福建具有豐富的茶樹資源,作為福建重要經濟作物之一,擁有悠久的茶樹栽培歷史。同時由于茶樹品種間的雜交及長期引種栽培,積累了大量的茶樹種質資源。為了鑒別福建茶樹種質資源,探索出適合用于茶樹遺傳多樣性分析的方法,本研究對共55份供試材料的遺傳多樣性進行分析。試驗采用了 ISSR、SCOT、iPBS三種標記對55份福建主要茶樹品種（品系）茶樹資源的遺傳多樣性進行分析,并分別構建了 55份供試材料的指紋圖譜。具體結果如下:（1）篩選出的11條ISSR引物對55份供試材料共檢測出156個位點,其中多態(tài)性條帶152條,平均每條引物擴增出14.2條,平均PPB為97.45%。獲得的55份材料間的遺傳相似系數(shù)在0.56～0.92之間,平均為0.72,構建了 55份茶樹品種（系）的ISSR標記指紋圖譜。55份供試材料共兩個群體的觀測等位基因數(shù)Na為1.87,有效等位基因數(shù)Ne為1.54,Nei基因多樣性為0.31,香農指數(shù)Shannon為0.46,遺傳分化Gst為0.05,基因流Nm為9.99。在遺傳相似系數(shù)為0.68處,將55份茶樹資源分成3大類。（2）本實驗首次利用SCOT標記對福建茶樹資源進行分析,... 

【文章來源】：福建農林大學福建省

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ｉＰＢＳ標記擴增原理（引自Ｋａｌｅｎｄａｒ等，２０１０）??Ｆｉｇｌ－１．?ＩＰＢＳ?ｍａｒｋｅｒ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?（ｆｒｏｍ?Ｋａｌｅｎｄａｒ，ｅｔａｌ．２０１０）??５．２?ｉＰＢＳ分子標記應用??

福建主要茶樹品種（系）ＤＮＡ指紋圖譜研究與構建??６．２本研究的技術路線??５５個茶樹ＤＮＡ提取???ｙ???ｘ???ｉ???ＩＳＳＲ－ＰＣＲ?ＳＣＯＴ－ＰＣＲ?ｉＰＢＳ－ＰＣＲ??反應體系優(yōu)化?反應體系優(yōu)化?反應體系優(yōu)化???Ｙ???ｉ???Ｙ???ＩＳＳＲ引物篩選?ＳＣＯＴ引物篩選?ｉＰＢＳ引物篩選???ｙ???５???ｊ???ＩＳＳＲ－ＰＣＲ?擴增?ＳＣＯＴ－ＰＣＲ?擴增?ｉＰＢＳ－ＰＣＲ?擴增???Ｉ???ｊ???Ｉ???ＩＳＳＲ－ＰＣＲ?電泳?ＳＣＯＴ－ＰＣＲ?電泳?ｉＰＢＳ－ＰＣＲ?電泳??＋??Ｉ??Ｔ??Ｔ?士??Ｉ???聚類?ＤＮＡ指紋?聚類?ＤＮＡ指紋?聚類?ＤＮＡ指紋??分析?圖譜構建?分析?圖譜構建?分析?圖譜構建??｜??Ｔ????—???遺傳多樣性、親緣?遺傳多樣性、親緣?ｉｔ傳多樣性、親緣??關系分析?關系分析?關系分析???Ｙ???綜合各標記分析情況，對比出最適??合用于福建茶樹品種（系）親緣關??系分析、ＤＮＡ指紋圖譜構建的標??記??圖１－２本研究技術路線圖??Ｆｉｇ?１－２?Ｔｈｅ?ｏｕｔｌｉｎｅ?ａｎｄ?ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｓｔｕｄｙ??１２??

２１５．３?１．９４?鬼洞白雞冠?１４１１．５?２．００??福云?６?號?２２８．３?１．９５??２．２篩選出的ＩＳＳＲ引物及多態(tài)性分析??優(yōu)化后的ＰＣＲ擴增程序及優(yōu)化后擴增體系：總體積２０?ｕｌ，其中全式金２?ｘ??ＥａｓｙＴａｑ?ＰＣＲ?ＳｕｐｅｒＭｉｘ?１０?ｎＬ，５０?ｎｇ／成?ＤＮＡ?Ｉ?ｎＬ，濃度為?１００?ｕｍｏｌ／Ｌ?引物?２?ｐＬ，??ｄｄＨ２０補足總體積。采用７個有代表性茶樹ＤＮＡ基因組組成的基因池對５０條??ＩＳＳＲ通用引物進行有無多態(tài)性條帶的篩選試驗，圖２－２為部分引物多態(tài)性篩選??情況。對比擴增條帶的穩(wěn)定性、條帶的清晰度，從５０條引物中篩選到１１條多態(tài)??性良好，擴增穩(wěn)定、清晰的引物。對篩選出的１１條具有較好多態(tài)性的引物進行??退火溫度的篩選，以電泳條帶中有清晰條帶所在溫度為退火溫度，最后得到１１??條引物的最適退火溫度，如圖２－３為引物ＵＢＣ８４１、ＵＢＣ８５３和ＵＢＣ８５４的退火??溫度電泳圖。對５５份供試材料進行擴增，擴增圖譜２．４為引物８９２的擴增情況，??在篩選到的１１條引物中單引物ＵＢＣ８４０最多能擴增出１９條；引物ＵＢＣ８８０和??８８１擴增最少，為１１條條帶；共得到１５６條ＤＮＡ譜帶，平均每條引物擴增出１４．２??條條帶，其中多態(tài)性譜帶１５２條，平均多態(tài)性比率（ＰＰＢ）為９７．４５％；多態(tài)性位點??百分率（ＰＰＬ）最高為１００％，最低為８７．５％（如表２－５），說明供試茶樹遺傳資源??的多態(tài)性較為豐富。??———ａ—ＢＢＨ——??２０００ｂｐ?遼：??ｌ（）（Ｍ＞ｈｐ?…：Ｌ?．：?ｖ＇＇?ｆ＇?．?＇?，：?；■??７５０ｂｐ??５００ｂｐ?Ｉ?縛

