艾納香（Blumea balsamifera L.DC）為菊科艾納香屬多年生木質(zhì)草本植物,最早記載于公元741年（唐開元二十九年）陳藏器所編著《本草拾遺》,此后宋代劉翰等編著《開寶本草》（公元973-974年）也曾記載。艾納香以根、嫩枝、葉入藥,其性微溫,味辛、微苦,具有祛風(fēng)消腫、活血散瘀之功效,可用于治療感冒、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、產(chǎn)后風(fēng)痛、痛經(jīng);外傷跌打等。主要分布于我國海南、貴州、廣西、廣東、云南、臺(tái)灣等省。雖然,關(guān)于艾納香中揮發(fā)油及生物堿的含量及在不同栽培環(huán)境、措施及品種間有一定的報(bào)道,但是目前的研究均未能揭示艾納香生長發(fā)育規(guī)律與活性成分的形成和積累的關(guān)系,以及外界激素等誘導(dǎo)因子處理下活性物質(zhì)積累的響應(yīng)規(guī)律,更不能從本質(zhì)上揭示活性物質(zhì)的生物合成機(jī)制、代謝調(diào)控途徑及調(diào)控水平。為此,本課題采用轉(zhuǎn)錄組測序的方法,挖掘萜類化合物代謝途徑上的相關(guān)基因。根據(jù)系統(tǒng)發(fā)育分析和同源性比較,篩選代謝途徑中的限速酶基因,采用體外施用信號(hào)分子（MeJA、SA等）的方法,檢測主要活性成分L-龍腦的響應(yīng)規(guī)律,同時(shí)檢測萜類代謝途徑中各基因的轉(zhuǎn)錄水平。本課題的研究內(nèi)容主要包括:1.以不同濃度的茉莉酸甲酯（MeJA）和... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 艾納香研究現(xiàn)狀
    1.2 轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的研究
    1.3 研究目的與意義
第二章 茉莉酸甲酯（MeJA）與水楊酸（SA）對艾納香葉片L-龍腦含量的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 試劑
        2.1.3 儀器
        2.1.4 方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 艾納香不同葉位葉片在不同濃度MeJA處理后L-龍腦含量隨時(shí)間的變化規(guī)律
        2.2.2 艾納香不同葉位葉片在不同濃度SA處理后L-龍腦含量隨時(shí)間的變化規(guī)律
    2.3 本章小結(jié)
第三章 茉莉酸甲酯（MeJA）與水楊酸（SA）對艾納香抗氧化酶活力的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 試劑
        3.1.3 儀器
    3.2 方法
        3.2.1 試劑配制與材料處理
        3.2.2 酶活力測定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 SA不同濃度對艾納香抗氧化酶活性的影響
        3.3.2 MeJA不同濃度對艾納香抗氧化酶活性的影響
    3.4 本章小結(jié)
第四章 艾納香花和葉片的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)組裝及基因功能注釋
    4.1 材料與方法
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 RNA的提取與分離
        4.1.3 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的獲得
        4.1.4 原始數(shù)據(jù)處理及生物信息學(xué)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)組裝
        4.2.2 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)拼接結(jié)果及基因預(yù)測
        4.2.3 基因功能注釋
    4.3 本章小結(jié)
第五章 艾納香萜類物質(zhì)生物合成途徑分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果
        5.2.2 代謝途徑與涉及基因
        5.2.3 萜類骨架代謝途徑分析
        5.2.4 單萜生物合成途徑分析
        5.2.5 二萜生物合成途徑分析
        5.2.6 三萜、倍半萜生物合成途徑分析
        5.2.7 艾納香萜類合成途徑中的關(guān)鍵酶分析
    5.3 本章小結(jié)
第六章 艾納香BbGPPS基因的克隆及序列分析
    6.1 材料與方法
        6.1.1 材料
        6.1.2 試劑
        6.1.3 葉片總RNA提取及BbGPPS全長cDNA的克隆
        6.1.4 BbGPPS基因的測序與分析
        6.1.5 數(shù)據(jù)分析
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 BbGPPS cDNA序列分析
        6.2.2 BbGPPS氨基酸序列分析
        6.2.3 BbGPPS跨膜區(qū)、信號(hào)肽、亞細(xì)胞定位分析
        6.2.4 BbGPPS疏水性分析
        6.2.5 BbGPPS序列比對
        6.2.6 蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測和三維建模
        6.2.7 BbGPPS與其他物種GPPS間系統(tǒng)進(jìn)化分析
    6.3 本章小結(jié)
第七章 艾納香BbGGPS基因的克隆及序列分析
    7.1 材料與方法
        7.1.1 植物材料
        7.1.2 試劑
        7.1.3 總RNA提取及BbGGPS全長cDNA的克隆
        7.1.4 BbGGPS基因的測序與分析
        7.1.5 艾納香BbGGPS基因的生物信息學(xué)分析
    7.2 結(jié)果與分析
        7.2.1 艾納香BbGGPS基因的克隆
        7.2.2 BbGGPS氨基酸序列分析
        7.2.3 多序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析
    7.3 本章小結(jié)
第八章 q-PCR檢測GPPS基因與TPS基因表達(dá)對MeJA處理的響應(yīng)
    8.1 材料與方法
        8.1.1 植物材料
        8.1.2 主要試劑
        8.1.3 主要儀器
        8.1.4 試驗(yàn)方法
    8.2 結(jié)果與分析
        8.2.1 引物設(shè)計(jì)與序列
        8.2.2 常規(guī)PCR結(jié)果
        8.2.3 目的基因與內(nèi)參基因的熔解曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線
        8.2.4 GPPS基因表達(dá)分析
        8.2.5 TPS基因的表達(dá)分析
    8.3 本章小結(jié)
第九章 結(jié)果、結(jié)論與討論
    9.1 結(jié)果
        9.1.1 外源誘導(dǎo)劑的篩選
        9.1.2 艾納香轉(zhuǎn)錄組測序
        9.1.3 艾納香萜類合成基因的克隆
        9.1.4 艾納香萜類合成途徑預(yù)測
        9.1.5 GPPS基因和TPS基因的q-PCR表達(dá)分析
    9.2 結(jié)論與討論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]艾片與合成冰片腦保護(hù)及其對血腦屏障影響機(jī)制的研究[D]. 田徽.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[3]魚腥草單萜次生代謝研究[D]. 徐應(yīng)文.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012

碩士論文
[1]外源水楊酸誘導(dǎo)煙草抗青枯病的作用及機(jī)理研究[D]. 程小龍.西南大學(xué) 2014
[2]外源茉莉酸甲酯誘導(dǎo)對茶樹鮮葉次生代謝產(chǎn)物的影響[D]. 施江.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
[3]外源性水楊酸誘導(dǎo)月季對黑斑病抗性的研究[D]. 金一鋒.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]艾納香的活性成分研究[D]. 陳銘.上海交通大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3180747