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大豆RN型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系及保持系cDNA-AFLP分析

發(fā)布時間:2021-11-14 15:17
  我國大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育研究始于上世紀(jì)80年代,經(jīng)過育種家的不斷努力,利用“三系”法已育成大豆雜交種18個,并在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用,使我國在該領(lǐng)域處于世界領(lǐng)先水平。在雜交大豆產(chǎn)業(yè)化過程中,仍存在一些問題亟待解決。不育細(xì)胞質(zhì)的匱乏和細(xì)胞質(zhì)雄性不育機理研究的緩慢,使雜交大豆生產(chǎn)中的一些關(guān)鍵問題無法突破,嚴(yán)重制約了雜交大豆產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展。因此,加速不育基因的克隆,解析不育機理,就顯得非常重要。本研究首次利用cDNA-AFLP分子標(biāo)記開展大豆RN型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系及其同型保持系間差異表達(dá)的研究,所用實驗材料為連續(xù)回交10代同核異質(zhì)的不育系JLCMS9A及其保持系JLCMS9B。利用64對引物分析不育系及保持系花苞中基因差異表達(dá)情況,并對差異條帶進(jìn)行回收和測序,結(jié)合生物信息學(xué)方法對差異表達(dá)基因進(jìn)行分析,為大豆RN型細(xì)胞質(zhì)雄性不育分子機理研究奠定了理論基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:1.本研究優(yōu)化了cDNA-AFLP分子標(biāo)記技術(shù)中模板制備、預(yù)擴增、選擇性擴增及電泳檢測等操作程序,開發(fā)了一套適合于大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因差異表達(dá)分析的完整體系。2.利用不育系和保持系花苞的cDNA作為模板進(jìn)行擴增,共得到了12條差異表達(dá)的... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:43 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

大豆RN型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系及保持系cDNA-AFLP分析


部分植物細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因[48]

電泳圖,電泳圖,樣品


3-1:Trizol 法提取的總 RN2 泳道為 JLCMS9A;3、4 泳道NA electrophoretogram extale sterile lines; 3、4: NA 樣品,利用試劑盒法取膠電泳檢測如圖 3-2 所示

電泳圖,試劑盒,電泳圖,分光光度計


3-1:Trizol 法提取的總 RNA 電2 泳道為 JLCMS9A;3、4 泳道為NA electrophoretogram extracale sterile lines; 3、4: MaiNA 樣品,利用試劑盒法取代膠電泳檢測如圖 3-2 所示,解等現(xiàn)象。微量分光光度計A230 的值都大于 2.0(表 3-1)行下一步實驗。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]甘藍(lán)型油菜polCMS育性恢復(fù)位點的全基因組關(guān)聯(lián)分析[J]. 魏大勇,譚傳東,崔藝馨,吳道明,李加納,梅家琴,錢偉.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(05)
[2]基于熒光檢測技術(shù)的多花黑麥草EST-SSR指紋圖譜的構(gòu)建[J]. 劉歡,張新全,馬嘯,張瑞珍,何光武,潘玲,金夢雅.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(03)
[3]中國兩系法雜交水稻研究進(jìn)展和展望[J]. 牟同敏.  科學(xué)通報. 2016(35)
[4]同核異質(zhì)大豆葉綠體DNA的SNP分析[J]. 林春晶,張春寶,趙洪錕,董英山,趙麗梅.  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2017(02)
[5]大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育恢復(fù)基因的標(biāo)記定位[J]. 連世超,雷夢林,張瑞軍,白志元,張海平,衛(wèi)保國.  山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(05)
[6]甜菜Owen型質(zhì)核互作雄性不育系及保持系花蕾cDNA-AFLP多態(tài)性分析[J]. 孟祥雯,程大友,崔杰,羅成飛,代翠紅,劉天驕,史淑芝,劉一珺.  分子植物育種. 2016(01)
[7]小麥溫光敏核不育系柱頭外露的遺傳研究初報[J]. 李宏生,丁明亮,顧堅,田玉仙,趙紅,吳紹柱,楊素梅,楊和仙,李紹祥.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(06)
[8]粘類小麥雄性不育系線粒體DNA的AFLP標(biāo)記及SCAR轉(zhuǎn)化[J]. 朱啟迪,翁群珠,張改生,張姣,巨嵐,于永昂,牛娜,王軍衛(wèi),馬守才.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2014(08)
[9]大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育系及其保持系線粒體基因的RNA編輯位點研究[J]. 劉海軍,趙麗梅,董英山,石瑛,張春寶.  分子植物育種. 2014(04)
[10]線粒體ISSR與SCAR標(biāo)記鑒定大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育系與保持系[J]. 張春寶,李玉秋,彭寶,王鵬年,董英山,趙麗梅.  大豆科學(xué). 2013(01)

博士論文
[1]大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育的遺傳和分子基礎(chǔ)研究[D]. 趙麗梅.東北師范大學(xué) 2005

碩士論文
[1]玉米S型細(xì)胞質(zhì)雄性不育育性恢復(fù)基因位點全基因組關(guān)聯(lián)分析研究[D]. 馮陽.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]利用高代自交系構(gòu)建小麥的SSR標(biāo)記遺傳圖譜與分蘗數(shù)的QTL定位[D]. 田凡.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]水稻HL-CMS不育候選基因orf216的功能研究[D]. 陳為.中南民族大學(xué) 2009
[4]大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育線粒體基因組的比較研究[D]. 李玉秋.吉林大學(xué) 2008
[5]K型和岡型水稻細(xì)胞質(zhì)線粒體DNA的AFLP分析[D]. 舒友菊.重慶大學(xué) 2007
[6]大豆不育系及保持系線粒體DNA指紋圖譜的構(gòu)建[D]. 唐月異.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[7]甘藍(lán)型油菜顯性核不育基因的AFLP標(biāo)記及品種(系)的SSR指紋圖譜研究[D]. 程勇.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2005
[8]大豆質(zhì)核互作不育系W931A的細(xì)胞學(xué)敗育特性及雜種優(yōu)勢利用研究[D]. 任沖.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[9]大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育系與保持系線粒體DNA的RAPD分子標(biāo)記[D]. 蘇穎.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[10]水稻苯達(dá)松敏感致死基因bel的精細(xì)定位[D]. 朱磊.南昌大學(xué) 2005



本文編號:3494874

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