目的:臨床用懸鉤子木全部來(lái)自野外采集的庫(kù)頁(yè)懸鉤子,野生資源不但數(shù)量有限,而且各地采集的懸鉤子木成分差異較大,品質(zhì)不穩(wěn)定。本研究通過(guò)建立庫(kù)頁(yè)懸鉤子組織快繁體系,繁殖迅速、產(chǎn)量大并不受外界因素影響,有效地解決了野生資源稀缺問(wèn)題。利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)試管苗與野生苗進(jìn)行分析,探測(cè)試管苗的遺傳特性是否穩(wěn)定,對(duì)庫(kù)頁(yè)懸鉤子種質(zhì)資源及藥用價(jià)值的研究具有重大意義。方法及結(jié)果:（1）庫(kù)頁(yè)懸鉤子組織快繁體系的建立:以庫(kù)頁(yè)懸鉤子不定芽為外植體,考察植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的不同種類、濃度及其配比對(duì)不定芽增殖培養(yǎng)、復(fù)壯培養(yǎng)及生根培養(yǎng)的影響,最終建立起高效的庫(kù)頁(yè)懸鉤子再生體系。結(jié)果顯示:庫(kù)頁(yè)懸鉤子不定芽經(jīng)75%乙醇消毒40 s,再用0.1%升汞消毒8 min效果最好,萌發(fā)率為78.34%;最適增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+IBA 0.05 mg/L,增殖系數(shù)7.71倍,叢生芽顏色為綠色,其莖細(xì)而瘦弱;最適復(fù)壯培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1mg/L+GA₃ 0... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

野生庫(kù)頁(yè)懸鉤子不同部位全基因組DNA提取

圖 2-2 ISSR-PCR 反應(yīng)體系的正交試驗(yàn)Fig. 2-2 Orthogonal test of ISSR-PCR reaction system3.4 ISSR-PCR 引物篩選根據(jù)最佳 ISSR-PCR 反應(yīng)體系，進(jìn)行引物篩選。從圖 2-3、2-4、2-5 看出，14 條引物中得到 9 條亮度高、變異低、適于擴(kuò)增引物，用于擴(kuò)增反應(yīng)的引物為UBC-811、UBC-826、UBC-834、UBC-835、UBC-844、UBC-856、UBC-880、UBC-890、UBC-891，其中以 UBC-826、UBC-856、UBC-890、UBC-891 擴(kuò)增條帶數(shù)量最多，分別為 7、8、9、8 條。

DNAl adder Marker 1~5：樣本 Marker 1~5：Tissue culture seedling圖 3-2 引物 UBC-811Fig. 3-2 Primer UBC-811

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]樹(shù)莓種苗組織培養(yǎng)技術(shù)體系研究[J]. 黃悅,羅小娟,陶小買,盛淼淼,張潔,劉紅美,張婷婷.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(10)
[2]溪黃草和線紋香茶菜的ISSR反應(yīng)體系的建立與優(yōu)化[J]. 孟爽爽,劉軍民,羅登花,許睿芝,袁亞,詹若挺.  中藥新藥與臨床藥理. 2018(05)
[3]粉枝莓ISSR遺傳多樣性和果實(shí)香氣成分多樣性分析[J]. 劉瑜,鐘政昌,袁雷,謝博,曹東星.  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(08)
[4]滇龍膽叢芽高效誘導(dǎo)與植株再生體系的建立[J]. 席銀凱,王元忠,黃衡宇,錢子剛.  中草藥. 2018(06)
[5]金槐ISSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化和引物篩選[J]. 唐健民,鄒蓉,史艷財(cái),舒文將,朱世緣,蔣運(yùn)生,熊忠臣.  時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2017(11)
[6]秀麗莓干燥莖中的化學(xué)成分研究[J]. 刁玉林,朱冬青,劉斌.  北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(10)
[7]近5年懸鉤子屬植物化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 劉敬,李水清,趙斌,梅全喜,林勵(lì).  時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2017(05)
[8]ISSR標(biāo)記技術(shù)在藥用植物資源中的研究進(jìn)展及應(yīng)用[J]. 任夢(mèng)云,陳彥君,張盾,杜樂(lè)山,劉方,關(guān)瀟,張銀東.  生物技術(shù)通報(bào). 2017(04)
[9]蒙藥懸鉤子木三萜類成分及其生物活性研究[J]. 任珊珊,張屏,格根塔娜,布仁,陳建平,包保全.  中藥材. 2017(02)
[10]廣西甜茶種質(zhì)資源遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 陳宗游,黃夕洋,唐輝,王滿蓮,柴勝豐.  園藝學(xué)報(bào). 2017(01)

碩士論文
[1]蒙藥材庫(kù)頁(yè)懸鉤子木的活性成分研究—乙酸乙酯層和正丁醇層的活性成分研究[D]. 格根塔娜.內(nèi)蒙古民族大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3389023