發(fā)布時(shí)間：2021-07-14 15:09

　　本實(shí)驗(yàn)室前期鑒定并克隆一個(gè)AAA-ATPase家族（ATPase Associated with a variety of Cellular Activities,AAA）相關(guān)基因OsCDC48（Cell division cycle 48）,該基因突變體psd128在生育早期出現(xiàn)早衰抽穗后期致死表型,psd128的農(nóng)藝性狀（株高、穗長、千粒重和結(jié)實(shí)率等）均顯著低于野生型,遺傳分析證實(shí)psd128出現(xiàn)早衰致死由單隱性基因調(diào)控。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)psd128中OsCDC48基因的單堿基突變導(dǎo)致水稻早衰致死,說明OsCDC48基因與植物細(xì)胞生命活動(dòng)和衰老分子機(jī)制具有關(guān)聯(lián)性。本研究在前期實(shí)驗(yàn)室研究的基礎(chǔ)上,對psd128早衰致死的機(jī)制開展相關(guān)實(shí)驗(yàn),主要結(jié)果如下:1)生物信息學(xué)蛋白序列比對分析發(fā)現(xiàn),在水稻中OsCDC48存在一個(gè)高度同源蛋白OsCDC48E,同源性高達(dá)97%。進(jìn)一步研究顯示,二者表達(dá)模式一致且均為組成性表達(dá);另外二者均定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。2)對突變體psd128的抗病性研究發(fā)現(xiàn),psd128對白葉枯病菌11個(gè)小種的抗性減弱,激素測定結(jié)果和激素代謝調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)均呈顯著差異,說明... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

CDC48/p97蛋白結(jié)構(gòu)工作原理圖（Baeketal2013）

.9.5 酵母雙雜載體構(gòu)建同 超 量 表 達(dá) 載 體 構(gòu) 建 ， 用 重 組 的 方 法 將 OsCDC48, OsCDC48E ，sCDC48-Psd128 基因 CDS 分別構(gòu)建在 PGADT7、PGBKT7 載體上，具體步驟參考超量表達(dá)載體構(gòu)建。載體圖如下：

圖 8 Pull-down 載體圖Fig 8 The vector for pull-down.2.9.7 雙分子熒光互補(bǔ)（BIFC）載體構(gòu)建同 超 量 表 達(dá) 載 體 構(gòu) 建 ， 用 重 組 的 方 法 將 OsCDC48, OsCDC48E ，OsCDC48-Psd128 基因 CDS 分別構(gòu)建在 1300S-YN，2300S-YC 載體上，具體步驟可參考超量表達(dá)載體構(gòu)建。載體圖如下：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]水稻葉片衰老相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 鄭建敏,張濤,鄭家奎.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2009(05)
[2]植物葉片的衰老[J]. 劉道宏.  植物生理學(xué)通訊. 1983(02)

博士論文
[1]水稻早衰控制基因的克隆及其功能研究&水稻出糙率的QTL定位研究[D]. 饒玉春.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011

碩士論文
[1]水稻葉片早衰基因OsPLS2的圖位克隆及其功能分析[D]. 龔盼.浙江大學(xué) 2016
[2]水稻葉片早衰基因PSL2的圖位克隆及功能初步分析[D]. 孫玉瑩.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013



本文編號：3284382