采用兩個軟麥品種許科316和花培八號（SKCS值和硬度指數(shù)HI分別為30和41.0%）和一個硬麥品種鄭麥366（SKCS值和HI分別為80和75.9%）為材料,分別利用蛋白體外結(jié)合技術(shù)和面粉重組技術(shù),研究淀粉表面極性脂在PINs蛋白與淀粉表面結(jié)合中的作用,以及對胚乳結(jié)構(gòu)和硬度的影響。同時研究籽粒灌漿過程,不同干燥方式下（烘干和凍干）淀粉表面脂含量,PINs蛋白表達(dá)以及籽粒硬度的變化,并采用電鏡觀察籽粒胚乳結(jié)構(gòu)及籽粒淀粉造粉體結(jié)構(gòu)及其造粉體膜的變化。主要結(jié)果如下:1、淀粉表面極性脂在PINs蛋白與淀粉表面結(jié)合中的作用以及與胚乳結(jié)構(gòu)及硬度的關(guān)系1.1 SDS-PAGE圖譜表明,軟麥與硬麥水洗淀粉中均有分子量15kD的蛋白條帶,而用蛋白酶K處理的淀粉、脫脂淀粉以及脫脂淀粉與純化PINs蛋白溫育結(jié)合后的淀粉（脫脂淀粉+PINs）在15kD處均沒有條帶出現(xiàn);而加入淀粉表面極性脂后的脫脂淀粉與純化后的PINs蛋白（脫脂淀粉+極性脂+PINs）結(jié)合后在15kD位置有條帶出現(xiàn)。這些結(jié)果表明除去極性脂后,PINs蛋白與淀粉表面沒有結(jié)合,而添加極性脂后PINs蛋白可以結(jié)合在淀粉表面,證明了PINs蛋白通過... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

通過SDS-PAGE分析不同處理的淀粉與純化的蛋白的結(jié)合特性

鹵冉希?娓商跫?碌淖蚜Ｓ捕染?哂詼掣商跫?碌淖蚜Ｓ捕�。其�?許科316在花后14天和花后35天兩種干燥方式之間差異達(dá)顯著水平，烘干分別較凍干高21和15。鄭麥366在整個灌漿期兩種干燥方式之差異均均達(dá)顯著水平，且在花后14天硬度值的差異最大，花后35天硬度值的差異最小，分別為35和7。圖中結(jié)果表明在整個灌漿過程硬麥和軟麥籽粒在烘干條件下，均分別達(dá)到硬麥和軟麥指標(biāo)，即在灌漿初期籽粒硬度類型基本確定；同時發(fā)現(xiàn)硬麥品種在凍干條件下在花后14天時籽粒硬度接近軟麥硬度指標(biāo)，表明烘干方式下能較真實的反映籽粒硬度特征。圖3灌漿過程不同干燥方式下軟麥與硬麥籽粒硬度變化Fig.3Changeofwheatgrainhardnessunderdifferentdryingmethodsduringgrainfilling4.2.2不同干燥方式下，軟麥和硬麥全粉及淀粉表面PINs蛋白含量的變化圖4是籽粒灌漿過程中不同小麥品種全粉PINs蛋白表達(dá)量。從圖可以看出，在烘干和凍干條件下，軟麥許科316灌漿過程中全粉PINs蛋白表達(dá)量均表現(xiàn)為花后7天最低，之后逐漸升高，在花后21天、28天和35天的表達(dá)量均處于較高水平；烘干和凍干方式下比較，發(fā)現(xiàn)花后14天凍干方式下表達(dá)量略低于烘干下的表達(dá)量。硬麥鄭麥366灌漿過程中全粉PINs蛋白表達(dá)量在烘干與凍干方式下的變化趨勢與軟麥相似，均在花后7天的表達(dá)量最低，之后逐漸升高；且表達(dá)量在花后14天表現(xiàn)為凍干方式略低于烘干方式。軟麥與硬麥比較，發(fā)現(xiàn)軟麥許科316小麥籽粒全粉PINs蛋白表達(dá)量稍高于硬麥鄭麥366�？傮w而言，不同干燥方式下，兩個品種全粉PINs蛋白含量在烘干與凍干方式下沒有顯著差異。

澩锪拷系停?繞涫腔ê?1天幾乎沒有表達(dá)，花后35天的表達(dá)量最高，接近烘干方式下的表達(dá)量。鄭麥366烘干方式下淀粉表面PINs蛋白表達(dá)量在花后14天的最高，花后21天的最低；凍干方式下PINs表達(dá)量變化趨勢與烘干方式下相似，在花后14天較高，花后21天最低。對于不同品種來說，許科316烘干與凍干方式下淀粉表面PINs蛋白表達(dá)量均顯著高于硬麥鄭麥366，說明了淀粉顆粒表面結(jié)合的PINs蛋白是影響籽粒硬度的主要因素。而對不同干燥方式而言，兩個品種均表現(xiàn)為烘干方式下淀粉表面PINs蛋白表達(dá)量都高于凍干方式下淀粉表面PINs蛋白表達(dá)量。圖4籽粒灌漿過程中不同小麥品種全籽粒蛋白表達(dá)量Fig.4PINsSDS-PAGEprofilesofwheatwholemealindifferentwheatcultivarsduringgrainfilling.泳道1-10為許科316（軟麥)，11-20鄭麥366（硬麥）；泳道1-5與11-15為烘干干燥方式，泳道6-10與16-20為凍干干燥方式，Marker分子量為14.4kD。Lane1-10asXuke316(softwheat),11-20asZhengmai366(hardwheat);Lane1-5and11-15fordryingmethod,Lane6-10and16-20forfreezingdryingmethods,themolecularweightofmarkerwas14.4kD.圖5籽粒灌漿過程中不同小麥品種淀粉表面蛋白表達(dá)量Fig.5PINsSDS-PAGEprofilesofwheatstarchsurfaceindifferentwheatcultivarsduringgrainfilling.泳道1-8是為許科316（軟麥)，9-16是鄭麥366（硬麥），其中泳道1-4與9-12是烘干干燥方式，5-8與13-16是凍干干燥方式，Marker分子量為14.4kD。Lane1-8asXuke316(softwheat),9-16asZhengmai366(hardwheat);Lane1-4and9-12fordryingmethod,Lane5-8and13-16forfreezingdryingmethods,themolecularweightofmarkerwas14.4kD.

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3390671