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水稻F-box基因OsFBX76的功能和育種價值研究

發(fā)布時間:2021-11-03 07:40
  水稻是我國最重要的糧食作物之一,如何提高水稻的產(chǎn)量一直是我國面臨的主要問題。隨著矮化育種和雜交育種技術(shù)的突破,我國水稻的單產(chǎn)得到了大幅度的提升,但近年來,水稻產(chǎn)量水平出現(xiàn)徘徊,沒有太大的突破。隨著城市化進程的推進,人口與糧食的矛盾日益加劇。分子設(shè)計育種技術(shù)成為提高水稻產(chǎn)量的有效途徑,而產(chǎn)量相關(guān)性狀控制基因的挖掘是水稻高產(chǎn)分子育種的基礎(chǔ)。F-box蛋白是一類廣泛存在于真核生物中的含有F-box結(jié)構(gòu)域的蛋白家族,是SCF(SKP1 CUL1-F-box蛋白的)-E3泛素連接酶復(fù)合體的一個重要組成部分。F-box蛋白在泛素介導(dǎo)的蛋白質(zhì)水解過程中具有底物識別特性的作用,參與了許多植物生長發(fā)育過程和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,如植物的脅迫反應(yīng)、激素信號調(diào)控、自交不親和性、光信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及器官發(fā)育等。本研究以F-box蛋白基因OsFBX76(LOCOs03g02550)為研究對象,通過構(gòu)建RNAi和過表達載體,獲得了以日本晴為背景的轉(zhuǎn)基因材料。在此基礎(chǔ)上,通過分子遺傳學(xué)和組織形態(tài)學(xué)等研究手段,初步解析了該基因在水稻生長發(fā)育中的作用。主要研究結(jié)果如下:1、酵母雙雜交實驗表明,Skp1可以和Os... 

【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號說明
1. 文獻綜述
    前言
    1.1 水稻產(chǎn)量性狀相關(guān)基因的研究進展
        1.1.1 水稻每穗粒數(shù)性狀的研究進展
        1.1.2 水稻單株有效穗數(shù)性狀的研究進展
        1.1.3 水稻粒重性狀的研究進展
    1.2 水稻產(chǎn)量性狀相關(guān)QTL的研究進展
    1.3 F-box蛋白家族的研究進展
    1.4 F-box蛋白在植物激素信號傳導(dǎo)中的作用
        1.4.1 F-box蛋白與ABA的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.4.2 F-box蛋白與赤霉素(GA)的信號傳導(dǎo)
        1.4.3 F-box蛋白與其他激素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
    1.5 F-box蛋白與植物的生長發(fā)育
    1.6 本研究的目的和意義
2. 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株和載體
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 實驗主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 生物信息學(xué)分析
        2.2.2 實驗材料性狀考察
        2.2.3 酵母雙雜交
        2.2.4 過表達載體的構(gòu)建
        2.2.5 RNAi載體的構(gòu)建
        2.2.6 DNA的提取
        2.2.7 RNA提取
        2.2.8 RNA反轉(zhuǎn)錄
        2.2.9 定量RT-PCR
        2.2.10 快速質(zhì)粒的小提
        2.2.11 瓊脂糖凝膠電泳回收DNA片段
        2.2.12 PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的DNA純化回收
        2.2.13 大腸桿菌感受態(tài)DH5α的轉(zhuǎn)化
        2.2.14 熱擊導(dǎo)農(nóng)桿菌
        2.2.15 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.16 潮霉素檢測
        2.2.17 超薄切片
        2.2.18 環(huán)境掃描電鏡
3. 結(jié)果與分析
    3.1 含有F-box和PP2結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)基因家族在禾本科植物中的進化分析
    3.2 OsFBX76和OSKs的互作關(guān)系
    3.3 OsFBX76基因的表達模式
    3.4 OsFBX76基因過表達和RNAi載體的構(gòu)建
    3.5 OsFBX76轉(zhuǎn)基因株系的篩選和分子鑒定
    3.6 OsFBX76基因?qū)λ局晷秃彤a(chǎn)量相關(guān)因子的影響
    3.7 組織形態(tài)學(xué)分析
    3.8 OsFBX76基因CRISPR/Cas9突變體材料的創(chuàng)制
4. 小結(jié)與討論
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]水稻粒形主效QTL對粒重形成的遺傳貢獻和粒長基因GS3.2的圖位克隆[D]. 孫亮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]水稻粒形基因GS3的功能研究[D]. 茆海亮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]水稻心白突變體flo2灌漿期籽粒中miRNA鑒定與表達分析[D]. 蘭瑩.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號:3473303

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