TaCYP78A3基因原核表達(dá)及轉(zhuǎn)基因小麥研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-09 10:25
小麥?zhǔn)侨澜缱钪饕募Z食作物之一,其產(chǎn)量直接關(guān)系到世界糧食安全。籽粒大小是構(gòu)成作物產(chǎn)量的直接因素和品質(zhì)性狀的重要指標(biāo)。因此,小麥籽粒大小相關(guān)基因的功能研究對(duì)高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)小麥育種具有重要意義。TaCYP78A3基因位于小麥第七部分同源群染色體短臂上,編碼細(xì)胞色素P450 CYP78A3蛋白。該基因的表達(dá)活性與種子表皮細(xì)胞數(shù)目和種子大小呈正相關(guān)。在擬南芥中TaCYP78A3基因的過表達(dá)導(dǎo)致其種子顯著增大,利用大麥條紋花葉病毒誘導(dǎo)的基因沉默(BSMV-VIGS)抑制內(nèi)源TaCYP78A3基因在小麥籽粒發(fā)育階段的表達(dá),致使種子顯著變小。這些研究結(jié)果初步表明TaCYP78A3基因具有調(diào)控種子大小的功能。為了進(jìn)一步驗(yàn)證TaCYP78A3基因在小麥籽粒生長(zhǎng)發(fā)育中的生物學(xué)效應(yīng),本研究通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將胚珠特異性pINO啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的TaCYP78A3基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入小麥,對(duì)T0代植株進(jìn)行鑒定及外源基因插入拷貝數(shù)檢測(cè),T0:1和T1:2代轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行轉(zhuǎn)基因遺傳穩(wěn)定性分析,測(cè)定分析轉(zhuǎn)基因植株中目標(biāo)基因的表達(dá)水平和種子表型。此外還對(duì)TaCYP78...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
TMHMM跨膜區(qū)預(yù)測(cè)圖形顯示
第二章小麥TaCYP78A3蛋白結(jié)構(gòu)和功能的生物信息學(xué)分析及原核表達(dá)17圖2-2Phyre2預(yù)測(cè)TaCYP78A3三級(jí)結(jié)構(gòu)Figure2-2ThetertiarystructureofTaCYP78A32.3.1.5TaCYP78A3蛋白的免疫原性分析采用predLinearEpitopePredictionB細(xì)胞表位在線分析軟件(http://tools.immuneepitope.org/bcell/)(閾值0.35)預(yù)測(cè)小麥TaCYP78A3蛋白含有7個(gè)主要的B細(xì)胞抗原表位,分別位于:20-28、72-81、235-245、375-387、458-475、485-494、515-527,其中515-527位的抗原表位活性最高(圖2-3)。圖2-3小麥TaCYP78A3蛋白的B細(xì)胞表位分布圖Figure2-3BcellepitopedistributionofTaCYP78A3bypredLinearEpitopePrediction2.3.1.6系統(tǒng)發(fā)育樹用MEGA6.0在線軟件的Neighbor-Joining法建構(gòu)所有植物中已命名的CYP78A家族全長(zhǎng)氨基酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果如圖2-4。小麥TaCYP78A3與二倍體烏拉爾圖小麥TuCYP78A3進(jìn)化關(guān)系最近,二者聚于系統(tǒng)進(jìn)化樹的同一分支,TaCYP78A3與TuCYP78A3的蛋白序列相似度為94%。
第二章小麥TaCYP78A3蛋白結(jié)構(gòu)和功能的生物信息學(xué)分析及原核表達(dá)17圖2-2Phyre2預(yù)測(cè)TaCYP78A3三級(jí)結(jié)構(gòu)Figure2-2ThetertiarystructureofTaCYP78A32.3.1.5TaCYP78A3蛋白的免疫原性分析采用predLinearEpitopePredictionB細(xì)胞表位在線分析軟件(http://tools.immuneepitope.org/bcell/)(閾值0.35)預(yù)測(cè)小麥TaCYP78A3蛋白含有7個(gè)主要的B細(xì)胞抗原表位,分別位于:20-28、72-81、235-245、375-387、458-475、485-494、515-527,其中515-527位的抗原表位活性最高(圖2-3)。圖2-3小麥TaCYP78A3蛋白的B細(xì)胞表位分布圖Figure2-3BcellepitopedistributionofTaCYP78A3bypredLinearEpitopePrediction2.3.1.6系統(tǒng)發(fā)育樹用MEGA6.0在線軟件的Neighbor-Joining法建構(gòu)所有植物中已命名的CYP78A家族全長(zhǎng)氨基酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果如圖2-4。小麥TaCYP78A3與二倍體烏拉爾圖小麥TuCYP78A3進(jìn)化關(guān)系最近,二者聚于系統(tǒng)進(jìn)化樹的同一分支,TaCYP78A3與TuCYP78A3的蛋白序列相似度為94%。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]花粉介導(dǎo)法獲得耐草甘膦玉米植株及其耐性研究[J]. 楊慧珍,任志強(qiáng),肖建紅,卜華虎,劉惠民. 生物技術(shù)通報(bào). 2016(11)
