?0??0.003?0?0?0?0?0?0????合計?49?46?23?50?18?24?11?46???分批收集木害誘導種子共70粒,其中SC5收集到46粒、SC10收集到24粒,??種植于育苗床正常管理,共有34株出苗,出苗率為48.6%。圖3-1為木害無融合生??殖子代植株生長發(fā)育過程。??
??蛋白質(zhì)及多糖污染(圖3-3、圖3-4)。經(jīng)過紫外分光光度計檢測,SC5、SC10W及??無融合生殖子代的OD260/280值均在1.7-2.2之間,濃度在1000-3000ng/nl之間。這??表明改良的CTAB法提取的木馨基因組DNA質(zhì)量好,可W用于S化和SRAP標記。??2313〇bp-JW|gBW|??9416bp???圖3-3?SC5、SCIO基因組DNA瓊脂撤t膠電泳檢測結(jié)果??Fig3-3?Electrophoi'esis?of?genomic?DJNA?of?SC5?and?SC10?on?agarose?gel??注:編號1、2泳道為SC5基因組DNA;編號3、4泳道為SCIO基因組DNA。??Notes:?The?templates?of?No.?1,2?are?呂enomic?DN?A?of?SC5;化e?templates?of?No.?3,?4?are?genomic??DMA?of?SCIO.??94?化?bp?—??圖3-4部分子代基因組DNA瓊脂糖巧膠電泳檢測結(jié)果??Fig3-4?Electrophoresis?of?genomic?DN?A?of?FI?on?agarose?gel??3.3.2誘導子代純合性的EST-SS民標記鑒定??(1)引物篩選??用木善SC5和SC10作為模板對1巧對木墓EST-S化標記引物進行篩選,共篩??選出6對能在SC5和SC10中擴増出清晰的兩條帶且?guī)鸵恢碌囊,對應6對等??基因,因此可W選擇該6對引物來鑒定木馨無融合生殖子代的純合性。圖3-5是利用??SC10篩選引物的部分聚丙蹄醜胺凝膠電泳圖
【參考文獻】:
期刊論文
[1]藥物誘導玉米孤雌生殖創(chuàng)造新材料初探[J]. 張增川,尹素芬,李勤,龍德祥,張秀英,徐海軍,陳永剛. 陜西農(nóng)業(yè)科學. 2014(10)
[2]生長調(diào)節(jié)劑對亞麻無融合生殖誘導的初步研究[J]. 康慶華. 中國麻業(yè)科學. 2013(06)
[3]木薯小孢子母細胞減數(shù)分裂觀察及花粉加倍技術研究[J]. 賴杭桂,陳霞,李開棉,歐文軍,葉建秋,莊南生,覃秋林. 熱帶作物學報. 2013(05)
[4]木薯根尖染色體制片方法的優(yōu)化[J]. 王超,王婧菲,莊南生,王英. 熱帶作物學報. 2012(04)
[5]作物孤雌生殖及其應用研究進展[J]. 王亮,邢虎成,揭雨成. 安徽農(nóng)業(yè)科學. 2012(12)
[6]木薯葉片染色體制片技術研究[J]. 張健,郭軍輝,陳雄庭,王穎,王文泉,賴杭桂,吳坤鑫,倪彥艷,黃琴. 熱帶作物學報. 2012(01)
[7]國內(nèi)外木薯產(chǎn)業(yè)發(fā)展近況[J]. 方佳,濮文輝,張慧堅. 中國農(nóng)學通報. 2010(16)
[8]蘋果屬植物無融合生殖研究進展[J]. 吳曼,王蓓,董彥,沈向,毛志泉. 山東農(nóng)業(yè)科學. 2010(07)
[9]激素對木薯體細胞胚胎發(fā)生與植株再生的影響[J]. 朱文麗,莫饒,李開綿,王文泉. 熱帶作物學報. 2010(04)
[10]植物染色體倍性鑒定方法研究進展[J]. 陶抵輝,李小紅,王利群,周杰良,陳涌,霍穩(wěn)根. 生命科學研究. 2009(05)
博士論文
[1]蒲公英遺傳多樣性與無融合生殖機理研究[D]. 吳志剛.沈陽農(nóng)業(yè)大學 2013
碩士論文
[1]化學藥劑誘導玉米群體孤雌生殖選育自交系的研究[D]. 于運凱.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[2]馬鈴薯品種的孤雌生殖誘導研究[D]. 高健軍.青海大學 2014
[3]SSR標記在親本和孤雌生殖后代鑒定中的應用[D]. 陽志剛.中南大學 2010
[4]化學誘導水稻雜種及不育系孤雌生殖[D]. 牟春紅.四川農(nóng)業(yè)大學 2003
本文編號:3522609
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