何首烏(Polygonum multiflorum(Thunb.))野生資源近年來日益減少,而其人工栽培尚缺乏科學(xué)的指導(dǎo)。本試驗(yàn)選址于湖北省十堰市丁家營鎮(zhèn),采用“3414”不完全施肥方案,測定了不同時期不同施肥處理下何首烏的部分生長指標(biāo)、生理指標(biāo)、活性成分含量和單株產(chǎn)量,研究了何首烏不同部位藥用成分動態(tài)積累的規(guī)律和化學(xué)指紋圖譜,旨在摸索出配方施肥對何首烏生長發(fā)育及品質(zhì)形成的影響,為實(shí)現(xiàn)何首烏優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)栽培提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.何首烏主莖在每年9月之前生長較快,之后進(jìn)入塊根膨大期,地上部分生長變緩而地下干物質(zhì)積累迅速增加。與N_0P_0K_0(試驗(yàn)對照)相比,施肥處理顯著增加何首烏主莖莖粗和地下干物質(zhì)積累量,其中N_3P_2K_2處理對何首烏主莖生長的促進(jìn)作用最為顯著,而N_2P_2K_2處理對何首烏地下干物質(zhì)積累的促進(jìn)作用最為顯著,說明合理的氮、鉀配比施肥可促進(jìn)何首烏生長、提高產(chǎn)量。2.與N_0P_0K_0處理相比,施肥處理可提高何首烏總氮、總鉀、總磷以及可溶性總糖含量,各指標(biāo)均在N_2或N_3配合K_2或K_3水平下達(dá)到最大值,說明中、高水平的氮肥和鉀肥處理有利于何首烏植株的養(yǎng)分累積。3.二苯乙烯苷在何首烏不同部位中含量高低順序?yàn)?未膨大根塊根莖葉,其中根部二苯乙烯苷的含量在第1年和第2年期間持續(xù)增加,進(jìn)入第3年后含量變化幅度較小;莖中的二苯乙烯苷含量在每年9月之前迅速增加,而進(jìn)入塊根膨大期后呈現(xiàn)下降趨勢;葉中的含量極低。各施肥處理均顯著提高何首烏各部位的二苯乙烯苷含量,在N_1P_2K_2處理下達(dá)到最大值,說明低氮和中鉀的施肥處理最有利于何首烏植株累積二苯乙烯苷。蒽醌類物質(zhì)在何首烏不同部位中含量高低順序?yàn)?未膨大根塊根莖葉。何首烏根部結(jié)合大黃素、結(jié)合蒽醌和總蒽醌的含量在第1年和第2年期間持續(xù)增加,進(jìn)入第3年后含量顯著下降;相比之下結(jié)合大黃素甲醚和游離蒽醌的含量在3年期間的變化較小。莖中結(jié)合大黃素、結(jié)合蒽醌和總蒽醌含量在每年9月之前迅速增加而進(jìn)入塊根膨大期后有一定程度的下降;葉中的含量極低。各施肥處理均顯著提高何首烏中蒽醌類物質(zhì)的含量,其中大黃素和大黃素甲醚分別在N_3和K_3水平達(dá)到最大值,說明高水平的氮和鉀分別最有利于何首烏植株中大黃素和大黃素甲醚的累積。4.生長2年的何首烏單株產(chǎn)量(根干重)在N_2P_2K_2處理下達(dá)到最大值302.53 g,較N_0P_0K_0處理增加了142.90%,說明中氮和中鉀的施肥處理最有利何首烏產(chǎn)量的增加。第3年內(nèi)何首烏單株產(chǎn)量增加幅度明顯不如第2年,且活性成分的含量無增反減,因此,十堰地區(qū)何首烏人工栽培的最佳采收期為移栽后第2年冬季。5.化學(xué)指紋圖譜的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明了不同施肥處理下何首烏塊根中的成分組成一致,但含量存在一定差異,總體相似性很高;未膨大根亦然。何首烏塊根和未膨大根指紋圖譜的比較結(jié)果表明,塊根和未膨大根中成分組成基本相同,且未膨大根中的各組分含量更高。本研究結(jié)果表明,綜合考慮何首烏產(chǎn)量與質(zhì)量,十堰地區(qū)人工栽培何首烏最適施肥量為每年每公頃施純氮153.85 kg、有效磷112.5 kg、有效鉀95.36 kg,最佳采收期為扦插苗移栽后第2年冬季。此外,試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)何首烏未膨大根與其主要藥用部位塊根中物質(zhì)成分基本相同且含量更高,具有深度開發(fā)的價值。
【學(xué)位單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S567.239
【部分圖文】：

