【摘要】：蕎麥?zhǔn)且环N藥食兩用的植物,其種子含有豐富的抗性淀粉,食用后血糖生成指數(shù)低,是糖尿病和心腦血管病人的首選食品;其花、葉和麩皮中含有豐富的類黃酮,具有很好的抗氧化作用和適當(dāng)?shù)钠咸烟擒彰浮⒌矸勖负椭久傅囊种谱饔�。在這個(gè)物產(chǎn)豐富的時(shí)代,健康食品的消費(fèi)使得蕎麥迅速流行起來(lái),對(duì)蕎麥需求量的增加不僅是蕎麥種子,而且還有蕎麥嫩葉、芽苗和提取物。在亞洲,嫩葉和芽苗常被用作蔬菜,葉子粉末被用作添加劑或天然實(shí)用色素;在尼泊爾和不丹一些野生的蕎麥被用作牛飼料。然而,研究者發(fā)現(xiàn)蕎麥中有一種具有光毒性的物質(zhì)-Fagopyrins,我們稱其為蕎麥光敏素。我國(guó)作為蕎麥生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó),非常有必要對(duì)蕎麥、尤其是植株和芽苗的安全性進(jìn)行評(píng)估,并對(duì)蕎麥光敏素的功能活性進(jìn)行研究,但目前國(guó)內(nèi)鮮有報(bào)道。本研究使用90%丙酮、純甲醇、60%冰醋酸和80%四氫呋喃分別提取蕎麥葉中的蕎麥光敏素,通過(guò)紫外-可見分光光度法和高效液相色譜法分析提取液中光敏素的含量及其紫外圖譜,并用電噴霧質(zhì)譜法對(duì)90%丙酮提取液中的光敏素進(jìn)行鑒定。最終確定90%丙酮為最佳提取劑,分光光度法為簡(jiǎn)便快速的分析方法,提取液中以FagopyrinF為主,含少量FagopyrinD和/或FagopyrinE。以光敏素含量為指標(biāo),通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明最佳提取條件為:丙酮濃度85%、料液比105:3(mg:mL)、提取溫度55℃和提取時(shí)間1.5 h,在此條件下,蕎麥葉光敏素含量為785.63μg/g。利用最佳提取條件測(cè)定蕎麥屬的不同品種、植株不同部位和不同生育期的光敏素含量,結(jié)果表明,金蕎葉光敏素含量高于甜蕎和苦蕎,最高可達(dá)1 638.44μg/g,而后兩者差異不明顯,含量分別為1 049.34~1 391.60μg/g和972.39~1 343.69μg/g;8種甜蕎花、葉和去殼種子的光敏素含量分別為818.67~1 834.46μg/g,483.20~1 282.44μg/g和54.83~98.30μg/g;除香甜蕎2號(hào)外,其余均是花的光敏素含量最高,整體來(lái)看,花中光敏素含量比葉高近1倍;而蕎麥種子的光敏素含量極低。不同生育期的蕎麥葉光敏素含量結(jié)果顯示,植株生長(zhǎng)初期,光敏素含量最高,為966.86~1 347.70μg/g,到中期略有降低,后期光敏素含量最低只有310.50~540.66μg/g,僅為初期1/2~1/3。蕎麥光敏素是一把雙刃劍,它可以用作光動(dòng)力治療,具有抗癌、抗菌等作用,但同時(shí)光敏素具有光毒性,食用后在光照條件下,皮膚會(huì)出現(xiàn)瘙癢、紅腫等皮炎反應(yīng),對(duì)于光敏素的這一弊端,本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探求蕎麥光敏素的光毒性作用。將昆明種小鼠分為5組,分別是空白對(duì)照組、避光高劑量組和光照低、中、高劑量組。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中,空白對(duì)照組和避光高劑量組的各項(xiàng)指標(biāo)沒有顯著性差異(P0.05),說(shuō)明在避光條件下,光敏素沒有對(duì)小鼠造成光毒性。皮膚觀察和切片結(jié)果表明,10 g體重小鼠每日食用40 g鮮芽苗,便可產(chǎn)生光敏反應(yīng)。用酶聯(lián)免疫法測(cè)定小鼠血清中表皮生長(zhǎng)因子、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素1β、白細(xì)胞介素8、白細(xì)胞介素10的含量,進(jìn)一步評(píng)估口服蕎麥芽苗對(duì)小鼠皮膚的光毒性作用及由此引起的相關(guān)炎癥反應(yīng),得到了與切片觀察相同的結(jié)果,光照低、中、高劑量組的各生化因子顯著性降低。血常規(guī)和臟器系數(shù)分析表明,光照低劑量組的各項(xiàng)指標(biāo)基本正常,光照中、高劑量組的部分血液指標(biāo)和脾臟、胸腺系數(shù)產(chǎn)生明顯變化。綜上所述,光照低劑量組便可產(chǎn)生光敏反應(yīng)和皮膚炎癥,隨著芽苗食用量的增加,對(duì)部分血液指標(biāo)和脾臟、胸腺系數(shù)也產(chǎn)生了明顯的影響。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S517
【圖文】：

圖 1.1 蕎麥光敏素可能的六種結(jié)構(gòu)Fig.1.1 Six possible structures of Fagopyrins的提取究者對(duì)蕎麥光敏素有了更深層次的探究，但是在提，有研究證明 30%的乙醇可以用來(lái)獲得高濃度的酚素[24]。2008 年，Ozbolt 用 80%的四氫呋喃作為提取[18]。2009 年，Eguchi 在提取蕎麥光敏素之前首先乙酸（80/10/10）的混合液作為提取劑，獲得了較純麥光敏素、蘆丁和槲皮素，可以用甲醇作為提取劑[也含有大量的葉綠素（尤其是蕎麥葉），花青素，，綠色成分在研究中可能會(huì)造成很大的誤差。為了究者就用二氯甲烷去除葉綠素，用 50%乙醇去除黃合液作為提取劑，此方法可以獲得更高純度的蕎麥

圖 2.1 不同提取液中光敏素含量Fig. 2.1 The content of Fagopyrins in different extract：將上述待測(cè)液用高效液相色譜法分析（圖 22 min。在 19~22 min，90%丙酮提取液和 80醇提取液只有兩個(gè)峰，而 60%冰醋酸提取液以待測(cè)液峰面積計(jì)算其光敏素含量（表 2.2）氫呋喃提取液中光敏素含量較高，而冰醋酸法，可以看出，分光光度法比高效液相色譜取液的吸收峰更接近 590 nm，且四氫呋喃毒 90%丙酮為最佳提取劑。

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本文編號(hào)：2722336