黑麥（Secale cereale L.）是小麥（Triticum aestivum L.）的近緣種屬,其攜帶的優(yōu)異基因在小麥育種中扮演了重要角色�？焖俨蚀_的鑒定小麥背景中的黑麥染色質可以加快黑麥優(yōu)異基因在小麥育種中的應用。目前開發(fā)出很多黑麥分子標記,但基于PCR和瓊脂糖凝膠電泳的黑麥染色體臂特異分子標記還較少。因此,開發(fā)更多基于PCR的黑麥染色體臂特異分子標記,尤其是適合于瓊脂糖凝膠電泳的分子標記對鑒定小麥背景中的黑麥染色質很有必要。本實驗利用SLAF-seq技術開發(fā)出新的基于PCR和瓊脂糖凝膠電泳的黑麥特異分子標記。同時利用小麥-黑麥單體附加系和單端體附加系將特異分子標記定位到黑麥染色體臂上。再用另外兩套小麥-黑麥二體附加系CS-Imperial和Holdfast-KingⅡ對以上黑麥染色體特異分子標記進行通用性驗證。研究結果如下:1、從普通小麥綿陽11（MY11）×黑麥Kustro的后代材料中,鑒定出了全套單體附加系MA1R^Ku-7RKu以及13個單端體附加系MTA1RSKu、MTA1RLKu、MTA2RSKu、MTA2RLKu、MTA3RSKu、MTA4... 

【文章來源】：四川農業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１黑麥Ｋｕｓｔｒｏ標準ＮＤ－ＦＩＳＨ？??注：以?０１ｉｇｏ－Ｓｃｌｌ９．２－ｌ?（綠色）、Ｏｌｉｇｏ－１１６２?（紅色）、０１ｉｇｏ－ｐＳｃ２００?（紅色）和Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０?（紅??

Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２００（ｒｅｄ）?，Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０（ｒｅｄ）?ａｎｄ?０１ｉｇｏ－ｐＴａ５３５－１?（ｒｅｄ）?ａｓ?ｐｒｏｂｅｓ，?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ?ｗｅｒｅ??ｃｏｕｎｔｅｒｓｔａｉｎｅｄ?ｗｉｔｈ?ＤＡＰＩ（ｂｌｕｅ）．??圖３中，同理可判斷出黑麥染色質，結合圖１中Ｋｕｓｔｒｏ染色體標準圖中??０１ｉｇｏ－ｐＳｃｌｌ９．２－ｌ綠色信號分布，可以判斷出該黑麥染色體為黑麥２Ｒ染色體。２Ｒ染色??體為近中著絲粒；短臂和長臂端部均有２個０１ｉｇｏ－ＰＳｃｌｌ９．２－ｌ信號，且短臂上的??Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃｌ?１９．２－１信號明顯強于長臂上的Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃｌ?１９．２－１信號。??圖３普通小麥綿陽１１－黑麥Ｋｕｓｔｒｏ?２Ｒ單體附加系及２ＲＳ、２ＲＬ單端體附加系??圖Ｄ：２Ｒ單體附加系；圖Ｅ：２ＲＳ單端體附加系；圖Ｆ：小麥－黑麥１ＲＬ單端體附加系。??注：以?０１ｉｇｏ－ｐＳｃｌｌ９．２－ｌ?（綠色）、Ｏｌｉｇｏ－１１６２?（紅色）、Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２００?（紅色）、Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０?（紅??色）和０１ｉｇｏ－ｐＴａ５３５－ｌ?（紅色）為探針進行ＮＤ－ＦＩＳＨ分析，染色體用ＤＡＰＩ染色（藍色）。??Ｆｉｇ．３?ＭＹ?１１－Ｋｕｓｔｒｏ?２Ｒ?ｍｏｎｏｓｏｍｉｃ?ａｄｄｉｔｉｏｎ?ｌｉｎｅ?ａｎｄ?２ＲＳ

