世界上半數(shù)人口都以稻米為主食,隨著人們生活水平的不斷提高,人們越來越注重稻米的品質(zhì)。稻米中富含優(yōu)質(zhì)蛋白,其營養(yǎng)價值較高,但水稻中的蛋白缺乏賴氨酸,影響稻米的營養(yǎng)利用率。因此,如何提高稻米中第一限制性氨基酸即賴氨酸的含量,是現(xiàn)在育種家們密切關(guān)注的問題。在高等植物中賴氨酸的代謝是一個比較復(fù)雜的過程,其合成主要是依賴天冬氨酸代謝途徑的一個分支,其中,兩個關(guān)鍵酶分別是天冬氨酸激酶（AK）和二氫吡啶二羧酸合酶（DHPS）,這兩個酶受到賴氨酸反饋抑制調(diào)控,賴氨酸酮戊二酸還原酶（LKR）是控制賴氨酸降解途徑的一個關(guān)鍵酶。本實(shí)驗(yàn)室在前期研究中通過基因工程手段,培育了大量賴氨酸代謝調(diào)控相關(guān)的轉(zhuǎn)基因水稻材料,包括在水稻中表達(dá)大腸桿菌AK和DHPS基因,并且同時抑制LKR基因的表達(dá)（35R和GR）。此外,本實(shí)驗(yàn)室還對水稻內(nèi)源的AK和DHPS基因進(jìn)行改造,獲得對賴氨酸反饋抑制不敏感AK2和DHPS1基因;在水稻中過表達(dá)改造的AK2和DHPS1基因且同時抑制LKR的表達(dá),獲得不同的轉(zhuǎn)基因水稻材料（35ADL和35A2D1L）。本實(shí)驗(yàn)主要以這些不同的轉(zhuǎn)基因系及其親本為材料,分別對其基因表達(dá)、氨基酸含量、稻米理化品... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２植物中賴氨酸的代謝途徑【４６］??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｔｈｅ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｌｙｓｉｎｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｃ?ｉｎ?ｐｌａｎｔｓ??減號的虛線箭頭代表反饋抑制作用

Ｄ／／／Ｗ表達(dá)量；Ｃ、Ｆ：水稻表達(dá)量。??３．２．２蛋白的表達(dá)分析??本實(shí)驗(yàn)利用特異性的抗體對水稻籽粒中的蛋白進(jìn)行Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析圖３．６。取花??后１５天的發(fā)育籽粒，提取籽粒中的總蛋白，分析其ＡＫ、ＤＨＰＳ、ＬＫＲ蛋白表達(dá)量。結(jié)果??發(fā)現(xiàn)以ＣａＭＦＪＪＳ驅(qū)動的轉(zhuǎn)基因系，其ＡＫ的蛋白表達(dá)與相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄水平基本一致，而??３５Ａ２Ｄ１Ｌ－１０、３５Ａ２Ｄ１Ｌ－２１?和?３５Ａ２Ｄ１Ｌ－３２?的?ＤＨＰＳ?的蛋白表達(dá)水平較低。３５ＡＤＬ－２０７?的??基因的蛋白表達(dá)量沒有明顯變化，其他各轉(zhuǎn)基因系的ＬＫＲ的表達(dá)量均有所降低，這??和其轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)相一致。以ＧＷ為啟動子驅(qū)動的轉(zhuǎn)基因水稻材料，其／１尺、和??基因的蛋白表達(dá)量

Ｆｉｇ．?３．１０?Ｃｏｎｔｅｎｔｓ?ｏｆ?ｔａｔａｌ?ｐｒｏｔｅｉｎ，ｔｏｔａｌ?ｓｔａｒｃｈ?ｉｎ?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｒｉｃｅ?ｍｕｔｕｒｅ?ｓｅｅｄｓ??Ａ，?ＣａＭＦ３５Ｓ啟動子驅(qū)動的轉(zhuǎn)基因水稻總蛋白含量；Ｂ，?Ｇ？７啟動子驅(qū)動的轉(zhuǎn)基因水稻總蛋白含量；??Ｃ，?Ｒｉ－１２及其雜交聚合系轉(zhuǎn)基因水稻總蛋白含量；Ｄ，Ｒｉ－１７及其雜交聚合系轉(zhuǎn)基因水稻總蛋白含量??（ｇ／１００ｇ種子干重）；Ｅ，種子總淀粉含量（ｇ／１００ｇ種子干重）。??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3386309