脫水脅迫誘導(dǎo)大豆生長素相關(guān)基因功能驗(yàn)證
發(fā)布時(shí)間:2021-11-14 09:01
大豆是我國重要的糧食作物和油料作物,其種植區(qū)域廣泛,但各種植地區(qū)都易受到干旱影響。干旱是造成農(nóng)作物減產(chǎn)幅度最大的非生物脅迫因素,提高作物的抗旱能力,是緩解水資源緊張,保障農(nóng)業(yè)長久穩(wěn)定發(fā)展的有效途徑。生長素對(duì)植物生長發(fā)育具有重要的調(diào)節(jié)作用,近年研究發(fā)現(xiàn)生長素相關(guān)基因在植物中過表達(dá)或沉默可改變植物對(duì)逆境的適應(yīng)能力。本研究在前期運(yùn)用Illumina/solexa高通量測序技術(shù)對(duì)大豆耐旱品種晉豆21和干旱敏感品種中豆33進(jìn)行脫水脅迫響應(yīng)的數(shù)字基因表達(dá)譜分析,在此基礎(chǔ)上,本文的主要研究結(jié)果如下:1.從耐旱品種晉豆21與干旱敏感品種中豆33的表達(dá)譜數(shù)據(jù)中篩選獲得10個(gè)存在表達(dá)差異的生長素相關(guān)候選基因,完成了10個(gè)生長素相關(guān)候選基因的克隆,植物超量表達(dá)載體的構(gòu)建及擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化試驗(yàn),獲得了10個(gè)候選基因的轉(zhuǎn)基因株系。在10個(gè)候選基因中9個(gè)基因編碼區(qū)序列均與williams 82一致,1個(gè)候選基因15k(Glyma15g15010.1)編碼區(qū)序列同williams 82相應(yīng)基因存在1個(gè)單堿基差異,該基因編碼區(qū)序列全長1785bp,氨基酸位點(diǎn)在第373處有差異(williams82中為脯氨酸,晉豆21則...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
逆境脅迫相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)(Shinozakietal.,2007)
ormanly et al., 2010)。色氨酸依賴途徑在不同植物中有不同的子途徑,目前有四酸為前體物質(zhì)合成 IAA,分別是:吲哚-3-乙酰胺途徑(IAM)、吲哚-3-丙酮酸途徑徑(TAM)、吲哚-3-乙醛肟(IAOX)途徑(Pollmann et al., 2009; Normanly et al.,生長素在不同植物中進(jìn)化上的保守性分析發(fā)現(xiàn) IAM 或 TAM 是植物中普遍合成 賴色氨酸途徑的不同子途徑在植物中的生長素合成途徑如圖 1.2。
誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。水稻 OsGH3.13 激活突變體表現(xiàn)抗旱能力增加,而 T-DNA 插入突變迫的敏感性提高(Zhang et al., 2009)。YUCCA 家族是生長素合成中的限速酶,水稻族基因 OsCOW1 突變會(huì)導(dǎo)致水稻對(duì)水分的敏感性增加,過表達(dá) YUCCA 家族基因會(huì)旱性增強(qiáng)(Woo et al., 2007)。生長素轉(zhuǎn)運(yùn)受體蛋白參與植物對(duì)干旱的響應(yīng),過表轉(zhuǎn)基因水稻中 OsDREB2A 和 OsAP37 的表達(dá)上調(diào)并且抗旱性增加,ZIFL1 蛋白是 M家族成員,是一種依靠質(zhì)子梯度提供能量的次級(jí)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,它在干旱和極性運(yùn)輸中性剪接形成兩種形式的基因產(chǎn)物(ZIF1.1、ZIF1.3),ZIF1.1 定位在根系細(xì)胞的液泡F1.3 定位在氣孔保衛(wèi)細(xì)胞的質(zhì)膜上,過表達(dá) ZIF1.3 會(huì)使得氣孔關(guān)閉較多,植株的抗Remy et al., 2013)。miRNA 也參與植物的逆境脅迫,Kinoshita 等(2012)發(fā)現(xiàn)滲透167a/b 和它的前體 pri-miR167a 的積累量都下降,其靶基因 IAR3(IAA-Ala 水解酶),而 iar3 突變體表現(xiàn)對(duì)干旱高度敏感(Kinoshita et al., 2012)。素在干旱條件下具有顯著的調(diào)控作用,內(nèi)源生長素的增加和外源施加生長素都可以抗旱性。生長素可以誘導(dǎo)干旱相關(guān)基因的上調(diào)表達(dá)(RAB18、RD22、RD29A、RD29B等),并且可以通過提升活性氧清除系統(tǒng)的能力來維持植物體內(nèi) ROS 的平衡,生長過影響根系結(jié)構(gòu)、ABA 信號(hào)交叉途徑響應(yīng)基因的表達(dá)等來提高植物的抗旱性。生長的途徑總結(jié)如圖 1.3。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]NAC轉(zhuǎn)錄因子在植物非生物脅迫相關(guān)抗性中的作用[J]. 蔡英杰,張雨,劉彧,田忠平,周蘊(yùn)薇. 北方園藝. 2015(23)
