棉花（Gossypium hirstum L.）是重要的纖維作物,棉纖維細(xì)胞是由胚珠表皮細(xì)胞分化而來,分化和發(fā)育的基本過程可分為纖維起始、初生壁形成、次生壁加厚和脫水成熟期。在雙子葉植物和大多數(shù)單子葉植物中,木聚糖是次生壁中主要的半纖維素多糖,可能參與決定最終的棉纖維品質(zhì),然而木聚糖在棉纖維次生壁加厚期的具體作用還不清楚,木聚糖合成基因如何影響棉纖維發(fā)育也未知。我們在前面的研究中分離了兩個分別屬于GT43和GT47糖基轉(zhuǎn)移酶家族的基因—GhGT43A1和GhGT47B;以及三個可能參與調(diào)控次生壁合成的MYB轉(zhuǎn)錄因子基因—GhMYB1G,GhMYB4G,GhMYB13G。本文對GhGT43A1-RNAi沉默的轉(zhuǎn)基因株系的表型以及GhGT43A1、GhGT47B啟動子的表達調(diào)控進行了分析,取得如下主要結(jié)果:1.GhGT43A1-RNAi轉(zhuǎn)基因棉花表型分析構(gòu)建GhGT43A1-RNAi載體,轉(zhuǎn)化棉花,獲得轉(zhuǎn)基因棉花及其后代株系。利用qRT-PCR檢測了 在轉(zhuǎn)基因棉花T2和T3代株系中的表達情況,結(jié)果顯示,與野生型相比,轉(zhuǎn)基因株系中開花后15天（15DPA）與20天（20DPA）棉纖維中GhG... 

【文章來源】：華中師范大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖４－１棉花遺傳轉(zhuǎn)化基本過程??ａ：生型；ｂ?（ｃ）：胚ＣＢ２．１上；ｄ：

士學(xué)位論文??ＭＡＳＴＥＲ＇Ｓ?ＴＯＥＳＩＳ??Ｍ?－?＋?ｗｔ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１??＿ｊｔ？?ｆ．?▲丄．＿ｉ??圖４－２?Ｔ１代ＧＡＧ７Ｗ＾４７－ＲＮＡｉ轉(zhuǎn)基因棉花陽性鑒定??Ｍ為ＤＬ２０００；－為陰性對照；＋為陽性對照；ＷＴ為野生型；１－１１為Ｔ１代轉(zhuǎn)基因棉花。??收取成熟的種子，脫絨存放。種植在大田或溫室中后，高鹽低滲法提�。纾模危�??進行陽性苗的鑒定。部分電泳圖如圖４－３所示，待轉(zhuǎn)基因棉花開花后，就可以進行??Ｇ；７Ｇ７＾ＪＪ／表達量的分析。??Ｍ?－?＋?ｗｔ?１?２?３?４?５?６?７?８?９??ｗｇｇｍ??？???圖４－３?Ｔ２代ＧＡＧ７Ｖ１４ｉ－ＲＮＡｉ轉(zhuǎn)基因棉花陽性鑒定??Ｍ為ＤＬ２０００；－為陰性對照；＋為陽性對照；ＷＴ為野生型：１－９為Ｔ２代轉(zhuǎn)基因棉花。??４．１．３?Ｇ／？Ｇｍ４７－ＲＮＡｉ轉(zhuǎn)基因植株ＧｈＧＴ４３Ａｌ表達分析??結(jié)合之前研宄成果，Ｇ／ｚＧ７ＶＭ／主要在１５ＤＰＡ和２０ＤＰＡ棉纖維中高量表達，??所以提取野生型ＷＴ和Ｇ／？Ｇ７￥１４７－ＲＮＡｉ轉(zhuǎn)基因植株１５ＤＰＡ和２０ＤＰＡ棉纖維的??ＲＮＡ，逆轉(zhuǎn)錄成ｃＤＮＡ，從轉(zhuǎn)錄組水平進行表達量的分析，部分電泳圖如圖４－４所示。??２１??

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【參考文獻】：
期刊論文
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[3]糖基轉(zhuǎn)移酶在植物次生代謝途徑中的研究進展[J]. 郭溆,羅紅梅,宋經(jīng)元,孫超,陳士林.  世界科學(xué)技術(shù)(中醫(yī)藥現(xiàn)代化). 2012(06)
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[5]參與植物細(xì)胞壁半纖維素木聚糖合成的糖基轉(zhuǎn)移酶[J]. 秦麗霞,張德靜,李龍,李學(xué)寶,許文亮.  植物生理學(xué)報. 2011(09)
[6]木質(zhì)素的生物合成及其調(diào)控研究進展[J]. 耿颯,徐存拴,李玉昌.  西北植物學(xué)報. 2003(01)
[7]棉纖維細(xì)胞次生壁纖維素生物合成的分子生物學(xué)研究進展[J]. 蔣建雄,張?zhí)煺?王志成,易自力.  高技術(shù)通訊. 2004 (04)



本文編號：3455100