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大豆熱激蛋白基因HSP17.4的植物表達(dá)載體構(gòu)建和耐熱功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 03:35
  大豆是我國主要的糧食、油料作物,極具開發(fā)潛力。其蒸騰系數(shù)、需水量較大,耐高溫、抗干旱能力較弱,生育期遭遇高溫、干旱,是造成大豆減產(chǎn)的一個(gè)重要因素。近年來,溫室效應(yīng)現(xiàn)象逐漸增強(qiáng),全球氣候不斷變暖,高溫所帶來的減產(chǎn)問題不容忽視,對于植物的耐熱性研究也越來越多。熱激蛋白(Heat20Shock20Protein,HSP)是生物體在遭受外界脅迫刺激(高溫、干旱、凍害、金屬離子等)時(shí)合成的一類對生物體起保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。其中小分子熱激蛋白(Small20Heat20Shock20Protein,sHSP)是其中種類最多、最為重要的一類。sHSP在脅迫刺激下能夠迅速合成,減少脅迫刺激對生物體的傷害、增強(qiáng)生物體的耐受能力,對生物體抗逆境脅迫有重要的意義。本試驗(yàn)把從大豆吉農(nóng)18中克隆的HSP17.4基因成功構(gòu)建了以除草劑為篩選標(biāo)記的植物過表達(dá)載體pCPB-HSP17.4和RNA干擾表達(dá)載體pCPB-HSP17.4-RNAi,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和花粉管通道法將其導(dǎo)入受體大豆品種“吉農(nóng)18”中。對其后代植株進(jìn)行分子生物學(xué)檢測和生理生化檢測,從而驗(yàn)證HSP17.4基因與大豆耐高溫能力相關(guān)且過表達(dá)HSP17.4... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物耐高溫研究進(jìn)展
    1.2 熱激蛋白
    1.3 小分子熱激蛋白
    1.4 研究目的與意義
第二章 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
    2.3 大豆遺傳轉(zhuǎn)化
    2.4 轉(zhuǎn)化植株的后代檢測
    2.5 轉(zhuǎn)化植株的耐高溫鑒定
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
    3.2 大豆遺傳轉(zhuǎn)化
    3.3 轉(zhuǎn)化植株的PCR檢測
    3.4 轉(zhuǎn)化植株的Southern blotting檢測
    3.5 轉(zhuǎn)化植株的熒光定量PCR檢測
    3.6 轉(zhuǎn)化植株的耐高溫鑒定
第四章 討論與結(jié)論
    4.1 討論
    4.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]熱激蛋白60的研究進(jìn)展[J]. 張?zhí)鹛?曹園園,崔雪嬌,于志軍,胡永紅.  河北師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(06)
[2]抗蟲基因cry1Ab13在大豆中的遺傳轉(zhuǎn)化及抗蟲性鑒定[J]. 高嵩,何歡,吳楠,韓丹,曲靜,張君,張鳳晶,王丕武.  大豆科學(xué). 2016(04)
[3]水稻熱激蛋白基因HSP90轉(zhuǎn)化大豆的研究[J]. 于志晶,尚麗霞,蔡勤安,孟凡鋼,馬瑞.  大豆科學(xué). 2016(02)
[4]草莓果實(shí)小分子量熱激蛋白基因FaHSP17.4的克隆及表達(dá)分析[J]. 李剛,趙霞,周路,周厚成.  分子植物育種. 2016(02)
[5]高溫脅迫對不同品種羽衣甘藍(lán)幼苗葉的生理特性及SOD、POD同工酶的影響[J]. 李大紅,趙麗,李貞,孫小茹.  北方園藝. 2015(19)
[6]核桃JrsHSP17.3基因克隆及溫度脅迫響應(yīng)模式分析[J]. 楊桂燕,賈彩霞,孫宇棟,李鳴,翟梅枝.  西北植物學(xué)報(bào). 2015(09)
[7]玉米小分子熱激蛋白ZmHSP17.7基因的克隆與功能分析[J]. 孫愛清,葛淑娟,董偉,單曉笛,董樹亭,張杰道.  作物學(xué)報(bào). 2015(03)
[8]Southern雜交技術(shù)在農(nóng)作物遺傳轉(zhuǎn)化研究中的應(yīng)用[J]. 代軍.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(01)
[9]大豆超高產(chǎn)育種研究進(jìn)展的討論[J]. 杜維廣,蓋鈞鎰.  土壤與作物. 2014(03)
[10]植物熱激轉(zhuǎn)錄因子基因家族的研究進(jìn)展[J]. 黃小云,陶鵬,李必元,王五宏,岳智臣,雷娟利,鐘新民.  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(09)

博士論文
[1]產(chǎn)業(yè)鏈視角下的中國大豆產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)研究[D]. 楊樹果.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]玉米胞質(zhì)Ⅰ類小分子量熱激蛋白基因ZmHSP16.9的分離及功能分析[D]. 孫立平.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012

碩士論文
[1]大豆查爾酮還原酶基因CHR120RNA干擾表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 吳楠.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]百合小熱激蛋白的克隆及初步分析[D]. 潘佳佳.蘭州大學(xué) 2010
[3]小麥耐熱性鑒定及熱激蛋白基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 陳小霞.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號:3176539

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