[2]中國大豆市場分析與未來10年展望[J]. 殷瑞鋒,徐雪高,李登旺,趙將. 農(nóng)業(yè)展望. 2015(05)
[3]作物耐旱基因的表達(dá)特性及遺傳工程研究[J]. 馬藝文,李亮,王楠,王振萍,姜立雁,郝轉(zhuǎn)芳,王振華. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2015(02)
[4]一個(gè)大豆脫水脅迫響應(yīng)的bHLH類轉(zhuǎn)錄因子的克隆及功能分析[J]. 陳李淼,沙愛華,張嬋娟,單志慧,張曉娟,陳水蓮,朱曉玲,劉寶紅,祁琳,周新安,李文濱. 中國油料作物學(xué)報(bào). 2013(06)
[5]植物生長素極性運(yùn)輸及調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 鄭元,周安佩,劉玉鯤,何承忠. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)). 2013(06)
[6]植物胚胎發(fā)育晚期豐富蛋白的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 周麗,姬向楠,何非,潘秋紅,段長青. 熱帶生物學(xué)報(bào). 2012(02)
[7]轉(zhuǎn)晚期胚胎發(fā)生豐富蛋白(LEA)基因棉花及抗旱性分析[J]. 裴金玲,楊紅蘭,李春平,張大偉,李小雙,蔡明,張道遠(yuǎn). 分子植物育種. 2012(03)
[8]植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的種類、特征及功能[J]. 李偉,韓蕾,錢永強(qiáng),孫振元. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2011(04)
[9]海藻糖的特性及其在植物抗逆中的應(yīng)用[J]. 李金花,張春艷,劉浩,李永春. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(06)
[10]大豆品種資源抗旱性鑒定指標(biāo)及方法[J]. 張小虎,劉學(xué)義. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(02)
博士論文
[1]甘蔗脯氨酸積累與△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(ScP5CS)基因克隆及轉(zhuǎn)化研究[D]. 黃誠梅.廣西大學(xué) 2007
碩士論文
[1]基于電化學(xué)生物傳感器測定植物激素IAA的研究[D]. 黃樂寧.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]轉(zhuǎn)蔗糖:蔗糖-1-果糖基轉(zhuǎn)移酶基因甘蔗的抗旱性研究[D]. 武媛麗.海南大學(xué) 2011
本文編號(hào):3494349
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
逆境脅迫相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)(Shinozakietal.,2007)
ormanly et al., 2010)。色氨酸依賴途徑在不同植物中有不同的子途徑,目前有四酸為前體物質(zhì)合成 IAA,分別是:吲哚-3-乙酰胺途徑(IAM)、吲哚-3-丙酮酸途徑徑(TAM)、吲哚-3-乙醛肟(IAOX)途徑(Pollmann et al., 2009; Normanly et al.,生長素在不同植物中進(jìn)化上的保守性分析發(fā)現(xiàn) IAM 或 TAM 是植物中普遍合成 賴色氨酸途徑的不同子途徑在植物中的生長素合成途徑如圖 1.2。
誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。水稻 OsGH3.13 激活突變體表現(xiàn)抗旱能力增加,而 T-DNA 插入突變迫的敏感性提高(Zhang et al., 2009)。YUCCA 家族是生長素合成中的限速酶,水稻族基因 OsCOW1 突變會(huì)導(dǎo)致水稻對(duì)水分的敏感性增加,過表達(dá) YUCCA 家族基因會(huì)旱性增強(qiáng)(Woo et al., 2007)。生長素轉(zhuǎn)運(yùn)受體蛋白參與植物對(duì)干旱的響應(yīng),過表轉(zhuǎn)基因水稻中 OsDREB2A 和 OsAP37 的表達(dá)上調(diào)并且抗旱性增加,ZIFL1 蛋白是 M家族成員,是一種依靠質(zhì)子梯度提供能量的次級(jí)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,它在干旱和極性運(yùn)輸中性剪接形成兩種形式的基因產(chǎn)物(ZIF1.1、ZIF1.3),ZIF1.1 定位在根系細(xì)胞的液泡F1.3 定位在氣孔保衛(wèi)細(xì)胞的質(zhì)膜上,過表達(dá) ZIF1.3 會(huì)使得氣孔關(guān)閉較多,植株的抗Remy et al., 2013)。miRNA 也參與植物的逆境脅迫,Kinoshita 等(2012)發(fā)現(xiàn)滲透167a/b 和它的前體 pri-miR167a 的積累量都下降,其靶基因 IAR3(IAA-Ala 水解酶),而 iar3 突變體表現(xiàn)對(duì)干旱高度敏感(Kinoshita et al., 2012)。素在干旱條件下具有顯著的調(diào)控作用,內(nèi)源生長素的增加和外源施加生長素都可以抗旱性。生長素可以誘導(dǎo)干旱相關(guān)基因的上調(diào)表達(dá)(RAB18、RD22、RD29A、RD29B等),并且可以通過提升活性氧清除系統(tǒng)的能力來維持植物體內(nèi) ROS 的平衡,生長過影響根系結(jié)構(gòu)、ABA 信號(hào)交叉途徑響應(yīng)基因的表達(dá)等來提高植物的抗旱性。生長的途徑總結(jié)如圖 1.3。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]NAC轉(zhuǎn)錄因子在植物非生物脅迫相關(guān)抗性中的作用[J]. 蔡英杰,張雨,劉彧,田忠平,周蘊(yùn)薇. 北方園藝. 2015(23)
[2]中國大豆市場分析與未來10年展望[J]. 殷瑞鋒,徐雪高,李登旺,趙將. 農(nóng)業(yè)展望. 2015(05)
[3]作物耐旱基因的表達(dá)特性及遺傳工程研究[J]. 馬藝文,李亮,王楠,王振萍,姜立雁,郝轉(zhuǎn)芳,王振華. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào). 2015(02)
[4]一個(gè)大豆脫水脅迫響應(yīng)的bHLH類轉(zhuǎn)錄因子的克隆及功能分析[J]. 陳李淼,沙愛華,張嬋娟,單志慧,張曉娟,陳水蓮,朱曉玲,劉寶紅,祁琳,周新安,李文濱. 中國油料作物學(xué)報(bào). 2013(06)
[5]植物生長素極性運(yùn)輸及調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 鄭元,周安佩,劉玉鯤,何承忠. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)). 2013(06)
[6]植物胚胎發(fā)育晚期豐富蛋白的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 周麗,姬向楠,何非,潘秋紅,段長青. 熱帶生物學(xué)報(bào). 2012(02)
[7]轉(zhuǎn)晚期胚胎發(fā)生豐富蛋白(LEA)基因棉花及抗旱性分析[J]. 裴金玲,楊紅蘭,李春平,張大偉,李小雙,蔡明,張道遠(yuǎn). 分子植物育種. 2012(03)
[8]植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的種類、特征及功能[J]. 李偉,韓蕾,錢永強(qiáng),孫振元. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào). 2011(04)
[9]海藻糖的特性及其在植物抗逆中的應(yīng)用[J]. 李金花,張春艷,劉浩,李永春. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(06)
[10]大豆品種資源抗旱性鑒定指標(biāo)及方法[J]. 張小虎,劉學(xué)義. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(02)
博士論文
[1]甘蔗脯氨酸積累與△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(ScP5CS)基因克隆及轉(zhuǎn)化研究[D]. 黃誠梅.廣西大學(xué) 2007
碩士論文
[1]基于電化學(xué)生物傳感器測定植物激素IAA的研究[D]. 黃樂寧.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]轉(zhuǎn)蔗糖:蔗糖-1-果糖基轉(zhuǎn)移酶基因甘蔗的抗旱性研究[D]. 武媛麗.海南大學(xué) 2011
本文編號(hào):3494349
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