[2]冬小麥產(chǎn)量與群體整齊度遺傳分析[J]. 李卓夫,程子航,王璐,陳露,王曉楠,付連雙,宋永超. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(05)
[3]Lox基因RNAi轉(zhuǎn)基因小麥后代株系種子耐儲(chǔ)藏性分析[J]. 劉香利,李冰冰,郭利建,劉振華,趙惠賢. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2016(07)
[4]小麥粒重形成的分子調(diào)控機(jī)制研究綜述[J]. 魏瑋,郭嘉蓮,萬琳濤,徐林峰,丁明全,周偉. 浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[5]冬小麥穗部性狀的配合力及遺傳性分析[J]. 逯臘虎,武計(jì)萍,張婷,王玉斌. 農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2014(11)
[6]小麥轉(zhuǎn)基因株系中外源脂氧合酶抑制基因(Loxi)拷貝數(shù)分析[J]. 劉振華,劉香利,李冰冰,趙惠賢. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2014(08)
[7]小麥轉(zhuǎn)TaEBP基因株系抗旱特性分析[J]. 楊梅,馬有志,閔東紅,陳耀鋒,陳學(xué)虎,張搏,王會(huì)強(qiáng). 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究. 2012(02)
[8]高分子量麥谷蛋白亞基基因1Bx14轉(zhuǎn)化小麥[J]. 劉香利,金偉波,劉縉,趙惠賢,郭藹光. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(21)
[9]小麥單株產(chǎn)量與株高的QTL分析[J]. 丁安明,崔法,李君,趙春華,王秀芹,王洪剛. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(14)
[10]抗逆相關(guān)基因GmAREB轉(zhuǎn)基因小麥的獲得與鑒定[J]. 陳紅敏,陳明,魏安智,徐兆師,李連城,徐惠君,杜麗璞,馬有志. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2010(06)
碩士論文
[1]基于SRAP和SSR標(biāo)記的小麥產(chǎn)量和品質(zhì)相關(guān)性狀的QTL定位及效應(yīng)分析[D]. 郭利建.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]團(tuán)頭魴β-防御素基因的克隆、重組表達(dá)及抗菌作用研究[D]. 張涓.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]基因槍轉(zhuǎn)化Anti-Trxs基因與轉(zhuǎn)基因小麥后代的遺傳分析[D]. 宋麗.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號(hào):3220409
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
TMHMM跨膜區(qū)預(yù)測(cè)圖形顯示
第二章小麥TaCYP78A3蛋白結(jié)構(gòu)和功能的生物信息學(xué)分析及原核表達(dá)17圖2-2Phyre2預(yù)測(cè)TaCYP78A3三級(jí)結(jié)構(gòu)Figure2-2ThetertiarystructureofTaCYP78A32.3.1.5TaCYP78A3蛋白的免疫原性分析采用predLinearEpitopePredictionB細(xì)胞表位在線分析軟件(http://tools.immuneepitope.org/bcell/)(閾值0.35)預(yù)測(cè)小麥TaCYP78A3蛋白含有7個(gè)主要的B細(xì)胞抗原表位,分別位于:20-28、72-81、235-245、375-387、458-475、485-494、515-527,其中515-527位的抗原表位活性最高(圖2-3)。圖2-3小麥TaCYP78A3蛋白的B細(xì)胞表位分布圖Figure2-3BcellepitopedistributionofTaCYP78A3bypredLinearEpitopePrediction2.3.1.6系統(tǒng)發(fā)育樹用MEGA6.0在線軟件的Neighbor-Joining法建構(gòu)所有植物中已命名的CYP78A家族全長(zhǎng)氨基酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果如圖2-4。小麥TaCYP78A3與二倍體烏拉爾圖小麥TuCYP78A3進(jìn)化關(guān)系最近,二者聚于系統(tǒng)進(jìn)化樹的同一分支,TaCYP78A3與TuCYP78A3的蛋白序列相似度為94%。
