【摘要】：大豆是中度耐鹽作物,對(duì)鹽脅迫有一定的自我調(diào)節(jié)能力,但在高濃度鹽害情況下無法正常的生長(zhǎng),最終造成作物的減產(chǎn)。因此利用傳統(tǒng)育種方法和生物技術(shù)來篩選和培育耐鹽大豆品種,提升大豆在鹽漬土中的生產(chǎn)力能力,既可以提升當(dāng)前我國的大豆產(chǎn)量,解決供需不足問題,又可以改良土壤,具有很好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。本研究分別對(duì)栽培大豆和轉(zhuǎn)基因大豆進(jìn)行芽期、苗期和全生育期的耐鹽性鑒定。其中采用室內(nèi)水培法分別將98份大豆品種和57份鮮食大豆進(jìn)行萌芽期和苗期的耐鹽性鑒定,并通過隸屬函數(shù)法對(duì)20個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆材料進(jìn)行田間耐鹽性評(píng)價(jià),為今后培育耐鹽大豆品種提供依據(jù)。1.98份大豆材料芽期耐鹽性評(píng)價(jià):對(duì)98份大豆材料進(jìn)行鹽脅迫,通過測(cè)定種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、芽長(zhǎng)和側(cè)根數(shù)進(jìn)行耐鹽性篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在120mM氯化鈉的處理下,大豆種子的發(fā)芽情況存在明顯差異。其中茶豆、浙鮮9號(hào)、26008-1、SP349和浙764-38表現(xiàn)出較高的耐鹽性;而矮腳白毛、浙鮮21等58個(gè)品種表現(xiàn)出中度耐鹽性;SP327、03276等35個(gè)大豆品種未表現(xiàn)出耐鹽性。2.57份鮮食大豆材料苗期耐鹽性評(píng)價(jià):對(duì)苗期的大豆間隔一周分別進(jìn)行100mM氯化鈉和150mM氯化鈉脅迫,根據(jù)植株的鹽害指數(shù)進(jìn)行耐鹽性等級(jí)評(píng)定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有8個(gè)品種表現(xiàn)出高耐鹽性,9個(gè)品種表現(xiàn)出耐鹽性,12個(gè)品種表現(xiàn)出中度耐鹽性,10個(gè)品種表現(xiàn)對(duì)鹽脅迫敏感,18個(gè)品種對(duì)鹽脅迫高度敏感。鹽脅迫下表現(xiàn)出高度敏感的品種較多,其次為中度耐鹽型,高度耐鹽品種最少。其中502、早綠、3D099、遼31-7和U3112耐鹽性強(qiáng),在鹽脅迫下受影響小,而H069、SMV006和VP10的鹽害指數(shù)較高,受到鹽害后植株干枯接近死亡,無法生長(zhǎng)。3.20個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆新材料田間耐鹽性鑒定:本試驗(yàn)還采用隸屬函數(shù)法分別對(duì)20個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆進(jìn)行田間耐鹽性鑒定,結(jié)果在200mM氯化鈉脅迫下初步鑒定出J001、J357、J358、J378耐鹽品種4個(gè)和J002、J067、J070、J379、J354中度耐鹽品種5個(gè)。4.SgP5CS基因的遺傳轉(zhuǎn)化:P5CS基因過表達(dá)使植物體內(nèi)脯氨酸含量上升,增強(qiáng)植物的應(yīng)急防御能力和提升植物的耐受性。本實(shí)驗(yàn)對(duì)從堿蓬中克隆出P5CS基因(SgP5CS),構(gòu)建植物表達(dá)載體SgP5CS-pCAMBIA1301-gfp,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花序浸潤(rùn)遺傳轉(zhuǎn)化方法,將堿蓬中SgP5CS轉(zhuǎn)入到擬南芥中,通過T_1代目的基因的PCR檢測(cè),初步表明SgP5CS已整合到擬南芥基因組中。
【圖文】：

2.2 結(jié)果與分析2.2.1 鹽脅迫對(duì) 98 份大豆種子發(fā)芽率的影響由實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，進(jìn)行 120mM 氯化鈉脅迫 72h 后，不同品種的發(fā)芽情在差異且差異明顯（圖 2.1）。7d 后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn)，在 120mM 氯處理下，31 個(gè)品種的發(fā)芽率達(dá)到 80%以上，表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性，10 個(gè)品發(fā)芽率不超過 30%，耐鹽性較差。其中浙 764-38、26001、茶豆、浙鮮 8764-40、03332、03538 以及 SP360 發(fā)芽率均達(dá)到 90%以上，而 SP540、702626 發(fā)芽率不足 20%。發(fā)芽率處于 60%~80%之間的品種 52 個(gè)，，占所有品比例為 53%（表 2.2）。

圖 2.2 對(duì)照和鹽處理下萌發(fā) 7d 的胚根生長(zhǎng)狀況f emerging shoots for 7 days of germination under wattreatment表 2.3 鹽脅迫下不同品種大豆種子的側(cè)根生長(zhǎng)狀況 2.3 Lateral root growth of different cultivars under sa材料平均側(cè)根數(shù)材料平均側(cè)根數(shù)浙鮮 5 號(hào) 0.4444 香豆1.0667SP322 0 浙鮮 160.755603227 0 SP3430.044403425 0028030.3778浙鮮 4 號(hào) 1.6889SP4361.3111SP349 3.4000SP4000浙鮮 9 號(hào) 6.2667浙鮮 840.3556太湖春早 0.4444029900.2444SP394 0SP396003969 0031431.866702965 00.7778
【學(xué)位授予單位】：浙江師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S565.1

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本文編號(hào)：2658340