小麥是世界三大糧食作物之一,也是分布最廣、播種面積和產量最大的谷物。隨著功能性食品市場需求量的快速增加,我國小麥育種的重點逐步由產量育種轉向品質育種。HMW-GS是麥谷蛋白的主要組成成分,對小麥的加工品質具有決定性作用。近年來,在山西省乃至全國的小麥品質育種中,無論是在地方品種還是育成品種中,各種優(yōu)質HMW-GS的變異類型和各自的占比有所提高,但小麥的品質的提升總體上并未發(fā)生大的變化,主要原因是缺乏優(yōu)質的育種材料。本研究改良了傳統(tǒng)小麥基因組DNA提取方法,改進了小麥高分子量谷蛋白優(yōu)質亞基的分子檢測技術,并對相關小麥材料的HMW-GS進行了分析、檢測與比較。研究結果為小麥的品質育種提供了依據(jù)。主要結果如下:⑴以10份小麥種子為材料,在傳統(tǒng)CTAB法的基礎上,結合磁珠方法,建立了一種操作簡便、成本低廉、適合小麥HMW-GS檢測的高通量DNA提取方法;應用紫外分光光度計、瓊脂糖凝膠電泳和AS-PCR等方法驗證了DNA的產率和質量。該方法所提取的小麥基因組DNA的質量和產率穩(wěn)定,能夠滿足小麥HMW-GS分子檢測的要求。⑵分別應用SDS-PAGE方法和AS-PCR方法檢測了40個小麥品種的HMW... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

HMW-GS各位點編碼的帶型

糖凝膠電泳結果。從圖 2.1 和圖 2.2 可以看出，傳統(tǒng) CTAB 法所提取的 DNA 膠孔較亮，條帶下方有許多小片段拖尾，條帶不整齊；改良 CTAB 法所提取的 DNA 電泳條帶整齊，膠孔與條帶下方干凈、清晰。說明改良 CTAB 法提取的 DNA 較為純凈并且穩(wěn)定性比較好。圖 2.1 應用傳統(tǒng) CTAB 法提取 DNA 樣品的瓊脂糖凝膠電泳結果（1～10）

小麥 HMW-GS 分子檢測中 DNA 提取方法的改良2.2.2 DNA 質量表 2.2 為紫外分光光度計檢測的 DNA 的 A260/280 和 A260/230 的值。從表 2.可以看出：⑴傳統(tǒng) CTAB 法和改良 CTAB 法所提取 DNA 的 A260/280 的平均值均在1.8～2.0 之間，但改良 CTAB 法的值更接近于 1.8，標準差也較小，說明改良 CTA法所提取的DNA較為純凈。⑵傳統(tǒng)CTAB法和改良CTAB法所提取DNA的A260/23的平均值均大于 1.6，但改良 CTAB 法更接近于 2.0～2.3，同樣說明改良 CTAB 法所提取的 DNA 雜質較少。圖 2.1、圖 2.2 分別為傳統(tǒng) CTAB 法與改良 CTAB 法所提取的 DNA 樣品的瓊脂糖凝膠電泳結果。從圖 2.1 和圖 2.2 可以看出，傳統(tǒng) CTAB 法所提取的 DNA 膠孔較亮，條帶下方有許多小片段拖尾，條帶不整齊；改良 CTAB 法所提取的 DNA 電泳條帶整齊，膠孔與條帶下方干凈、清晰。說明改良 CTAB 法提取的 DNA 較為純凈并且穩(wěn)定性比較好。


本文編號：3376454