第二章小麥TaCYP78A3蛋白結(jié)構(gòu)和功能的生物信息學(xué)分析及原核表達(dá)17圖2-2Phyre2預(yù)測(cè)TaCYP78A3三級(jí)結(jié)構(gòu)Figure2-2ThetertiarystructureofTaCYP78A32.3.1.5TaCYP78A3蛋白的免疫原性分析采用predLinearEpitopePredictionB細(xì)胞表位在線分析軟件(http://tools.immuneepitope.org/bcell/)(閾值0.35)預(yù)測(cè)小麥TaCYP78A3蛋白含有7個(gè)主要的B細(xì)胞抗原表位,分別位于:20-28、72-81、235-245、375-387、458-475、485-494、515-527,其中515-527位的抗原表位活性最高(圖2-3)。圖2-3小麥TaCYP78A3蛋白的B細(xì)胞表位分布圖Figure2-3BcellepitopedistributionofTaCYP78A3bypredLinearEpitopePrediction2.3.1.6系統(tǒng)發(fā)育樹用MEGA6.0在線軟件的Neighbor-Joining法建構(gòu)所有植物中已命名的CYP78A家族全長(zhǎng)氨基酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果如圖2-4。小麥TaCYP78A3與二倍體烏拉爾圖小麥TuCYP78A3進(jìn)化關(guān)系最近,二者聚于系統(tǒng)進(jìn)化樹的同一分支,TaCYP78A3與TuCYP78A3的蛋白序列相似度為94%。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]冬小麥產(chǎn)量與群體整齊度遺傳分析[J]. 李卓夫,程子航,王璐,陳露,王曉楠,付連雙,宋永超. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(05)
[3]Lox基因RNAi轉(zhuǎn)基因小麥后代株系種子耐儲(chǔ)藏性分析[J]. 劉香利,李冰冰,郭利建,劉振華,趙惠賢. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2016(07)
[4]小麥粒重形成的分子調(diào)控機(jī)制研究綜述[J]. 魏瑋,郭嘉蓮,萬琳濤,徐林峰,丁明全,周偉. 浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[5]冬小麥穗部性狀的配合力及遺傳性分析[J]. 逯臘虎,武計(jì)萍,張婷,王玉斌. 農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2014(11)
[6]小麥轉(zhuǎn)基因株系中外源脂氧合酶抑制基因(Loxi)拷貝數(shù)分析[J]. 劉振華,劉香利,李冰冰,趙惠賢. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2014(08)
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[8]高分子量麥谷蛋白亞基基因1Bx14轉(zhuǎn)化小麥[J]. 劉香利,金偉波,劉縉,趙惠賢,郭藹光. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(21)
[9]小麥單株產(chǎn)量與株高的QTL分析[J]. 丁安明,崔法,李君,趙春華,王秀芹,王洪剛. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(14)
[10]抗逆相關(guān)基因GmAREB轉(zhuǎn)基因小麥的獲得與鑒定[J]. 陳紅敏,陳明,魏安智,徐兆師,李連城,徐惠君,杜麗璞,馬有志. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2010(06)
碩士論文
[1]基于SRAP和SSR標(biāo)記的小麥產(chǎn)量和品質(zhì)相關(guān)性狀的QTL定位及效應(yīng)分析[D]. 郭利建.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]團(tuán)頭魴β-防御素基因的克隆、重組表達(dá)及抗菌作用研究[D]. 張涓.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]基因槍轉(zhuǎn)化Anti-Trxs基因與轉(zhuǎn)基因小麥后代的遺傳分析[D]. 宋麗.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號(hào):3220409
本文鏈接:http://sikaile.net/nykjlw/nzwlw/3220409.html
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