【摘要】：蛹蟲草是一種著名的珍稀食藥用真菌,是天然色素的潛在來源。色素含量是影響蛹蟲草子實(shí)體外觀和品質(zhì)的關(guān)鍵因素,因此色素產(chǎn)生及調(diào)控對蛹蟲草優(yōu)質(zhì)栽培具有重要意義。同時(shí),色素結(jié)構(gòu)和功能及其合成途徑的研究將為蛹蟲草的深度開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本研究取得如下主要結(jié)果:氮源對蛹蟲草生長和色素產(chǎn)生研究結(jié)果表明,氮源的種類和濃度影響蛹蟲草菌落形態(tài)和色素產(chǎn)生,在不同的氮源培養(yǎng)基中蛹蟲草菌落呈現(xiàn)不同的顏色;有機(jī)氮源更適合其生長和色素產(chǎn)生;蛋白胨和酵母提取物為氮源的培養(yǎng)基中菌落致密,產(chǎn)孢量極顯著高于其它氮源培養(yǎng)基(P0.01),菌落正面為橙黃色;子實(shí)體栽培中,在白光和藍(lán)光光照條件下均表現(xiàn)為蛋白胨濃度為1%時(shí)類胡蘿卜素含量最高,分別為2809.38±386.24μg/g和4093.75±518.37μg/g,表明藍(lán)光光照和1%蛋白胨濃度為子實(shí)體類胡蘿卜素產(chǎn)生的最佳條件。不同波長的光照對色素產(chǎn)生有顯著影響,兩段培養(yǎng)與子實(shí)體栽培情況下,類胡蘿卜素含量表現(xiàn)為藍(lán)光白光綠光粉光和紅光,藍(lán)光有助于蛹蟲草生長和色素積累。白光和藍(lán)光光強(qiáng)試驗(yàn)表明,白光光強(qiáng)超過735 lux時(shí)子實(shí)體出現(xiàn)不同程度的發(fā)白,影響品相和色素含量;藍(lán)光光強(qiáng)在17.3-64.3 lux范圍內(nèi)促進(jìn)子實(shí)體生長及色素產(chǎn)生,在64.3 lux時(shí)子實(shí)體類胡蘿卜素含量為3747.92±178.13μg/g。在兩段培養(yǎng)條件下,氧載體正十二烷和正十六烷在1-4%范圍內(nèi)促進(jìn)蛹蟲草菌絲生長和色素積累;10-60 mM過氧化氫可以促進(jìn)菌絲色素積累,表明氧載體和過氧化氫引起的氧化壓力均可顯著促進(jìn)類胡蘿卜素的產(chǎn)生。蛹蟲草菌絲及孢子均能產(chǎn)生色素,且色素產(chǎn)生于胞外。經(jīng)石油醚脫脂,甲醇萃取后,提取得到蛹蟲草中新型水溶性色素,提取率為29.46%,具有較好的抗氧化活性,DPPH·自由基清除率IC_(50)值為1.616±0.005 mg/ml,具有開發(fā)利用的潛力;經(jīng)液相-質(zhì)譜分析得到該化合物分子量為522,與已經(jīng)報(bào)道的色素均不相同。通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化(ATMT)的隨機(jī)插入法成功構(gòu)建了蛹蟲草突變體庫,并篩選得到114株白色突變株;白色突變株分生孢子紫外線耐受能力均明顯低于野生型菌株,表明蛹蟲草產(chǎn)生色素可能起到保護(hù)其自身免收紫外傷害的作用。本研究為富含色素的蛹蟲草子實(shí)體優(yōu)質(zhì)栽培提供了試驗(yàn)依據(jù),并證實(shí)了蛹蟲草色素具有開發(fā)成健康產(chǎn)品的潛力。
【學(xué)位授予單位】：沈陽師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S567.3
【圖文】：

圖 1-1 蟲草素結(jié)構(gòu)Fig.1-1 Structure of cordycepin素研究及應(yīng)用現(xiàn)狀色素的種類有機(jī)體具有各種不同顏色的物質(zhì)。廣泛存在于動(dòng)植物和微科技的進(jìn)步和眾多學(xué)者的深入研究，已發(fā)現(xiàn)真菌中存在從大型真菌紅汁乳菇中分離到一種新的綠色厑類色素；李桔紅色色素（王志勇，2004）子實(shí)體為暗紅色的血紅鉚釘菇色素由紅紫色素和黃色素兩個(gè)組分組成（李慧珍，19黃菌液態(tài)發(fā)酵生物色素條件時(shí)，得到一種蒽醌類天然色的紅色素和黃色素、粗糙脈孢菌（Neurospora crassa）的霉菌產(chǎn)生的番茄紅素、紅法夫酵母產(chǎn)生的蝦青素a glutinis）產(chǎn)生的β-胡蘿卜素等，后三者均屬于類胡蘿卜

成和調(diào)控機(jī)制研究的一種模式真菌。類胡蘿卜素與其他類異戊二烯的合成途徑同，合成過程中會產(chǎn)生一些中間體，如番茄紅素、β胡蘿卜素、葉黃素等，就前研究發(fā)現(xiàn)蝦青素為類胡蘿卜素生物合成的終端形態(tài)（張寧，2016）。其主要成途徑是由 IPP 和其異構(gòu)體二甲基丙烯基二磷酸（DMAPP）經(jīng)r{牛兒r{牛兒焦磷酸合成酶（GGPPS）依次催化合成r{牛兒焦磷酸 (GPP)、法尼基二磷酸PP)和r{牛兒基r{牛兒焦磷酸 (GGPP)（李福枝，2007）。r{牛兒r{牛兒基焦酸（GGPP）是類胡蘿卜素合成的前體，其中 2 分子的r{牛兒基r{牛兒基焦磷(GGPP)由八氫番茄紅素合成酶(PSY)催化合成 1 分子的八氫番茄紅素（王慧，14），經(jīng)過一系列脫氫反應(yīng)八氫番茄紅素形成番茄紅素。其中 Singkaravanit 等認(rèn)為 GGPPS 是類胡蘿卜素合成的關(guān)鍵酶之一；楊秋玲等人認(rèn)為類胡蘿卜素合途徑的首要限速酶是八氫番茄紅素合成酶(PSY)。番茄紅素經(jīng)過脫氫反應(yīng)形成胡蘿卜素從而形成β-胡蘿卜素，β-胡蘿卜素會進(jìn)一步經(jīng)過羥化酶和酮化酶的作合成玉米黃質(zhì)和葉黃素，從而合成蝦青素（檀棕萍，2008）�？偨Y(jié)文獻(xiàn)，真菌胡蘿卜素合成過程如圖 1-2。

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1 閆麗麗;;影響蛹蟲草生長發(fā)育及產(chǎn)量的因素[J];農(nóng)業(yè)科技與裝備;2019年03期

2 吳鴻雪;王忠;王錦峰;王長文;;蛹蟲草人工栽培及開發(fā)研究進(jìn)展[J];福建農(nóng)業(yè)科技;2019年01期

3 肖淑媛;胡長生;;蛹蟲草的規(guī)范化栽培技術(shù)[J];新校園(上旬);2016年09期

4 陳姝嫻;;冬蟲夏草與蛹蟲草之辨析[J];養(yǎng)生月刊;2017年02期

5 許y斏

本文編號：2719402