本研究采用組織分離法、多孢分離法2種菌種分離方式進(jìn)行蛹蟲草菌種制備,采用甘油-瓊脂半凝膠法、甘油-營(yíng)養(yǎng)瓊脂半凝膠法、斜面低溫保藏法、鮮牛奶法共4種保藏方法進(jìn)行菌種保藏。通過觀察蛹蟲草液體菌種、子實(shí)體形態(tài),測(cè)定子實(shí)體產(chǎn)量及其生物活性成分蟲草多糖、蟲草酸含量,研究蛹蟲草菌種分離及保藏方法對(duì)蛹蟲草生長(zhǎng)發(fā)育及生物活性成分積累的影響,結(jié)果表明:（1）組織分離法、多孢分離法均可成功制備蛹蟲草菌種,組織分離法制備的菌種性狀更穩(wěn)定、品質(zhì)更好。（2）蛹蟲草子實(shí)體生長(zhǎng)30d（天）時(shí)為組織分離法制備菌種的最佳分離時(shí)期,斜面低溫保藏法為最佳保藏方法,在甘油-瓊脂半凝膠中添加牛肉膏、蛋白胨等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可在一定程度上延緩蛹蟲草菌種品質(zhì)的下降。該時(shí)期制備的菌種培養(yǎng)的液體菌出菌快、菌球勻?qū)�、�?shù)量多,液體菌培養(yǎng)的子實(shí)體轉(zhuǎn)色快且深、長(zhǎng)勢(shì)健壯,出草率高,產(chǎn)量達(dá)20.71-21.86g/盒。（3）蛹蟲草子實(shí)體生長(zhǎng)40d時(shí)為多孢分離法制備菌種的最佳分離時(shí)期,斜面低溫保藏法為最佳保藏方法,在甘油-瓊脂半凝膠中添加牛肉膏、蛋白胨等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)蛹蟲草菌種品質(zhì)下降的延緩作用不明顯。該時(shí)期制備的菌種培養(yǎng)的液體菌較為理想,液體菌培養(yǎng)的蛹蟲草較... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１蛹蟲草生長(zhǎng)〗０天時(shí)組織分離制備菌種培養(yǎng)的液體菌形態(tài)??

?內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文?１５＿??的液體菌的菌球細(xì)密、勻?qū)�，保藏菌種３個(gè)月后培養(yǎng)的液體菌較為渾濁。??翻??圖４蛹蟲草生長(zhǎng)４０天時(shí)組織分離制備菌種培養(yǎng)的液體菌形態(tài)??Ｆｉｇ．４?Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｌｉｑｕｉｄ?ｆｕｎｇｕｓ?ｏｆ?ｆｕｎｇｕｓ?ｉｎｃｕｂａｔｅ?ｂｙ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ａｆｔｅｒ?４０?ｄａｙｓ?ｏｆ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ??ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ?ｍｉｌｉｔａｒｉｓ??３．１．２保藏方法對(duì)蛹蟲草菌種培養(yǎng)的子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響??蛹蟲草子實(shí)體形態(tài)是判斷蛹蟲草品質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)之一。子實(shí)體畸形、稀疏的蛹蟲草??生長(zhǎng)量往往較少甚至沒有子實(shí)體產(chǎn)出，大規(guī)模生產(chǎn)中極易出現(xiàn)人工及生產(chǎn)資源的浪??費(fèi)。如圖５，保藏１個(gè)月后菌種培養(yǎng)的子實(shí)體生長(zhǎng)旺盛、繁茂，保藏２個(gè)月后菌種??培養(yǎng)的子實(shí)體矮小，保藏３個(gè)月后菌種培養(yǎng)的子實(shí)體全部畸形，可知，甘油－瓊脂半??凝膠法保藏菌種１－３個(gè)月后培養(yǎng)的子實(shí)體形態(tài)（Ａ－］０ｄ），隨著菌種保藏時(shí)長(zhǎng)的增加，??出現(xiàn)了較為規(guī)律的變化。甘油－營(yíng)養(yǎng)瓊脂半凝膠法、鮮牛奶法保藏菌種１－３個(gè)月后培??養(yǎng)的子實(shí)體出現(xiàn)了無產(chǎn)量的現(xiàn)象，不出草的蛹蟲草形態(tài)表現(xiàn)為菌糠見光后不轉(zhuǎn)色，??出草的蛹蟲草形態(tài)表現(xiàn)為生長(zhǎng)旺盛、茁壯，可知蛹蟲草生長(zhǎng)１０ｄ時(shí)進(jìn)行組織分離是??可行的，但不是最佳分離時(shí)期。??圖５蛹蟲草生長(zhǎng)１０天時(shí)組織分離制備菌種培養(yǎng)的子實(shí)體形態(tài)??Ｆｉｇ．５?Ｆｒｕｃｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｆｕｎｇｕｓ?ｉｎｃｕｂａｔｅ?ｂｙ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ａｆｔｅｒ?１０?ｄａｙｓ?ｏｆ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ

脂法保藏菌種１個(gè)月后培養(yǎng)的子實(shí)體、鮮牛奶法保藏菌種２個(gè)月后培養(yǎng)??的子實(shí)體細(xì)弱、生長(zhǎng)不齊；可知，蛹蟲草生長(zhǎng)２０ｄ時(shí)進(jìn)行組織分離是可行的，但不??是最佳分離時(shí)期。??圖６蛹蟲草生長(zhǎng)２０天時(shí)組織分離制備菌種培養(yǎng)的子實(shí)體形態(tài)??Ｆｉｇ．６?Ｆｒｕｃｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｆｕｎｇｕｓ?ｉｎｃｕｂａｔｅ?ｂｙ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ａｆｔｅｒ?２０?ｄａｙｓ?ｏｆ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ??ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ?ｍｉｌｉｔａｒｉｓ??圖７蛹蟲草生長(zhǎng)３０天時(shí)組織分離制備菌種培養(yǎng)的子實(shí)體形態(tài)??Ｆｉｇ．７?Ｆｒｕｃｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｆｕｎｇｕｓ?ｉｎｃｕｂａｔｅ?ｂｙ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ａｆｔｅｒ?３０?ｄａｙｓ?ｏｆ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ??ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ?ｍｉｌｉｔａｒｉｓ??蛹蟲草生長(zhǎng)３０ｄ時(shí)進(jìn)行組織分離制備的菌種，保藏１－３個(gè)月后培養(yǎng)的子實(shí)體品??質(zhì)整體較高，如圖７所示，甘油－瓊脂半凝膠法保藏菌種２個(gè)月后培養(yǎng)的踴蟲草在避??光萌發(fā)菌絲的過程中，菌糠表面萌發(fā)了大量氣生菌絲，形成“菌皮”阻礙了子實(shí)體??的正常生長(zhǎng)，見光后雖可正常轉(zhuǎn)色，但產(chǎn)出的子實(shí)體畸形、稀疏（圖Ａ－３０ｄ?２Ｍ），??不排除培養(yǎng)環(huán)境、培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)配比等因素變化而導(dǎo)致的子實(shí)體畸形現(xiàn)象；甘油－營(yíng)養(yǎng)??瓊脂半凝膠法保藏菌種的保藏液內(nèi)添加了牛肉膏、蛋白胨等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，相較于未添??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3313405