兩個(gè)水稻黃綠葉突變體ygl16和ygl17的表型鑒定與分子定位
發(fā)布時(shí)間:2021-05-17 17:15
水稻(Oryza sativa L.)是世界上重要的糧食作物之一。葉片是其重要的光合器官,水稻葉片中的葉綠體是活躍的代謝中心,通過(guò)光合作用將地球上吸收的太陽(yáng)能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能并固定CO2,合成碳水化合物后儲(chǔ)存于稻谷。葉色突變體廣泛存在于植物界中,大量研究表明,葉色突變體是研究葉片發(fā)育的理想材料。利用誘變劑EMS(ethyl methane sulfonate)處理秈型水稻保持系西農(nóng)1B,獲得兩個(gè)穩(wěn)定遺傳的黃綠葉突變體ygl16(yellow-green leaf16)和ygl17(yellow-green leaf17)。本實(shí)驗(yàn)對(duì)這2個(gè)突變體進(jìn)行了表型鑒定、主要農(nóng)藝性狀調(diào)查、光合色素含量和光合特性分析、細(xì)胞學(xué)觀察;利用縉恢10號(hào)分別與ygl16和ygl17雜交構(gòu)建分離群體,開(kāi)展目標(biāo)性狀的遺傳分析、基因定位及圖位克隆,利用熒光實(shí)時(shí)定量PCR(q RT-PCR)對(duì)YGL16、YGL17及部分葉綠素代謝途徑相關(guān)基因進(jìn)行表達(dá)量分析。主要研究結(jié)果如下:1.突變體表型及主要農(nóng)藝性狀突變體ygl16和ygl17的葉片從四葉期始均表現(xiàn)出黃綠色、分蘗期植株均開(kāi)始矮化,且一直持續(xù)到成熟。其中,ygl16黃綠色...
【文章來(lái)源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 水稻葉色突變體及其分類(lèi)
1.2 葉色突變體的來(lái)源
1.2.1 自然誘變
1.2.2 人工誘變
1.2.3 基因操作技術(shù)引起的突變
1.3 水稻黃綠葉突變體研究概況
1.4 水稻葉色突變基因的研究進(jìn)展
1.4.1 已定位的葉色突變體
1.4.2 已克隆的葉色突變基因
1.5 葉色突變的分子機(jī)理
1.5.1 葉綠體形成和發(fā)育受阻
1.5.2 葉綠素代謝途徑受阻
1.5.3 輔助色素代謝途徑受阻
1.5.4 質(zhì)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑受阻
1.6 葉色突變體的應(yīng)用
1.6.1 在育種生產(chǎn)中的應(yīng)用
1.6.2 在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用
1.6.3 在品質(zhì)改良中的應(yīng)用
1.6.4 在園林觀賞中的應(yīng)用
第2章 引言
第3章 水稻黃綠葉突變體ygl16的表型鑒定與基因定位
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 試劑盒
3.1.3 主要試劑及酶
3.1.4 主要儀器設(shè)備
3.1.5 主要試劑配方
3.2 方法與步驟
3.2.1 表型及農(nóng)藝性狀分析
3.2.2 光合色素含量及光合參數(shù)測(cè)定
3.2.2.1 光合色素含量測(cè)定
3.2.2.2 光合參數(shù)測(cè)定
3.2.3 透射電鏡觀察葉綠體超微結(jié)構(gòu)
3.2.4 基因組DNA提取及PCR程序
3.2.4.1 基因組DNA的提取
3.2.4.2 基因定位PCR反應(yīng)體系及程序
3.2.4.3 序列測(cè)定PCR反應(yīng)體系及程序
3.2.5 基因定位和遺傳圖譜構(gòu)建
3.2.5.1 連鎖標(biāo)記的開(kāi)發(fā)
3.2.5.2 聚丙烯酰胺凝膠電泳
3.2.5.3 遺傳圖譜構(gòu)建
3.2.6 候選基因的分析
3.2.6.1 PCR產(chǎn)物的回收
3.2.6.2 PCR產(chǎn)物的連接
3.2.6.3 大腸桿菌感受態(tài)的制備
3.2.7 基因表達(dá)模式分析
3.2.7.1 提取總RNA
3.2.7.2 合成cDNA
3.2.7.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)反應(yīng)
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 表型及農(nóng)藝性狀
3.3.2 光合色素含量
3.3.3 光合特性分析
3.3.4 細(xì)胞學(xué)觀察
3.3.5 遺傳分析
3.3.6 基因定位
3.3.7 候選基因分析
3.3.8 YGL16的表達(dá)模式
3.3.9 相關(guān)基因的表達(dá)水平
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 水稻黃綠葉突變體ygl17的表型鑒定與基因定位
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.2 方法與步驟
4.2.1 生理指標(biāo)測(cè)定
4.2.2 其他方法與步驟同第三章
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 表型及農(nóng)藝性狀
4.3.2 光合特性及光合色素含量
