淀粉是玉米籽粒的主要組成部分,淀粉的總量以及直鏈淀粉與支鏈淀粉的比值與玉米的產(chǎn)量、食用品質(zhì)、工業(yè)品質(zhì)密切相關(guān)。籽粒中淀粉的合成需要ADPG焦磷酸化酶（AGPase）、淀粉合成酶（SSs）、淀粉分支酶（SBE）和淀粉去分支酶（DBE）等酶的協(xié)同作用。OPAQUE2（O2）蛋白在玉米胚乳代謝途徑中發(fā)揮重要的調(diào)控作用,本課題前期工作發(fā)現(xiàn)O2蛋白參與胚乳中淀粉的合成,本實(shí)驗(yàn)在此基礎(chǔ)上以CAL58和構(gòu)建好的o2近等基因系CAL58/o2為材料,分析O2蛋白在淀粉合成途徑中的調(diào)控作用,便于未來開發(fā)更有價(jià)值的玉米。本文章的主要研究結(jié)果如下:1.對(duì)CAL58和CAL58/o2的籽粒進(jìn)行表型分析。與野生型飽滿的硬質(zhì)胚乳相比,o2突變體的籽粒表面皺縮,質(zhì)地較軟,胚所占的比例高,并且籽粒百粒重顯著下降;通過CAL58和CAL58/o2的亞顯微結(jié)構(gòu)分析,發(fā)現(xiàn)在兩個(gè)材料中淀粉顆粒和蛋白體在體積、形狀、分布以及兩者的結(jié)合情況等方面差異較大;營養(yǎng)成分分析結(jié)果顯示,O2基因突變后籽粒的主要營養(yǎng)成分的含量發(fā)生明顯的變化;醇溶蛋白的SDS-PAGE結(jié)果分析表明,在o2突變體中α和β-醇溶蛋白的含量明顯降低,γ-醇溶蛋白的... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

淀粉合成路徑示意圖(劉德瑞等，2011)

圖 1.2 RNA 測序原理圖(賈昌路等，2015)Figure 1.2 RNA sequencing schematic diagram技術(shù)最成熟穩(wěn)定的當(dāng)屬 Illumina 公司，但是其測r et al., 2013）。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)首先要明確實(shí)驗(yàn)材料是可以選擇單端測序，不僅經(jīng)濟(jì)又能滿足基本的高的雙端測序更適合（Williams et al., 2014）。一測過程中的錯(cuò)誤次數(shù)也會(huì)增加，因此要控制數(shù)數(shù)據(jù)可靠性，一般建議設(shè)置至少 3 個(gè)生物學(xué)重（Liu et al., 2014）。個(gè)部分。第一是樣品的比對(duì)與組裝。原始數(shù)據(jù)首C（Illumina 平臺(tái)常用）和 NGSQC（Patel et al序列與對(duì)應(yīng)的參考基因組進(jìn)行比對(duì)，重構(gòu)后得

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 CAL58 和 CAL58/o2 近等基因系表型分析② 電泳在電泳槽中放入凝膠裝置，加入 1 ×Tris-甘氨酸電泳緩沖液，將處理后的 30 μL 樣品全部加入凝膠的樣品槽中。打開電泳儀，開始先用 80 V 的電壓，待樣品進(jìn)入分離膠后將電壓改成 120 V。當(dāng)藍(lán)色染料靠近到凝膠底部時(shí)停止電泳。③ 染色與脫色電泳結(jié)束后，取出凝膠放入考馬斯亮藍(lán)染色液中染色 20 min，再用自來水洗脫過夜，期間更換自來水直至條帶清晰可見，照相記錄。2.2 結(jié)果與分析2.2.1 籽粒表型性狀分析如圖 2.1 所示，在自然光照射下 CAL58 的成熟籽粒飽滿且表皮富有光澤，而 CAL58/o2 籽粒皺縮表皮沒有光澤。橫縱切面圖可以看出 CAL58 籽粒質(zhì)地較硬蠟質(zhì)胚乳，而 CAL58/o2 籽粒質(zhì)地較軟粉質(zhì)胚乳且有部分空腔。在 CAL58/o2 中胚所占的比例高于 CAL58。在白熾燈的照射下，明顯看出 CAL58 的胚乳是透明的，而 CAL58/o2 的胚乳是不透明的。表明 O2 基因突變后，對(duì)籽粒的表型和質(zhì)地造成很大的影響。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]opaque2玉米近等基因系蛋白差異表達(dá)研究[D]. 顏娜.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015



本文編號(hào)：2963756