小麥是全世界最主要的糧食作物之一,其產(chǎn)量直接關系到世界糧食安全。籽粒大小是構成作物產(chǎn)量的直接因素和品質性狀的重要指標。因此,小麥籽粒大小相關基因的功能研究對高產(chǎn)優(yōu)質小麥育種具有重要意義。TaCYP78A3基因位于小麥第七部分同源群染色體短臂上,編碼細胞色素P450 CYP78A3蛋白。該基因的表達活性與種子表皮細胞數(shù)目和種子大小呈正相關。在擬南芥中TaCYP78A3基因的過表達導致其種子顯著增大,利用大麥條紋花葉病毒誘導的基因沉默（BSMV-VIGS）抑制內(nèi)源TaCYP78A3基因在小麥籽粒發(fā)育階段的表達,致使種子顯著變小。這些研究結果初步表明TaCYP78A3基因具有調(diào)控種子大小的功能。為了進一步驗證TaCYP78A3基因在小麥籽粒生長發(fā)育中的生物學效應,本研究通過農(nóng)桿菌介導法將胚珠特異性pINO啟動子驅動的TaCYP78A3基因表達載體轉入小麥,對T₀代植株進行鑒定及外源基因插入拷貝數(shù)檢測,T_0:1和T_1:2代轉基因株系進行轉基因遺傳穩(wěn)定性分析,測定分析轉基因植株中目標基因的表達水平和種子表型。此外還對TaCYP78... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

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第二章小麥TaCYP78A3蛋白結構和功能的生物信息學分析及原核表達17圖2-2Phyre2預測TaCYP78A3三級結構Figure2-2ThetertiarystructureofTaCYP78A32.3.1.5TaCYP78A3蛋白的免疫原性分析采用predLinearEpitopePredictionB細胞表位在線分析軟件（http://tools.immuneepitope.org/bcell/）（閾值0.35）預測小麥TaCYP78A3蛋白含有7個主要的B細胞抗原表位，分別位于：20-28、72-81、235-245、375-387、458-475、485-494、515-527，其中515-527位的抗原表位活性最高（圖2-3）。圖2-3小麥TaCYP78A3蛋白的B細胞表位分布圖Figure2-3BcellepitopedistributionofTaCYP78A3bypredLinearEpitopePrediction2.3.1.6系統(tǒng)發(fā)育樹用MEGA6.0在線軟件的Neighbor－Joining法建構所有植物中已命名的CYP78A家族全長氨基酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹，結果如圖2-4。小麥TaCYP78A3與二倍體烏拉爾圖小麥TuCYP78A3進化關系最近，二者聚于系統(tǒng)進化樹的同一分支，TaCYP78A3與TuCYP78A3的蛋白序列相似度為94%。

第二章小麥TaCYP78A3蛋白結構和功能的生物信息學分析及原核表達17圖2-2Phyre2預測TaCYP78A3三級結構Figure2-2ThetertiarystructureofTaCYP78A32.3.1.5TaCYP78A3蛋白的免疫原性分析采用predLinearEpitopePredictionB細胞表位在線分析軟件（http://tools.immuneepitope.org/bcell/）（閾值0.35）預測小麥TaCYP78A3蛋白含有7個主要的B細胞抗原表位，分別位于：20-28、72-81、235-245、375-387、458-475、485-494、515-527，其中515-527位的抗原表位活性最高（圖2-3）。圖2-3小麥TaCYP78A3蛋白的B細胞表位分布圖Figure2-3BcellepitopedistributionofTaCYP78A3bypredLinearEpitopePrediction2.3.1.6系統(tǒng)發(fā)育樹用MEGA6.0在線軟件的Neighbor－Joining法建構所有植物中已命名的CYP78A家族全長氨基酸序列系統(tǒng)發(fā)育樹，結果如圖2-4。小麥TaCYP78A3與二倍體烏拉爾圖小麥TuCYP78A3進化關系最近，二者聚于系統(tǒng)進化樹的同一分支，TaCYP78A3與TuCYP78A3的蛋白序列相似度為94%。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]團頭魴β-防御素基因的克隆、重組表達及抗菌作用研究[D]. 張涓.華中農(nóng)業(yè)大學 2014
[3]基因槍轉化Anti-Trxs基因與轉基因小麥后代的遺傳分析[D]. 宋麗.河南農(nóng)業(yè)大學 2004



本文編號：3220409