4.3.3 生理指標(biāo)分析
4.3.4 細(xì)胞學(xué)觀察
4.3.5 遺傳分析與基因定位
4.3.6 候選基因分析
4.3.7 部分基因序列比對(duì)結(jié)果
4.3.8 相關(guān)基因的表達(dá)水平
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第5章 研究結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在校期間所參加的科研課題和發(fā)表論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻黃葉突變體yl1的遺傳分析和表型鑒定[J]. 趙紹路,宛柏杰,代金英,施偉,孫一標(biāo),卞蘭芹,程大勇,孫明法. 大麥與谷類(lèi)科學(xué). 2019(03)
[2]神奇的彩色水稻[J]. 何超. 湖南農(nóng)業(yè). 2019(05)
[3]水稻葉色黃化不育系H08S雜交組合產(chǎn)量分析[J]. 沈建凱,林秋云,賀治洲,謝振宇. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(02)
[4]水稻白條紋葉突變體wsl1的生理特性分析及基因定位[J]. 任永梅,王嘉宇,王琬璐,王棋,姜鑫,劉振宇,朱琳. 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[5]水稻溫敏型葉片白化轉(zhuǎn)綠突變體tsa2的表型鑒定與基因定位[J]. 尚麗娜,陳新龍,米勝南,委剛,王玲,張雅怡,雷霆,林永鑫,黃蘭杰,朱美丹,王楠. 作物學(xué)報(bào). 2019(05)
[6]水稻一新黃綠葉突變體ygl10-2(t)的遺傳分析與基因定位[J]. 張文慧,楊宜豪,陳銘蔚,王詩(shī)語(yǔ),余艷歡,嚴(yán)長(zhǎng)杰,郭旻. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2019(01)
[7]一個(gè)水稻黃綠葉突變體ygl15的鑒定和基因定位[J]. 魏玲霞,王穎,郭蓉,杜丹,毛英杰,楊超,黃英金,王兆海. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2019(02)
[8]水稻低溫敏感葉色突變體tcd32鑒定與遺傳分析[J]. 王妍斌,周優(yōu),林冬枝,董彥君. 上海師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(05)
[9]水稻黃綠葉基因Yellow-Green Leaf 6(YGL6)的表達(dá)模式與蛋白定位[J]. 施軍瓊,王亞琴,張?zhí)烊?馬玲,桑賢春,何光華. 作物學(xué)報(bào). 2018(05)
[10]水稻黃綠葉突變體ygl-63的特征和基因定位[J]. 張亮行,張帆濤,聶麗,萬(wàn)令飛,梁劍秋,張雨佳,馬羊帥,謝建坤. 廣西植物. 2016(08)
碩士論文
[1]水稻新黃綠葉基因YGL9的鑒定和圖位克隆[D]. 張?zhí)烊?西南大學(xué) 2016
[2]水稻黃綠葉突變體ygl82的遺傳分析與基因定位[D]. 肖云華.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]水稻黃葉基因YGL3的遺傳分析和精細(xì)定位[D]. 杜鵬.西南大學(xué) 2011
本文編號(hào):3192138
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摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 水稻葉色突變體及其分類(lèi)
1.2 葉色突變體的來(lái)源
1.2.1 自然誘變
1.2.2 人工誘變
1.2.3 基因操作技術(shù)引起的突變
1.3 水稻黃綠葉突變體研究概況
1.4 水稻葉色突變基因的研究進(jìn)展
1.4.1 已定位的葉色突變體
1.4.2 已克隆的葉色突變基因
1.5 葉色突變的分子機(jī)理
1.5.1 葉綠體形成和發(fā)育受阻
1.5.2 葉綠素代謝途徑受阻
1.5.3 輔助色素代謝途徑受阻
1.5.4 質(zhì)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑受阻
1.6 葉色突變體的應(yīng)用
1.6.1 在育種生產(chǎn)中的應(yīng)用
1.6.2 在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用
1.6.3 在品質(zhì)改良中的應(yīng)用
1.6.4 在園林觀賞中的應(yīng)用
第2章 引言
第3章 水稻黃綠葉突變體ygl16的表型鑒定與基因定位
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 試劑盒
3.1.3 主要試劑及酶
3.1.4 主要儀器設(shè)備
3.1.5 主要試劑配方
3.2 方法與步驟
3.2.1 表型及農(nóng)藝性狀分析
3.2.2 光合色素含量及光合參數(shù)測(cè)定
3.2.2.1 光合色素含量測(cè)定
3.2.2.2 光合參數(shù)測(cè)定
3.2.3 透射電鏡觀察葉綠體超微結(jié)構(gòu)
3.2.4 基因組DNA提取及PCR程序
