紫花苜蓿（Medicago sativa subsp.sativa L.）是一種廣泛種植的豆科牧草,因其較高的營養(yǎng)價值被譽為“牧草之王”。然而,非生物逆境嚴(yán)重阻礙著紫花苜蓿的生長和生產(chǎn)。由于基因組信息的不完整以及表達(dá)譜數(shù)據(jù)的匱乏,與傳統(tǒng)作物相比,關(guān)于紫花苜�？鼓婊虻耐诰騽倓偲鸩�。為了全面的揭示紫花苜蓿在響應(yīng)冷脅迫過程中基因表達(dá)的變化,本研究利用高通量測序BGISEQ-500技術(shù)并結(jié)合全長轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),比較了 4℃冷脅迫條件下紫花苜蓿的轉(zhuǎn)錄組動態(tài)特征。MYB基因家族在植物響應(yīng)非生物逆境中扮演著重要作用,但是在紫花苜蓿中尚未進(jìn)行系統(tǒng)研究。在前期轉(zhuǎn)錄組實驗的基礎(chǔ)上,本研究對紫花苜蓿MYB基因家族進(jìn)行了識別與鑒定,分析了不同成員在冷等非生物脅迫條件下的表達(dá)模式,并通過遺傳轉(zhuǎn)化在擬南芥和紫花苜蓿中鑒定了MsMYB144的基因功能。主要研究結(jié)果如下:1、分析了冷脅迫條件下紫花苜蓿8個生理指標(biāo)的變化特征。結(jié)果表明,與對照相比,冷脅迫條件下紫花苜蓿中的離子泄漏水平、過氧化氫酶（CAT）和過氧化物酶（POD）活性、還原型谷胱甘肽（GSH）含量、過氧化氫（H202）含量、丙二醛（MDA）含量以及脯氨酸（P... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：151 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖３．２冷脅迫Ｏｈ、２?ｈ、６?ｈ、２４?ｈ和４８?ｈ后紫花苜蓿整株幼苗生理指標(biāo)變化

?紫花苜蓿冷脅迫轉(zhuǎn)錄組分析及ＭｖＭｙｇｊ�；虻墓δ荑b定??組分”、“分子功能”和“生化過程”（圖３．５），其中以“生化過程”類別中的ｕｎｉｇｅｎｅｓ??數(shù)量最多，其次為“分子功能”和“細(xì)胞組分”。??表３．３非冗余ｕｎｉｇｅｎｅ與公共數(shù)據(jù)庫的ＢＬＡＳＴ分析??Ｔａｂｌｅ?３．３?ＢＬＡＳＴ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｎｏｎ－ｒｅｄｕｎｄａｎｔ?ｕｎｉｇｅｎｅｓ?ａｇａｉｎｓｔ?ｐｕｂｌｉｃ?ｄａｔａｂａｓｅｓ??注釋基因的數(shù)量（％）??數(shù)據(jù)庫??Ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ａｎｎｏｔａｔｅｄ?ｕｎｉｇｅｎｅｓ?（Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ）??Ｄａｔａｂａｓｅ????ＣＯ?Ｃｌ?Ｃ２?Ｃ３?Ｃ４?Ａｌｌ??在?Ｎｒ?注釋的數(shù)量?２０，４７０?２０，８６３?２０，６１１?２０，６４３?２０，７３２?２１，９４７??Ａｎｎｏｔａｔｅｄ?ｉｎ?Ｎｒ?（４４．８０％）?（４４．３３％）?（４５．０４％）?（４５．０９％）?（４４．４０％）?（４３．２０％）??在?ＧＯ?中注釋的數(shù)量?４３

為了驗證測序結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重＿性，本實驗隨機(jī)選擇了?９個ｕｎｉｇｅｎｅｓ??進(jìn)行ｑＲＴ－ＰＣＲ驗證（表３．１）。結(jié)果表明，這９個ｕｎｉｇｅｎｅｓ的ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果與測??序數(shù)據(jù)相一致，這說明本實驗的測序結(jié)杲可靠（圖３．６），可用于后續(xù)相關(guān)研宄。??３．２．４差異表達(dá)基因的識別和聚類分析??在本實驗中，利用不同冷處理時間點文庫中的ＦＰＫＭ值來調(diào)査基閨的表達(dá)??變化，并揭示紫花苜蓿在響應(yīng)冷脅迫過程中的關(guān)鍵基因《在進(jìn)行差異表達(dá)分析時，??以冷處理和對照樣品間基囡表達(dá)水平的差異倍數(shù)大于等；于４作為篩選條件，最后??共獲得５，２８３個差異表達(dá)＿因（圖３．７）。與對照相比，冷處理時間點Ｃｌ、Ｃ２、??Ｃ３和Ｃ４分別含有Ｕ４７?（９６６個上調(diào)，８１個下調(diào)）、１，０３３?（９３６個上調(diào)，９７個??下調(diào)）、２６３８?（１，６６３上調(diào)、９７５個下調(diào)）和３，４７３?（１，９８７個上調(diào)，１，４８６個下調(diào)）??個差異表達(dá)基因（圖３．８），其中Ｃ３和Ｃ４時間點的差異表達(dá)基因多于Ｃ１和Ｃ２??時間點的數(shù)量＊此外


本文編號：3327383