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018 屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文2.3.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作和樣品溶液的測定精密吸取一定體積標(biāo)準(zhǔn)品溶液中于容量瓶中分別稀釋成濃度為 800.0、400.0、200.0、100.0、50.0 和 20 .0 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。按 2.3.4.1 項(xiàng)條件檢測，以對照品溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，求出標(biāo)準(zhǔn)線性方程：Y= 31.10X+4.96（R=0.9999）。結(jié)果表明，二苯乙烯苷在 10.0~800.0 g/mL 濃度范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。將制備好的樣品溶液按 2.3.4.1 項(xiàng)條件進(jìn)行檢測，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算樣品中的二苯乙烯苷含量，每小區(qū) 3 次重復(fù)。二苯乙烯苷標(biāo)準(zhǔn)品和樣品 HPLC 色譜圖如圖 2 所示。

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018 屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文2.3.5.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作和樣品溶液的測定精密吸取一定體積大黃素和大黃素甲醚標(biāo)準(zhǔn)品溶液中于容量瓶中分別稀釋成濃度為 200.0、100.0、50.0、20.0、10.0 和 5.0 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。按 2.3.5.1 項(xiàng)條件檢測，以對照品溶液濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，求大黃素和大黃素甲醚的標(biāo)準(zhǔn)線性方程：大黃素：Y=39.40X+1.22（R=0.9997），大黃素甲醚：Y= 21.39X+0.42（R=0.9995）。結(jié)果表明，大黃素和大黃素在 5.0~200.0 g/mL 濃度范圍與峰面積線性關(guān)系良好。將制備好的樣品溶液按 2.3.5.1 項(xiàng)條件進(jìn)行檢測，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算樣品中的大黃素和大黃素甲醚含量，總蒽醌減去游離蒽醌即為結(jié)合蒽醌，每小區(qū) 3 次重復(fù)。大黃素和大黃素甲醚標(biāo)準(zhǔn)品和樣品 HPLC 色譜圖如圖 3 所示。

2.3.7.2 標(biāo)準(zhǔn)品和供試品溶液的制備精密稱取二苯乙烯苷（2,3,5,4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷）標(biāo)準(zhǔn)（CAS#82373-94-2 HPLC≥98%）適量，加 50%乙醇制成 800.0 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別精密稱取大黃素標(biāo)準(zhǔn)品（CAS#518-82-1 HPLC≥98%）和大黃素甲醚標(biāo)準(zhǔn)CAS#521-61-9 HPLC≥98%）適量，加甲醇制成含大黃素、大黃素甲醚各 200.0 g/m的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。稱取2016年12月份不同小區(qū)何首烏的未膨大根和塊根粉末各0.5 g，精密稱定分別置具塞錐形瓶中，精確加入 75%甲醇 25 mL，稱定重量，70 C 加熱回流 60 min放冷，再稱定質(zhì)量，用 75%甲醇補(bǔ)足損失的質(zhì)量，搖勻，靜置，上清液濾過，取濾液，0.45 m 微孔濾膜再過濾轉(zhuǎn)入 HPLC 專用樣品瓶，即得供試品溶液。將標(biāo)品溶液按 2.3.7.1 項(xiàng)條件進(jìn)行檢測，HPLC 色譜圖如圖 4 所示。
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本文編號：2857280