3.2.4.1 基因組DNA的提取
3.2.4.2 基因定位PCR反應(yīng)體系及程序
3.2.4.3 序列測(cè)定PCR反應(yīng)體系及程序
3.2.5 基因定位和遺傳圖譜構(gòu)建
3.2.5.1 連鎖標(biāo)記的開(kāi)發(fā)
3.2.5.2 聚丙烯酰胺凝膠電泳
3.2.5.3 遺傳圖譜構(gòu)建
3.2.6 候選基因的分析
3.2.6.1 PCR產(chǎn)物的回收
3.2.6.2 PCR產(chǎn)物的連接
3.2.6.3 大腸桿菌感受態(tài)的制備
3.2.7 基因表達(dá)模式分析
3.2.7.1 提取總RNA
3.2.7.2 合成cDNA
3.2.7.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)反應(yīng)
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 表型及農(nóng)藝性狀
3.3.2 光合色素含量
3.3.3 光合特性分析
3.3.4 細(xì)胞學(xué)觀察
3.3.5 遺傳分析
3.3.6 基因定位
3.3.7 候選基因分析
3.3.8 YGL16的表達(dá)模式
3.3.9 相關(guān)基因的表達(dá)水平
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 水稻黃綠葉突變體ygl17的表型鑒定與基因定位
4.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.2 方法與步驟
4.2.1 生理指標(biāo)測(cè)定
4.2.2 其他方法與步驟同第三章
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 表型及農(nóng)藝性狀
4.3.2 光合特性及光合色素含量
4.3.3 生理指標(biāo)分析
4.3.4 細(xì)胞學(xué)觀察
4.3.5 遺傳分析與基因定位
4.3.6 候選基因分析
4.3.7 部分基因序列比對(duì)結(jié)果
4.3.8 相關(guān)基因的表達(dá)水平
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第5章 研究結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在校期間所參加的科研課題和發(fā)表論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻黃葉突變體yl1的遺傳分析和表型鑒定[J]. 趙紹路,宛柏杰,代金英,施偉,孫一標(biāo),卞蘭芹,程大勇,孫明法. 大麥與谷類(lèi)科學(xué). 2019(03)
[2]神奇的彩色水稻[J]. 何超. 湖南農(nóng)業(yè). 2019(05)
[3]水稻葉色黃化不育系H08S雜交組合產(chǎn)量分析[J]. 沈建凱,林秋云,賀治洲,謝振宇. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(02)
[4]水稻白條紋葉突變體wsl1的生理特性分析及基因定位[J]. 任永梅,王嘉宇,王琬璐,王棋,姜鑫,劉振宇,朱琳. 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(01)
[5]水稻溫敏型葉片白化轉(zhuǎn)綠突變體tsa2的表型鑒定與基因定位[J]. 尚麗娜,陳新龍,米勝南,委剛,王玲,張雅怡,雷霆,林永鑫,黃蘭杰,朱美丹,王楠. 作物學(xué)報(bào). 2019(05)
[6]水稻一新黃綠葉突變體ygl10-2(t)的遺傳分析與基因定位[J]. 張文慧,楊宜豪,陳銘蔚,王詩(shī)語(yǔ),余艷歡,嚴(yán)長(zhǎng)杰,郭旻. 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2019(01)
[7]一個(gè)水稻黃綠葉突變體ygl15的鑒定和基因定位[J]. 魏玲霞,王穎,郭蓉,杜丹,毛英杰,楊超,黃英金,王兆海. 核農(nóng)學(xué)報(bào). 2019(02)
[8]水稻低溫敏感葉色突變體tcd32鑒定與遺傳分析[J]. 王妍斌,周優(yōu),林冬枝,董彥君. 上海師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(05)
[9]水稻黃綠葉基因Yellow-Green Leaf 6(YGL6)的表達(dá)模式與蛋白定位[J]. 施軍瓊,王亞琴,張?zhí)烊?馬玲,桑賢春,何光華. 作物學(xué)報(bào). 2018(05)
[10]水稻黃綠葉突變體ygl-63的特征和基因定位[J]. 張亮行,張帆濤,聶麗,萬(wàn)令飛,梁劍秋,張雨佳,馬羊帥,謝建坤. 廣西植物. 2016(08)
碩士論文
[1]水稻新黃綠葉基因YGL9的鑒定和圖位克隆[D]. 張?zhí)烊?西南大學(xué) 2016
[2]水稻黃綠葉突變體ygl82的遺傳分析與基因定位[D]. 肖云華.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]水稻黃葉基因YGL3的遺傳分析和精細(xì)定位[D]. 杜鵬.西南大學(xué) 2011
本文編號(hào):3192138
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