【摘要】：皺葉留蘭香(Mentha crispata)為唇形科薄荷屬多年生宿根性草本植物,植株體內(nèi)含有酯類、醇類、醛類、酮類等揮發(fā)性芳香物質(zhì),留蘭香提取精油可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品生產(chǎn)、日用化工等方面具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,市場前景良好。本文以莖段扦插繁殖、腋芽繁殖、愈傷組織分化三種快速繁殖方式建立了皺葉留蘭香再生體系,并利用GC-MS技術(shù)對皺葉留蘭香栽培苗與愈傷組培苗揮發(fā)油化學(xué)組分進(jìn)行分析。旨為皺葉留蘭香的種植、開發(fā)與利用提供理論依據(jù)與技術(shù)支撐,本文獲得的主要研究結(jié)果如下:1.莖段繁殖:以皺葉留蘭香莖段進(jìn)行扦插繁殖,結(jié)果表明:采用50mg/LNAA處理30min對莖段扦插生根率可達(dá)100%。2.腋芽繁殖:以皺葉留蘭香莖段為外植體進(jìn)行不同方式的滅菌處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:最佳外植體滅菌方法為:先用0.5%洗衣粉溶液浸泡5min,然后流水下沖洗1～2h,再用70%乙醇滅菌30s,然后0.1升汞滅菌8min。采用此滅菌方法效果最好,污染率為25%,發(fā)芽率達(dá)71.67%。皺葉留蘭香腋芽莖段增殖培養(yǎng)基以MS+瓊脂7.5g/L+蔗糖30g/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L為最適宜培養(yǎng)基配方。芽苗增殖系數(shù)達(dá)3.1腋芽萌發(fā)早,有效芽苗數(shù)多且生長健壯,芽苗高度為3.5cm。3.愈傷組織誘導(dǎo)與再生體系建立:皺葉留蘭香愈傷組織誘導(dǎo)的最佳外植體為尖端莖段,最佳愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+TDZ2mg/L瓊脂6.5g/L+蔗糖30g/L+25%椰汁,愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)99.05%,最佳愈傷分化增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L+瓊脂6.5g/L+蔗糖30g/L,愈傷分化率為58%。最佳愈傷培養(yǎng)條件為接種后先置于黑暗條件暗培養(yǎng)7d然后再進(jìn)行光照,培養(yǎng)溫度(25±1)℃,光照強(qiáng)度2000～25001x,光照時(shí)間16 h/d,黑暗8 h/d,相對濕度70%～80%。4.生根培養(yǎng)與煉苗移栽:皺葉留蘭香較易生根,低濃度的激素即可以使皺葉留蘭香生根。1/2MS+瓊脂7.0g/L+蔗糖20g/L+IBA0.5mg/L為皺葉留蘭香生根的最佳培養(yǎng)基。生根率可達(dá)100%。煉苗移栽最適宜的移栽基質(zhì)為細(xì)沙土:珍珠巖:腐殖土(2:1:1)。成活率可達(dá)99%。5.揮發(fā)性精油提取與GC-MS分析:分別以溫室培養(yǎng)的皺葉留蘭香栽培苗(A)與愈傷組織培養(yǎng)產(chǎn)生的組培苗(B)為實(shí)驗(yàn)材料,用水蒸氣蒸餾法提取植株內(nèi)的精油(揮發(fā)油)成分,利用行GC-MS氣相色譜-質(zhì)譜分析,其中溫室栽培苗(A)提取的揮發(fā)油鑒定出25種化學(xué)成分,而愈傷組培苗(B)提取的揮發(fā)性油鑒定出30種化學(xué)成分。兩種皺葉留蘭香共有的化學(xué)成分有19種。最主要的化學(xué)成分有香二氫香芹酮、乙酸香芹酮、蓽澄茄油萜,β-水芹烯、α-蒎烯、β-月桂烯、β-石竹烯、植物醇、d-檸檬烯等。
【圖文】：

３？６月份以或夏季生長狀態(tài)良好，無病蟲害，生長旺盛的皺葉剪�。保�？１５ｃｍ枝條頂端莖段，去除下端較大葉片，備用。逡逑條件逡逑基部分別浸泡于ＮＡＡ（１０ｍｇ／Ｌ，５０ｍｇ／Ｌ，１００ｍｇ／Ｌ，１５０ｍｇ／Ｌ浸泡ｌＯｍｉｎ、３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ。之后清水沖洗基部殘留溶液，移（２：邋１：邋１）的培養(yǎng)盆中。統(tǒng)計(jì)生根率。逡逑分析逡逑表２＿１不同濃度ＮＡＡ對蓮段扦插影響逡逑Ｔａｂｌｅ邋２－１邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ邋ＮＡＡ邋ｏｎ邋ｓｔｅｍ邋ｃｕｔｔｉｎｇ逡逑邐時(shí)間邐扦插數(shù)邐生根數(shù)邐生根率ｍｉｎ邐（個(gè)）邐（個(gè)）邐（％）１０邐３０邐２８邐９３．３３３０邐３０邐３０邐１００６０邐３０邐３０邐１００１０邐３０邐２９邐９６．６８３０邐３０邐３０邐１００５０邐３０邐３０邐１００

６＿ＢＡ邋濃度（ｍｇ／Ｌ）逡逑６￣ＢＡ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（ｍｇ／Ｌ）逡逑圖３－１不同濃度６－ＢＡ對誘導(dǎo)皺葉留蘭香莖段分化的影響逡逑Ｆｉｇ．３－１邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ邋６－ＢＡ邋ｏｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｓｔｅｍ邋ｓｅｇｍｅｎｔｓ邋ｏｆ邋Ｍｅｎｔｈａ邋ｃｒｉｓｐａｔａ．逡逑培養(yǎng)一周左右，接種的皺葉留蘭香莖段基部稍有膨大，，腋芽處開始有側(cè)芽萌發(fā)，培逡逑養(yǎng)３５ｄ后，腋芽處有大量的叢生芽產(chǎn)生，但沒有根的生成。根據(jù)表３－２分析可知，選取逡逑單一激素６－ＢＡ進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，皺葉留蘭香的增殖隨著６－ＢＡ的濃度增加而增加，當(dāng)６－ＢＡ逡逑的濃度高達(dá)３．０ｍｇ／Ｌ時(shí)增殖系數(shù)達(dá)到了邋４．２０，但是產(chǎn)生的叢生芽植株矮小，節(jié)間較短，逡逑葉片細(xì)小。６－ＢＡ濃度低于０．２邋ｍｇ／Ｌ時(shí)，皺葉留蘭香腋芽增值率較低。因此若采用單一逡逑激素６－ＢＡ誘導(dǎo)皺葉留蘭香莖段分化時(shí)，激素濃度應(yīng)該控制在０．２？１．０ｍｇ／Ｌ，并且誘導(dǎo)逡逑產(chǎn)生的叢生芽長勢好，葉片大濃綠，莖較粗。逡逑?
【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S573.9

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本文編號：2653954