基因干擾（RNA interference,RNAi）是現(xiàn)代分子生物學領域的重大發(fā)現(xiàn),該機制在不同進化地位的物種中高度保守。在昆蟲學領域中,RNAi技術不僅為昆蟲的功能基因組研究提供了便捷的方法,也為農(nóng)業(yè)害蟲的防治提供了新途徑。然而,脫靶效應（off target effect）給RNAi技術蒙上了陰影,是目前RNAi技術應用的最大障礙。嚴重的脫靶效應會導致應用RNAi進行昆蟲功能基因組學研究產(chǎn)生錯誤結論,如果利用RNAi進行害蟲防治出現(xiàn)脫靶效應,就會因為靶標的非特異性而出現(xiàn)嚴重的環(huán)境安全性問題,甚至影響人類健康。因此,在應用RNAi進行害蟲防控的研究中,昆蟲體內(nèi)脫靶效應的評估和控制是一個亟待解決的科學問題。本文以赤擬谷盜Tribolium castaneum為研究對象,通過選擇合適的RNAi物質(zhì),利用微陣列芯片研究RNAi過程中脫靶效應的發(fā)生并探討可能存在的原因,同時評估了dsRNA脫靶效應預測軟件"dsCheck"的準確性,然后研究了與序列相關脫靶效應相關的dsRNA分子特征,驗證了RNAi過程中非序列特異性脫靶效應的存在。相關的研究成果可以為未來dsRNA的設計以及安全控制提供理... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：160 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１秀麗隱桿線蟲中外源ＲＮＡｉ的途徑（Ｆｉｓ油ｅｒ，?２０１０）??Ｆｉｇ．１－１?Ｔｈｅ?ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ?ＲＮＡｉｐａｔｈｗ巧?ｉｎ?Ｃｅ／ｅ各幻ｎｓ?（Ｆｉｓｃｈｅｒ，?２０１０）．??１．１．３?ＲＮＡｉ?

在細胞自發(fā)型ＲＮＡｉ過程中，沉默效應僅局限在ｄｓＲＮＡ引入或表達的細胞中。??ｄｓＲＮＡ被ＲＮａｓｅｌｌｌ?（Ｄｉｃｅｒ）剪切成２Ｉ－２５ｂｐ長度的ｓｉＲＮＡ，然后這些ｓｉＲＮＡ參與形??成ＲＩＳＣ結構，從而導致ｍＲＮＡ降解，詳細作用機制參見圖１－３。這種細胞自發(fā)型的??ＲＮＡｉ被廣泛應用于研究經(jīng)典的ＲＮＡｉ機制

ＭｉｎｄｅｃｅＨｓ?（?■■慰■?）Ｃ?＾?？?■?＾?）?（？ｌ｜?〇?Ｊ?）Ｃ＾?Ｏ?｜?＾）??ｆＳＳａｓｎＳｓＭ？？??圖１－２不同的細胞ＲＮＡｉ示意圖（Ｈｕｎｔｅｒ宗２００８）??Ｆｉｇ．?１－２?Ａ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｏｖｅｒｖｉｅｗ?ｏｆ?也ｅ?出化化�。保�?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ＲＮＡｉ?主??１丄３．１細胞自發(fā)型ＲＮＡｉ??在細胞自發(fā)型ＲＮＡｉ過程中，沉默效應僅局限在ｄｓＲＮＡ引入或表達的細胞中。??ｄｓＲＮＡ被ＲＮａｓｅｌｌｌ?（Ｄｉｃｅｒ）剪切成２Ｉ－２５ｂｐ長度的ｓｉＲＮＡ，然后這些ｓｉＲＮＡ參與形??成ＲＩＳＣ結構，從而導致ｍＲＮＡ降解，詳細作用機制參見圖１－３。這種細胞自發(fā)型的??ＲＮＡｉ被廣泛應用于研究經(jīng)典的ＲＮＡｉ機制

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Efficiency of Different Methods for dsRNA Delivery in Cotton Bollworm（Helicoverpa armigera）[J]. YANG Jing,HAN Zhao-jun.  Journal of Integrative Agriculture. 2014(01)
[2]害蟲的基因沉默控制[J]. 李飛,吳益東,韓召軍.  昆蟲知識. 2010(05)
[3]赤擬谷盜的綜合防治[J]. 王光春.  糧油食品科技. 2007(04)
[4]RNA干擾技術的原理與應用[J]. 馬鵬鵬,薛社普,韓代書.  中國組織化學與細胞化學雜志. 2003(02)



本文編號：3224305