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紫花苜蓿根際氫氧化細(xì)菌的分離鑒定及氫氣對(duì)根際微生物多樣性的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-09-25 12:43
  隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)與農(nóng)業(yè)的發(fā)展,滿(mǎn)足人們高產(chǎn)又安全的糧食需求越來(lái)越迫切,如何促進(jìn)作物增產(chǎn)就成為人們?cè)絹?lái)越關(guān)注的課題,根際促生菌這一概念的提出為這一問(wèn)題帶來(lái)了希望。氫氧化細(xì)菌屬于根際促生菌,且種類(lèi)繁多,數(shù)量龐雜,為了篩選并發(fā)現(xiàn)新的氫氧化細(xì)菌菌群,探索氫氧化細(xì)菌基本特性及促生效應(yīng),本文以陜西省銅川市耀州區(qū)紫花苜蓿根際土為研究材料開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。主要內(nèi)容包括:利用氣體循環(huán)培養(yǎng)體系電解水來(lái)產(chǎn)生H2,與通入的空氣形成混合氣體,調(diào)節(jié)電流大小使混合氣體在裝置中的流速控制在280mL/min,混合氣體中H2的含量為832ppm。采用礦質(zhì)鹽無(wú)機(jī)培養(yǎng)基,即MSA培養(yǎng)基,在培養(yǎng)基中加入滅菌的土壤懸液,保證細(xì)菌的微量元素需求。在無(wú)機(jī)環(huán)境中,氫氧化細(xì)菌能夠利用氫氣來(lái)固定CO2獲得能量,進(jìn)行化能自養(yǎng)生長(zhǎng),因此利用MSA培養(yǎng)基分離得到100多株氫氧化細(xì)菌疑似菌株。對(duì)分離出的菌株進(jìn)行TTC法和自養(yǎng)能力的特性檢測(cè),TTC法檢測(cè)菌株氫化酶的活性,通過(guò)這兩種方法篩選出16株氫化酶活性較強(qiáng)的氫氧化細(xì)菌:菌株1-0-19,菌株 1-1-2,菌株 1-2-3,菌株 1-2-9,菌株 1-3-2,菌株 3-0-15,菌株 2-0-4,菌株 3... 

【文章來(lái)源】:西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 紫花苜蓿的概述
    1.3 植物根際促生菌
        1.3.1 根際促生菌的概念及分類(lèi)
        1.3.2 根際促生菌的促生機(jī)制
        1.3.3 植物根際促生菌的應(yīng)用
    1.4 氫氧化細(xì)菌概述
        1.4.1 H_2對(duì)植物生長(zhǎng)的影響
        1.4.2 氫氧化細(xì)菌的發(fā)現(xiàn)
        1.4.3 氫氧化細(xì)菌的分布
        1.4.4 氫氧化細(xì)菌的特性
        1.4.5 氫氧化細(xì)菌的分離與培養(yǎng)
        1.4.6 氫氧化細(xì)菌的應(yīng)用
    1.5 氫氧化細(xì)菌研究現(xiàn)狀
    1.6 土壤宏基因組學(xué)
    1.7 高通量測(cè)序技術(shù)
    1.8 高通量測(cè)序的應(yīng)用
    1.9 研究?jī)?nèi)容、目的及意義
        1.9.1 研究?jī)?nèi)容
        1.9.2 研究目的
        1.9.3 研究意義
第二章 苜蓿根際氫氧化細(xì)菌的分離鑒定與促生驗(yàn)證
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
        2.1.3 培養(yǎng)基
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 樣品采集
        2.2.2 土壤樣品中氫氧化細(xì)菌的富集與分離
        2.2.3 菌株氫化酶活性的的測(cè)定
        2.2.4 菌株自養(yǎng)能力的鑒定
        2.2.5 菌株的形態(tài)及生理生化鑒定
        2.2.6 16SrDNA菌種鑒定
        2.2.7 小麥促生實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 菌株氫化酶活性及自養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.2 菌株形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        2.3.3 菌株生理生化鑒定結(jié)果
        2.3.4 菌種鑒定結(jié)果
        2.3.5 小麥促生實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.4 結(jié)論與討論
        2.4.1 氫氧化細(xì)菌的分離與純化
        2.4.2 氫氧化細(xì)菌的篩選與鑒定
        2.4.3 氫氧化細(xì)菌的促生驗(yàn)證
第三章 氫氣對(duì)根際微生物群落多樣性的影響
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 樣品采集
        3.2.2 土壤樣品的H_2處理
        3.2.3 土壤基因組DNA的提取
        3.2.4 測(cè)序分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 樣品序列數(shù)的特點(diǎn)
        3.3.2 各樣品中細(xì)菌的群落分布
        3.3.3 物種豐度熱圖
        3.3.4 Alpha多樣性分析
        3.3.5 PCA主成分分析
        3.3.6 組間樣品差異分析
    3.4 結(jié)論與討論
第四章 問(wèn)題與展望
    4.1 實(shí)驗(yàn)中存在的問(wèn)題與改進(jìn)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果



本文編號(hào):3409765

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