目的:臨床用懸鉤子木全部來自野外采集的庫頁懸鉤子,野生資源不但數(shù)量有限,而且各地采集的懸鉤子木成分差異較大,品質(zhì)不穩(wěn)定。本研究通過建立庫頁懸鉤子組織快繁體系,繁殖迅速、產(chǎn)量大并不受外界因素影響,有效地解決了野生資源稀缺問題。利用ISSR分子標記技術(shù)對試管苗與野生苗進行分析,探測試管苗的遺傳特性是否穩(wěn)定,對庫頁懸鉤子種質(zhì)資源及藥用價值的研究具有重大意義。方法及結(jié)果:（1）庫頁懸鉤子組織快繁體系的建立:以庫頁懸鉤子不定芽為外植體,考察植物生長調(diào)節(jié)劑的不同種類、濃度及其配比對不定芽增殖培養(yǎng)、復(fù)壯培養(yǎng)及生根培養(yǎng)的影響,最終建立起高效的庫頁懸鉤子再生體系。結(jié)果顯示:庫頁懸鉤子不定芽經(jīng)75%乙醇消毒40 s,再用0.1%升汞消毒8 min效果最好,萌發(fā)率為78.34%;最適增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+IBA 0.05 mg/L,增殖系數(shù)7.71倍,叢生芽顏色為綠色,其莖細而瘦弱;最適復(fù)壯培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1mg/L+GA₃ 0... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

野生庫頁懸鉤子不同部位全基因組DNA提取

圖 2-2 ISSR-PCR 反應(yīng)體系的正交試驗Fig. 2-2 Orthogonal test of ISSR-PCR reaction system3.4 ISSR-PCR 引物篩選根據(jù)最佳 ISSR-PCR 反應(yīng)體系，進行引物篩選。從圖 2-3、2-4、2-5 看出，14 條引物中得到 9 條亮度高、變異低、適于擴增引物，用于擴增反應(yīng)的引物為UBC-811、UBC-826、UBC-834、UBC-835、UBC-844、UBC-856、UBC-880、UBC-890、UBC-891，其中以 UBC-826、UBC-856、UBC-890、UBC-891 擴增條帶數(shù)量最多，分別為 7、8、9、8 條。

DNAl adder Marker 1~5：樣本 Marker 1~5：Tissue culture seedling圖 3-2 引物 UBC-811Fig. 3-2 Primer UBC-811

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]蒙藥材庫頁懸鉤子木的活性成分研究—乙酸乙酯層和正丁醇層的活性成分研究[D]. 格根塔娜.內(nèi)蒙古民族大學(xué) 2012



本文編號：3389023