玉米象是重要的倉儲(chǔ)害蟲,為害范圍廣,程度重,是世界倉儲(chǔ)頭號(hào)害蟲�，F(xiàn)有多種化學(xué)熏蒸劑,因抗藥性或毒性均存在使用的局限,辣根素（AITC）因其殺蟲效果良好,殘留量小,對(duì)環(huán)境和人體危害極小,被認(rèn)為是具有廣闊開發(fā)前景的植物源熏蒸劑物質(zhì)。但目前關(guān)于AITC對(duì)玉米象的熏蒸機(jī)理尚不明確。本研究從玉米象成蟲酶學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、基因水平以及分子模擬對(duì)接探討了AITC的殺蟲熏蒸作用機(jī)制和可能的作用靶標(biāo),結(jié)果如下:1、AITC對(duì)玉米象體內(nèi)過氧化氫酶、羧酸酯酶、線粒體呼吸鏈復(fù)合物II、細(xì)胞色素c氧化酶活力影響具有明顯的劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)。低劑量的辣根素可誘導(dǎo)過氧化氫酶、羧酸酯酶、線粒體呼吸鏈復(fù)合物II、細(xì)胞色素c氧化酶的增加,而高劑量的辣根素則對(duì)過氧化氫酶、線粒體呼吸鏈復(fù)合物II、細(xì)胞色素c氧化酶活力具有抑制作用;隨著處理時(shí)間的增加,試蟲體內(nèi)的這兩種酶活性逐漸下降。2、AITC處理玉米象成蟲后,玉米象成蟲的蛋白質(zhì)含量發(fā)生了變化,與空白對(duì)照相比,1μl/L和2μl/L的AITC熏蒸處理玉米象成蟲蛋白質(zhì)含量有所增加;隨著玉米象成蟲死亡率的增加,玉米象成蟲體內(nèi)蛋白含量逐漸降低。采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離純化行... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 玉米象簡(jiǎn)介
        1.1.1 玉米象的發(fā)生與危害
        1.1.2 玉米象研究進(jìn)展
        1.1.3 玉米象的防治現(xiàn)狀
    1.2 辣根素簡(jiǎn)介
        1.2.1 辣根素簡(jiǎn)介及其產(chǎn)生背景
        1.2.2 辣根素對(duì)倉儲(chǔ)害蟲防治現(xiàn)狀
    1.3 蛋白質(zhì)組學(xué)和蛋白質(zhì)的研究進(jìn)展
        1.3.1 蛋白質(zhì)的提取方法
        1.3.2 蛋白質(zhì)的分離純化方法
        1.3.3 蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定方法
        1.3.4 MALDI-TOF-MS簡(jiǎn)介
    1.4 四種酶的簡(jiǎn)介
        1.4.1 過氧化氫酶（CAT）
        1.4.2 羧酸酯酶（CarE）
        1.4.3 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（SQR）
        1.4.4 細(xì)胞色素c氧化酶
    1.5 同源建模及分子對(duì)接
        1.5.1 同源建模及分子對(duì)接研究背景
        1.5.2 同源建模
        1.5.3 分子對(duì)接
    1.6 研究的目的和內(nèi)容
第2章 辣根素對(duì)玉米象成蟲體內(nèi)功能酶影響
    2.1 辣根素對(duì)玉米象成蟲體內(nèi)四種酶活力的影響
        2.1.1 試驗(yàn)材料及儀器
        2.1.2 試驗(yàn)方法
        2.1.3 試驗(yàn)結(jié)果
    2.2 AITC熏蒸處理玉米象成蟲差異蛋白分析
        2.2.1 試驗(yàn)材料及儀器
        2.2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.3 試驗(yàn)結(jié)果
第3章 玉米象細(xì)胞色素c氧化酶COX1基因克隆和序列分析
    3.1 玉米象總RNA的提取
        3.1.1 試驗(yàn)材料及儀器
        3.1.2 試驗(yàn)方法
        3.1.3 提取玉米象RNA試驗(yàn)結(jié)果
    3.2 玉米象COX1基因全長(zhǎng)的擴(kuò)增
        3.2.1 試驗(yàn)材料
