Rhizobium. leguminosarum 3841 tpa A基因編碼RND家族內(nèi)膜外排轉運蛋白,RND外排泵的過量表達是革蘭陰性菌細菌抗生素耐藥性形成的重要原因之一.采用基因同源重組構建豌豆根瘤菌tpa A基因突變株RLtpa A,并研究了該基因突變對根瘤菌生長、抗生素耐藥性以及共生固氮的影響.結果表明,tpa A基因突變會使根瘤菌在AMS基本培養(yǎng)基生長延遲,但不影響其在TY天然培養(yǎng)基中的正常生長. tpa A基因突變可能抑制了根瘤菌中的RND家族外排泵的過量表達,從而使其抗生素耐藥性降低.接種了tpa A基因突變株的豌豆植株能形成紅色有效根瘤,但其接種根瘤固氮酶活性降低.實時熒光定量RT-PCR分析表明tpa A基因在根瘤類菌體中的表達顯著上調(diào).

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 菌株質(zhì)粒和培養(yǎng)基
    1.2 主要試劑
    1.3 R.leguminosarum tpa A突變體的構建
    1.4 菌株生長實驗
    1.5 抗生素抗性實驗
    1.6 接種植株共生固氮酶活的測定
    1.7 qRT-PCR分析tpa A基因在根瘤中的表達
2 結果與分析
    2.1 豌豆根瘤菌3841 tpa A生物信息學分析
    2.2 豌豆根瘤菌tpa A突變菌株的構建
    2.3 tpa A基因突變對菌株生長的影響
    2.4 tpa A基因突變對根瘤菌抗生素抗性的影響
    2.5 豌豆盆栽實驗
    2.6 tpa A基因在根瘤類菌體中的表達
3 討論



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