【參考文獻】：
期刊論文
[1]43份油菜菌核病抗性資源的SCoT、SSR與SRAP標記分析[J]. 張羽,張曉娟,陳進,孫曉敏,張成兵.  西北農林科技大學學報(自然科學版). 2017(01)
[2]SCoT標記分析陜西茶樹資源的遺傳多樣性[J]. 陳熙,張羽,李佼,席彥軍,張顏青.  茶葉科學. 2016(02)
[3]41份葡萄種質遺傳多樣性的ISSR和SCoT對比分析[J]. 王發(fā)明,李潔維,葉開玉,龔弘娟,莫權輝,蔣橋生,劉平平.  廣西植物. 2017(01)
[4]楊梅iPBS-PCR反應體系的建立與優(yōu)化[J]. 郭志海,王鵬凱,郄紅麗,黃穎宏,費艷.  江蘇農業(yè)科學. 2015(11)
[5]SCoT分子標記的研究現(xiàn)狀及在茶樹育種中的應用前景[J]. 李佼,李秀峰,陳曦,張羽.  茶葉通訊. 2015(03)
[6]貴州地方茶樹品種資源遺傳多樣性RAPD分析[J]. 鄢東海,劉聲傳,羅顯揚,魏杰,陸建良,范方媛.  中國農學通報. 2015(19)
[7]利用AFLP標記構建4種薯蕷屬植物的指紋圖譜[J]. 郭文,李婉琳,肖繼坪,白磊,賈振華,龍雯虹,郭華春.  分子植物育種. 2015(03)
[8]鳳凰單叢茶樹資源遺傳多樣性的ISSR分析[J]. 吳清韓,莊東紅,朱慧,趙慶芳,楊培奎,馬瑞君.  熱帶作物學報. 2015(03)
[9]98份甘蔗種質資源遺傳多樣性的AFLP分析[J]. 昝逢剛,應雄美,吳才文,趙培方,陳學寬,馬麗,蘇火生,劉家勇.  中國農業(yè)科學. 2015(05)
[10]SCoT分子標記在植物研究中的應用進展[J]. 龍治堅,范理璋,徐剛,胡尚連,韓國輝.  植物遺傳資源學報. 2015(02)

博士論文
[1]‘東魁’楊梅（Myrica rubra cv.Dongkui）兩個變異材料的發(fā)掘及鑒定[D]. 陳方永.華中農業(yè)大學 2014
[2]鐵觀音茶樹種性分化的分子鑒定及差異表達基因分離研究[D]. 陳志丹.福建農林大學 2013
[3]基于EST-SSR、Genomic-SSR和SCoT標記的柑橘連鎖圖譜構建及雜種和多倍體遺傳分析[D]. 韓國輝.西南大學 2012
[4]利用ISSR和EST-SSR標記研究中國茶樹資源的遺傳多樣性和遺傳結構[D]. 姚明哲.浙江大學 2009
[5]EST-SSR和ISSR分子標記在云南茶樹資源中的應用研究[D]. 劉本英.中國農業(yè)科學院 2009
[6]茶樹遺傳多樣性分析與遺傳圖譜構建[D]. 黃福平.浙江大學 2005

碩士論文
[1]陜西茶樹種質資源DNA指紋圖譜構建[D]. 陳熙.陜西理工學院 2016
[2]扇脈杓蘭遺傳多樣性的SCoT分析及扇脈組的親緣地理學研究[D]. 張俊麗.華東師范大學 2016
[3]基于EST-SSR和iPBS標記的楊梅遺傳多樣性研究[D]. 王文婷.浙江大學 2016
[4]基于DArT技術的大黃魚耐低溫性狀相關分子標記的篩選[D]. 閆松松.寧波大學 2014
[5]5種山茶屬野生油茶ISSR親緣關系研究及指紋圖譜的構建[D]. 李國帥.中南林業(yè)科技大學 2014
[6]油茶種質資源多樣性的ISSR分析[D]. 周蘭英.湖南師范大學 2014
[7]割手密分子遺傳連鎖圖譜的構建[D]. 楊海霞.廣西大學 2013
[8]川渝選育茶樹品種的RAPD和ISSR分析[D]. 遲琳.四川農業(yè)大學 2013
[9]特異茶樹種質資源RAPD標記向SCAR標記轉化的研究[D]. 吳永勝.四川農業(yè)大學 2012
[10]30份四川茶樹主要種質資源遺傳多樣性和親緣關系的SRAP分析[D]. 席春奕.四川農業(yè)大學 2012



本文編號：3269474