靈芝,我國中醫(yī)藥寶庫中的珍品,同時也是世界知名的大型藥用真菌之一。在靈芝的次級代謝產(chǎn)物中,靈芝酸和靈芝多糖是主要的藥用成分。表觀遺傳調(diào)控在絲狀真菌次級代謝中起到重要的作用。組蛋白修飾是目前已知的最主要的表觀遺傳調(diào)控方式,其中組蛋白乙�；茄芯孔顬槠毡榈男揎椥问�。目前,液體靜置培養(yǎng)靈芝酸和靈芝多糖生物合成的表觀遺傳調(diào)控研究尚未見報道。本論文以靜置培養(yǎng)靈芝細(xì)胞為研究對象,利用組蛋白去乙�；敢种苿┓⒅Z他（SAHA）調(diào)節(jié)靈芝細(xì)胞組蛋白乙�；�,初步研究了組蛋白乙�；瘜`芝生長發(fā)育以及靈芝酸和靈芝多糖生物合成的調(diào)控機(jī)制。振蕩培養(yǎng)和深層液體靜置培養(yǎng)是目前主要的靈芝發(fā)酵培養(yǎng)方式,研究表明靜置培養(yǎng)方式有利于靈芝酸的積累。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在靈芝多糖生物合成方面,搖瓶培養(yǎng)方式更占優(yōu)勢,其中搖瓶培養(yǎng)方式下最大靈芝胞外多糖產(chǎn)量是靜置培養(yǎng)方式的10倍;搖瓶培養(yǎng)方式下,胞內(nèi)多糖產(chǎn)量是靜置培養(yǎng)方式的1.32倍。蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果表明靜置培養(yǎng)方式下靈芝細(xì)胞組蛋白H3、H4乙�；椒謩e是搖瓶培養(yǎng)方式的1.5倍和3倍。在液體靜置培養(yǎng)過程中,添加不同濃度SAHA處理靈芝細(xì)胞,結(jié)果發(fā)現(xiàn),SAHA的處理,抑制了靈芝菌絲體生... 

【文章來源】：福建師范大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖５核心組蛋白與核小體??

Ｄ：?Ｍｙｃｅｌｉａ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｉｎ?ｌｉｑｕｉｄ?ｓｔａｔｉｃ?ｃｕｌｔｕｒｅ??２．２培養(yǎng)方式對靈芝生物量的影響??如圖１－２所示，兩種培養(yǎng)條件下，靈芝細(xì)胞生物量均隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加而增加。??與液體靜置培養(yǎng)相比，靈芝細(xì)胞在振蕩發(fā)酵培養(yǎng)時總的生物量更高。但是培養(yǎng)６天內(nèi)，??靜置培養(yǎng)方式下靈芝細(xì)胞干重增加了６?ｇ／Ｌ，高于搖瓶培養(yǎng)方式下的細(xì)胞干重的增加。??對比兩種培養(yǎng)方式下靈芝細(xì)胞生長量的變化，可見搖瓶振蕩培養(yǎng)方式風(fēng)有利于短時??間內(nèi)得到較多的靈芝菌絲體生物量。

絲分化與代謝差異，本實(shí)驗(yàn)檢測了不同培養(yǎng)方式下靈芝細(xì)胞組蛋白乙�；�。??分別收取第９天兩種培養(yǎng)方式的靈芝細(xì)胞并提取總蛋白，用Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ檢測??組蛋白Ｈ３、Ｈ４的泛乙�；�。結(jié)果如圖１－６所示。從圖１－６?Ａ中可以看出，兩種培??養(yǎng)方式下靈芝乙�；慕M蛋白相對于Ｈ３?（內(nèi)參）的水平有顯著差異的。從蛋白免疫??印跡圖譜中可以看出靜置培養(yǎng)條件下靈芝細(xì)胞組蛋白Ｈ３、Ｈ４乙�；礁哂趽u瓶培??養(yǎng)方式。通過Ｉｍａｇｅ?Ｊ軟件對蛋白條帶進(jìn)行灰度值分析（圖１－６?Ｂ），發(fā)現(xiàn)兩種培養(yǎng)方??式下靈芝細(xì)胞組蛋白乙�；骄哂酗@著性差異（；７＜（）．０５），靜置培養(yǎng)條件下組蛋白??Ｈ４乙�；绞菗u瓶培養(yǎng)的１．５倍，Ｈ３乙�；礁�，是搖瓶培養(yǎng)方式的３倍。根??據(jù)表觀遺傳調(diào)控研宄表明，組蛋白乙�；腿ヒ阴；c基因的表達(dá)與沉默有關(guān)�；�??于實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們初步推斷可能是組蛋白的乙�；c去乙�；�，通過調(diào)節(jié)相關(guān)基因的??－３０－??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3319425