我國是全世界最大的煙草市場,種植面積約2118萬畝。每年產(chǎn)生大量廢棄煙稈被堆積于田間地頭造成土壤污染和病害加劇,還有部分煙稈被直接焚燒造成資源浪費和大氣污染[1]。利用生物制劑降解和高溫堆肥技術(shù),將廢棄煙稈轉(zhuǎn)化為生物有機肥,是減少煙稈丟棄或焚燒造成資源浪費、環(huán)境污染和土傳病害傳播的有效手段。當前,用纖維素降解菌堆肥發(fā)酵煙稈制備有機肥的方法,已進入工業(yè)化生產(chǎn)階段。然而這種方法堆肥腐熟的有機肥中仍有大量的木質(zhì)素未被降解,影響堆肥腐熟程度和速度。為篩選降解煙稈的菌株,我們從自然環(huán)境中采集煙稈堆腐殖、白櫟腐殖、白蟻、葡萄枝等樣品,接種到細菌、真菌和放線菌的功能性篩選平板上,并多次劃線純化,分離篩選得到了 69株可產(chǎn)生木質(zhì)素酶的微生物。對初篩的有效菌株進行復(fù)篩,細菌接種到液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基上,于搖床中震蕩培養(yǎng),真菌接種到固體產(chǎn)酶培養(yǎng)基上,于培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。對完成產(chǎn)酶培養(yǎng)的發(fā)酵曲進行粗酶液提取,測定了木質(zhì)素酶的酶活力。復(fù)篩獲得了 14株綜合酶活力較高的木質(zhì)素降解菌,分別為:A3、A4、AM2、Y1、Y9、P8、Y3、Y8、Y22、Y24、Y32、Y34、Y37和 Y38。對復(fù)篩得到的14株木質(zhì)素酶活... 

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要符號表
第1章 緒論
    1.1 煙草廢棄秸稈的處理現(xiàn)狀
        1.1.1 煙草秸稈的簡介
        1.1.2 煙草秸稈的利用狀況
        1.1.3 煙稈有機肥的開發(fā)現(xiàn)狀及意義
    1.2 堆肥化處理技術(shù)概況
        1.2.1 堆肥化的概念
        1.2.2 堆肥影響因素
            1.2.2.1 供氧量
            1.2.2.2 含水率
            1.2.2.3 有機質(zhì)含量
            1.2.2.4 碳氮比
            1.2.2.5 微生物
        1.2.3 堆肥腐熟度評價體系
            1.2.3.1 物理指標
            1.2.3.2 化學指標
            1.2.3.3 生物安全性指標
        1.2.4 煙稈堆肥中木質(zhì)素降解的重要性
    1.3 木質(zhì)素生物降解的研究進展
        1.3.1 木質(zhì)素結(jié)構(gòu)及其理化性質(zhì)
        1.3.2 半纖維素和纖維素的結(jié)構(gòu)及其理化性質(zhì)
        1.3.3 降解木質(zhì)素的微生物及酶系
            1.3.3.1 降解木質(zhì)素的微生物
            1.3.3.2 木質(zhì)素降解酶
        1.3.4 木質(zhì)素生物降解反應(yīng)機制
            1.3.4.1 側(cè)鏈氧化
            1.3.4.2 去甲基化
            1.3.4.3 芳香環(huán)的開裂
        1.3.5 堆肥中木質(zhì)素降解的研究進展
    1.4 研究目的和意義
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 樣品及原料
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 試劑
            2.1.3.1 常規(guī)試劑藥品
            2.1.3.2 配制試劑
        2.1.4 PCR引物
        2.1.5 受體菌株和質(zhì)粒
        2.1.6 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌株的初篩
        2.2.2 菌株的復(fù)篩
        2.2.3 菌株間的拮抗性實驗
        2.2.4 菌株對煙稈木質(zhì)素的降解效果實驗
        2.2.5 菌株鑒定
            2.2.5.1 細菌的生理生化鑒定
            2.2.5.2 真菌的形態(tài)特征鑒定
            2.2.5.3 菌株的基因序列分析鑒定
        2.2.6 數(shù)據(jù)處理
第3章 結(jié)果與分析
    3.1 菌株篩選
        3.1.1 木質(zhì)素降解菌初篩
        3.1.2 木質(zhì)素降解菌的復(fù)篩
        3.1.3 株間拮抗性
        3.1.4 菌株對煙稈的降解效果
            3.1.4.1 木質(zhì)素酶活力測定
            3.1.4.2 降解效果測定
        3.1.5 木質(zhì)素降解菌的鑒定
            3.1.5.1 細菌的生理生化鑒定
            3.1.5.2 真菌的形態(tài)特征鑒定
            3.1.5.3 菌株的分子學鑒定
第4章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]堆肥微生物群落演替及木質(zhì)素降解功能微生物強化堆肥機理研究[D]. 黃丹蓮.湖南大學 2011
[2]木質(zhì)素降解微生物特性及其對農(nóng)業(yè)廢物堆肥腐殖化的影響研究[D]. 黃紅麗.湖南大學 2009

碩士論文
[1]降解煙堿微生物的篩選及在煙稈腐熟發(fā)酵中的應(yīng)用[D]. 伍良偉.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
[2]嗜堿木質(zhì)素降解菌株篩選鑒定與生長條件優(yōu)化[D]. 宋曉雪.大連理工大學 2013
[3]木質(zhì)素降解微生物的篩選及其降解特性的研究[D]. 喬喬.合肥工業(yè)大學 2013
[4]真菌利用農(nóng)業(yè)廢棄物形成穩(wěn)定性腐殖質(zhì)碳的研究[D]. 王曉平.吉林農(nóng)業(yè)大學 2012
[5]木質(zhì)素的生物降解及對其指示參數(shù)的影響[D]. 蘭海青.中國海洋大學 2012
[6]中低溫秸稈降解菌的篩選及其秸稈降解效果研究[D]. 劉爽.中國農(nóng)業(yè)科學院 2011
[7]胞外酶對木質(zhì)素降解及微生物群落演替的影響研究[D]. 蘇峰峰.湖南大學 2010
[8]秸稈降解菌的選育及復(fù)配研究[D]. 楊小麗.鄭州大學 2009
[9]菌株B7和F4產(chǎn)木質(zhì)素降解酶條件優(yōu)化及酶學性質(zhì)研究[D]. 徐海濤.吉林大學 2009
[10]煙堿降解菌PSEUDOMONAS PUTIDA ZB-16A的分離篩選及降解特性研究[D]. 萬虎.華中農(nóng)業(yè)大學 2008



本文編號：3728653