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利用CRISPR/Cas9技術(shù)創(chuàng)建OsmTERF家族基因突變體

發(fā)布時間:2021-06-03 17:55
  植物線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子(mitochondrial transcription termination factor, mTERF)在核質(zhì)基因協(xié)調(diào)表達(dá)的過程中起著關(guān)鍵的作用,影響植物的生長發(fā)育和抗逆性。水稻是一種重要的糧食作物和基因組研究的模式植物,應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)修飾水稻的基因,有助于產(chǎn)生具有優(yōu)良農(nóng)藝表型的理想突變體植株。針對水稻OsmTERF家族基因,我們在OsmTERF基因外顯子區(qū)域設(shè)計靶位點,成功構(gòu)建了3個OsmTERF基因(Os06g0225100, Os07g0583200和Os08g0515800)的CRISPR/Cas9基因編輯載體;利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化水稻‘中花11’(ZH11),獲得49株T0代轉(zhuǎn)基因植株;測序T0代轉(zhuǎn)基因植株,有16株Os06g0225100基因突變單株,8株Os07g0583200基因突變單株,25株Os08g0515800基因突變單株。本研究為水稻育種計劃提供了寶貴的資源,為進(jìn)一步研究水稻中OsmTERF家族基因功能提供了材料和信息。 

【文章來源】:分子植物育種. 2020,18(18)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

利用CRISPR/Cas9技術(shù)創(chuàng)建OsmTERF家族基因突變體


m TERF家族成員中的m TERF結(jié)構(gòu)域

電泳圖,水稻,載體,基因


水稻OsmTERF基因CRISPR載體構(gòu)建

電泳圖,菌落,水稻,電泳


菌落PCR電泳檢測

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CRISPR/Cas9介導(dǎo)基因組編輯培育糯稻不育系WX209A[J]. 馮璇,王新,韓悅,白德朗,許可,劉芳,覃寶祥,羅繼景,韋政,邱永福,李容柏.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(04)
[2]利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建擬南芥多基因缺失突變體體系[J]. 李雨倩,唐姚,李斕馨,汪秀容,陳梅依,黃燕.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(03)



本文編號:3210975

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