因此使用（ＡＡＣ）６區(qū)分其長短臂。所以，本實驗共以Ｏｌｉｇｏ－１１６２、０１ｉｇｏ－ｐＳｃ２００、??Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０、０１ｉｇｏ－ｐＳｃｌｌ９．２－丨和（ＡＡＣ）６為探針，從小麥－黒麥雜交后代中鑒定出了??普通小麥綿陽１１?－黑麥Ｋｕｓｔｒｏ單體附加系和單端體附加系（圖２至圖８?）。??０１ｉｇｏ－ｐＴａ５３５－ｌ主要在小麥Ａ組和Ｄ組染色體產生雜交信號，不與黑麥染色體產生雜??交信號。??圖１黑麥Ｋｕｓｔｒｏ標準ＮＤ－ＦＩＳＨ？??注：以?０１ｉｇｏ－ｐＳｃｌｌ９．２－ｌ?（綠色）、Ｏｌｉｇｏ－１１６２?（紅色）、０１ｉｇｏ－ｐＳｃ２００?（紅色）和Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０?（紅??色）為探針進行ＮＤ－ＦＩＳＨ分析，染色體用ＤＡＰＩ染色（藍色）。??Ｆｉｇ．ｌ?Ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ＮＤ－ＦＩＳＨ?ｐａｔｔｅｒｎｓ?ｉｎ?Ｋｕｓｔｒｏ??Ｎｏｔｅ：ＮＤ－ＦＩＳＨ?ｕｓｅｄ?Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃｌ?１９．２－１?（ｇｒｅｅｎ），?０１ｉｇｏ－ｌ?１６２（ｒｅｄ），?０１ｉｇｏ－ｐＳｃ２００（ｒｅｄ）?ａｎｄ??Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０（ｒｅｄ）?ａｓ?ｐｒｏｂｅｓ，?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ?ｗｅｒｅ?ｃｏｕｎｔｅｒｓｔａｉｎｅｄ?ｗｉｔｈ?ＤＡＰＩ（ｂｌｕｅ）．??圖２中，通過Ｏｌｉｇｏ－１１６２、０１ｉｇｏ－ｐＳｃ２００和Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃ２５０紅色信號可以區(qū)分出黑麥??染色質，結合圖１中Ｋｕｓｔｒｏ染色體標準圖里Ｏｌｉｇｏ－ｐＳｃｌ?１９．２－１的綠色信號分布，可以判??斷出該黑麥染色體為黑麥１Ｒ染色體。１Ｒ染色體為近中著絲粒

【參考文獻】：
期刊論文
[1]棉花單核苷酸多態(tài)性標記研究進展[J]. 王振玉,李威,周曉箭,裴小雨,劉艷改,周克海,張文生,孟清芹,王海風,葛勇,李瑩,劉俊芳,馬雄風,楊代剛.  棉花學報. 2016(04)
[2]Identification and Physical Mapping of New PCR-Based Markers Specific for the Long Arm of Rye（Secale cereale L.） Chromosome 6[J]. Meng Li,Zongxiang Tang,Ling Qiu,Yangyang Wang,Shuyao Tang,Shulan Fu.  Journal of Genetics and Genomics. 2016(04)
[3]小麥-黑麥小片段易位的快中子輻照誘導[J]. 楊漫宇,符書蘭,陳曉明,張懷瓊,唐宗祥,任正隆.  麥類作物學報. 2014(05)
[4]黑麥屬植物的遺傳學研究與利用[J]. 王林生,宋鵬.  生物學通報. 2010(08)
[5]利用小麥微衛(wèi)星引物建立黑麥特異標記及其局限性[J]. 田茂潔,唐宗祥.  西華師范大學學報(自然科學版). 2009(01)
[6]小麥SSR引物擴增黑麥及附加系6R染色體特異DNA片段的克隆[J]. 唐宗祥,符書蘭,張懷瓊,晏本菊,任正隆.  麥類作物學報. 2008(05)
[7]小麥EST-SSR標記的開發(fā)和染色體定位及其在追蹤黑麥染色體中的應用[J]. 莊麗芳,宋立曉,馮祎高,錢保俐,徐海濱,裴自友,亓增軍.  作物學報. 2008(06)
[8]普通小麥近緣物種黑麥1R、簇毛麥1V及鵝觀草1Rk#1染色體特異分子標記的篩選[J]. 王春梅,馮祎高,莊麗芳,曹亞萍,亓增軍,別同德,曹愛忠,陳佩度.  作物學報. 2007(11)
[9]黑麥基因組特異DNA片段的分離與SCAR標記的建立[J]. 劉成,李光蓉,楊足君,馮娟,周建平,任正隆.  西北植物學報. 2006(12)
[10]黑麥在小麥改良中的應用研究進展[J]. 吳金華,吉萬全,李鳳珍.  麥類作物學報. 2005(01)

碩士論文
[1]含抗白粉病基因的黑麥染色體小片段向小麥的轉移[D]. 符書蘭.四川農業(yè)大學 2006



本文編號：3117277