發(fā)布時(shí)間：2021-09-25 15:23

　　三七（Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen）是一種五加科（Araliaceae）人參屬（Panax）的多年生草本藥用植物,三萜類人參皂苷是其重要的藥用活性成分,目前人參皂苷生物合成與調(diào)控尚未完全清楚。本論文以皂苷含量差異的兩組三七樣品為材料,使用nanoLC-MS/MS液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究,以期獲得三七中人參皂苷生物合成調(diào)控的新知識(shí)。主要研究結(jié)果如下:1.應(yīng)用高相液相色譜測(cè)定100株三七根5種主要的皂苷（人參皂苷Rg1、Rb1、Re、Rd及三七皂苷R1）含量,上述5種皂苷以及其累積含量依次為0.22%±0.03至6.07%±0.28、1.07%±0.06至8.58%±0.58、0至3.25%±0.23、1.27%±0.06至10.74%±0.66、0.32%±0.01至2.33%±0.26;最高最低分別相差27.5、8.01、3.25、8.45、7.28倍;分別選擇皂苷含量最高（H）和最低（L）的9株樣品混合,分成三份為后續(xù)蛋白組研究材料。2.提取樣品蛋白,應(yīng)用基于nanoLC-MS/MS液質(zhì)聯(lián)用串聯(lián)質(zhì)譜的蛋白組學(xué)技術(shù)分析比較兩組樣品蛋白表達(dá)差異。... 

【文章來(lái)源】：云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：88 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語(yǔ)表
1. 前言
    1.1 三七及其皂苷種類
    1.2 三七人參皂苷含量差異
    1.3 三七的人參皂苷合成途徑
        1.3.1 甲羥戊酸途徑
        1.3.2 磷酸甲基赤蘚糖醇途徑
        1.3.3 達(dá)瑪烷型人參皂苷的形成
        1.3.4 細(xì)胞色素P450與糖基轉(zhuǎn)移酶
    1.4 蛋白組學(xué)技術(shù)及其應(yīng)用
    1.5 本研究目的意義
2. 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 供試材料
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 三七中皂苷含量的測(cè)定
        2.2.2 蛋白質(zhì)的提取
        2.2.3 蛋白質(zhì)的酶解與TMT標(biāo)記
        2.2.4 高PH反向分離
        2.2.5 低PH NANOLC-MS/MS分析
        2.2.6 蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)搜索
        2.2.7 蛋白質(zhì)鑒定標(biāo)準(zhǔn)
        2.2.8 定量數(shù)據(jù)分析
        2.2.9 生物信息學(xué)分析
3. 結(jié)果與分析
    3.1 三七根中主要皂苷含量
    3.2 總蛋白質(zhì)組分析
        3.2.1 液相數(shù)據(jù)質(zhì)控
        3.2.2 質(zhì)譜準(zhǔn)確度評(píng)估
        3.2.3 肽段鑒定得分分布
        3.2.4 肽段長(zhǎng)度分布圖
        3.2.5 總蛋白質(zhì)鑒定
        3.2.6 總蛋白質(zhì)生物信息學(xué)分析
    3.3 差異蛋白質(zhì)組分析
        3.3.1 標(biāo)記強(qiáng)度分布及定量權(quán)重
        3.3.2 歸一化計(jì)算及其質(zhì)控
        3.3.3 蛋白質(zhì)定量信號(hào)分布
        3.3.4 差異蛋白組
        3.3.5 差異蛋白分布
        3.3.6 蛋白差異表達(dá)
        3.3.7 蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)生物信息學(xué)分析
    3.4 差異蛋白與人參皂苷含量間的相關(guān)性分析
4. 討論
    4.1 皂苷含量差異與蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定
    4.2 三七蛋白質(zhì)組
    4.3 蛋白質(zhì)的生物信息學(xué)分析
    4.4 人參皂苷合成相關(guān)基因、防御反應(yīng)蛋白及抗氧化酶
5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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