解淀粉芽孢桿菌SN16-1對(duì)番茄根際細(xì)菌群落的影響及其生防機(jī)制初步探討
發(fā)布時(shí)間：2021-08-31 23:49
尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）是一種常見的植物土傳病原菌,能夠侵染超過100種不同的植物,它主要通過侵入植物的維管束使植物枯萎甚至死亡,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前,用于控制此病害的主要方法包括抗病育種、輪作種植、土壤熏蒸、化學(xué)殺菌劑的使用和生物防治等。其中生物防治具有高效和環(huán)境友好的突出優(yōu)勢(shì),越來越多的應(yīng)用于植物病害防治領(lǐng)域。有關(guān)生防菌的防治機(jī)理研究目前主要集中于生防菌本身,.如產(chǎn)生次級(jí)代謝物、芽孢和生物膜等及其誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗性等方面,而生防菌與根際微生物互作防治植物病害的機(jī)制研究鮮見報(bào)道。本研究主要以生防菌解淀粉芽孢桿菌(Bacilus amyBoaiquefaciens SN16-1為研究對(duì)象,并以生防菌熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）SN15-2為參照,首先對(duì)其生物活性進(jìn)行研究,并通過室內(nèi)盆栽試驗(yàn),探究其對(duì)番茄植物生長(zhǎng)的影響和對(duì)病害的防治作用;再利用末端限制性片段多態(tài)性分析（T-RFLP）和IlluminaMiSeq測(cè)序等技術(shù),深入分析SN16-1和病原菌尖孢鐮刀菌（F.oxysporum f.sp.lycopersici,FOL）...
【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
圖１．２?Ｉｌｌｕｍｉｎａ平臺(tái)測(cè)序原理??Ｆｉｇ．?１．２?Ｔｈｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｉｌｌｕｍｉｎａ?ｐｌａｔｆｏｒｍ??
?第１５頁(yè)??因，由圖２．２可知，前兩種引物擴(kuò)增出的條帶不單一，特異性不強(qiáng)，而使用后一種引物??ＢＡ－Ｆ／ＢＡ－Ｒ條帶明亮且單一，并且ＢＡ－Ｆ／ＢＡ－Ｒ是根據(jù)解淀粉芽孢桿菌基因而設(shè)計(jì)??的引物，由此可進(jìn)一步推測(cè)ＳＮ１６－１為解淀粉芽孢桿菌。??隱Ｓ１腦??＾ＨＨＩ??圖２．２?ｇｙｒＳ基因擴(kuò)增電泳圖??Ｆｉｇ．?２．２?Ｔｈｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｐｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｇｙｒＢ?ｇｅｎｅ??注：圖Ａ為ＵＰ－ｌＳ／ＵＰ－２Ｓｒ和ＢＳ－１Ｆ／ＢＳ－１Ｒ兩種引物擴(kuò)增的凝膠電泳圖，泳道１為ＤＮＡ２０００??Ｍａｒｋｅｒ，?２、３和４為ＵＰ－ｌＳ／ＵＰ－２Ｓｒ擴(kuò)增產(chǎn)物，６、７和８為ＢＳ－１Ｆ／ＢＳ－１Ｒ擴(kuò)增產(chǎn)物，５和９為空白??對(duì)照；圖Ｂ為ＢＡ－Ｆ／ＢＡ－Ｒ的凝膠電泳圖，泳道１為ＤＮＡ２０００?Ｍａｒｋｅｒ，?２、３、４和５為退火溫度為??５０°Ｃ獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物，６、７、８和９為退火溫度為５５°Ｃ獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物，１０為空白對(duì)照；??Ｎｏｔｅ：?Ａ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ?ｔｈｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｐｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ＵＰ－ｌＳ／ＵＰ－２Ｓｒ?ａｎｄ?ＢＳ－１Ｆ／ＢＳ－１Ｒ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｅｄ，?ｔｈｅ?ｌａｎｅ?１??ｉｓ?ＤＮＡ２０００?Ｍａｒｋｅｒ
Ｆｉｇ．?２．５?Ｈｉｇｈ?ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ?ｌｉｑｕｉｄ?ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ?ｐｒｏｄｕｃｅｄ?ｂｙ?ＳＮ１６－１??２．２．４?ＳＮ１６－１抗生素合成基因的鑒定??ＰＣＲ常用于檢測(cè)芽孢桿菌產(chǎn)生抗生素的相關(guān)合成基因，由圖２．６可知，在所采用的??３種基因中，通過ＰＣＲ都能得到有效擴(kuò)增，擴(kuò)增條帶單一明亮，將擴(kuò)增的ＤＮＡ序列進(jìn)??行測(cè)序，以確定這三種產(chǎn)物是否對(duì)應(yīng)這三種抗生素基因。結(jié)果表明，擴(kuò)增產(chǎn)物大??小為２９５ｂｐ，?／加４為７３０ｂｐ，／ｅ？Ｄ為２７５ｂｐ，這與圖２．６所呈現(xiàn)的結(jié)果相一致。??圖２．６?ＳＮ１６－１抗生素基因電泳圖??Ｆｉｇ．?２．６?Ｔｈｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｐｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ａｎｔｉｂｉｔｉｃ?ｇｅｎｅ?ｏｆ?ＳＮ?１６－１??注：泳道１、ａ、Ａ均為ＤＬ２０００?Ｍａｒｋｅｒ；泳道２－４為幻分此泳道ｂ－ｇ為ｚＹＷ；泳道Ｂ－Ｄ為／＾Ｄ；??泳道５、ｈ、Ｅ均為對(duì)應(yīng)陰性對(duì)照。??Ｎｏｔｅ：?Ｔｈｅ?ｌａｎｅ?ｏｆ?１，?ａ，?Ａ?ｗｅｒｅ?ａｌｌ?ＤＬ２０００?Ｍａｒｋｅｒ；?ｔｈｅ?ｌａｎｅ?ｏｆ?２－４?ｗｅｒｅ?ｓｒｆＡＡ；?ｌａｎｅ?ｂ－ｇ?ｏｆ?ｗｅｒｅ?ｉｔｕＡ＼??
本文編號(hào)：3375849
【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校
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【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
圖１．２?Ｉｌｌｕｍｉｎａ平臺(tái)測(cè)序原理??Ｆｉｇ．?１．２?Ｔｈｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?Ｉｌｌｕｍｉｎａ?ｐｌａｔｆｏｒｍ??
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