        3.2.2 試驗(yàn)方法
        3.2.3 玉米象COX1基因 3'RACE及 5'RACE結(jié)果
    3.3 玉米象COX1基因開放閱讀框的克隆
        3.3.1.試驗(yàn)材料
        3.3.2 全長(zhǎng)驗(yàn)證的引物
        3.3.3 克隆開放閱讀框的試驗(yàn)方法
        3.3.4 克隆開放閱讀框的試驗(yàn)結(jié)果
    3.4 玉米象細(xì)胞色素c氧化酶COX1的序列分析
第4章 玉米象COX1的同源建模及與辣根素（AITC）的分子對(duì)接
    4.1 試驗(yàn)材料
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 三維模型構(gòu)建
        4.2.2 玉米象COX1的分子對(duì)接
    4.3 結(jié)果分析
        4.3.1 目的蛋白序列與模版蛋白序列的比對(duì)
        4.3.2 玉米象COX1的三維模型的構(gòu)建
        4.3.3 模型評(píng)估
        4.3.4 玉米象COX1的分子對(duì)接結(jié)果
第5章 結(jié)論與討論
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 AITC對(duì)玉米象成蟲體內(nèi)四種酶活力的影響
        5.1.2 AITC熏蒸處理玉米象成蟲差異蛋白的分析
        5.1.3 玉米象COX1全長(zhǎng)基因的獲得及分析
        5.1.4 玉米象COX1的同源建模及與辣根素（AITC）的分子對(duì)接
    5.2 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]斑節(jié)對(duì)蝦過氧化氫酶基因全長(zhǎng)cDNA克隆及表達(dá)分析[J]. 傅明駿,趙超,楊其彬,周發(fā)林,江世貴,邱麗華.  南方水產(chǎn)科學(xué). 2015(06)
[2]家鵝線粒體細(xì)胞色素b的同源建模與結(jié)構(gòu)分析[J]. 陳艷榮,王繼文.  長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版). 2014(11)
[3]玉米象生物生態(tài)學(xué)及防治技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 鄭旭,范錦勝,張李香.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2014(04)
[4]玉米種子倉儲(chǔ)害蟲玉米象的綜合防治[J]. 梁英華,王登齊.  現(xiàn)代化農(nóng)業(yè). 2013(11)
[5]辣根素的生物活性研究進(jìn)展[J]. 吳華,馮俊濤,何軍,張興.  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2013(02)
[6]Autodock Vina與Discovery Studio在虛擬篩選耐藥蛋白抑制劑中的比較[J]. 黃勇,陳晨,張志毅,童貽剛,趙勇.  生物信息學(xué). 2012(04)
[7]基于Discovery Studio平臺(tái)纖維素酶E4同源建模[J]. 李軍,曹以誠(chéng),葛洪.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(09)
[8]玉米象和鋸谷盜在小麥粉中的種群動(dòng)態(tài)研究[J]. 呂建華,史雅,鐘建軍,王潔靜.  糧食科技與經(jīng)濟(jì). 2012(01)
[9]蛋白質(zhì)分離純化方法研究進(jìn)展[J]. 吳少輝,劉光明.  中國(guó)藥業(yè). 2012(01)
[10]辣根的化學(xué)成分及其生物活性研究進(jìn)展[J]. 陳虹霞,王成章.  生物質(zhì)化學(xué)工程. 2008(01)

博士論文
[1]食用辛辣風(fēng)味物質(zhì)異硫氰酸烯丙酯（AITC）的研究[D]. 肖華志.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004

碩士論文
[1]玉米象（Sitophilus zeamais Motschulsky）試驗(yàn)種群生物學(xué)特性及生態(tài)學(xué)特征的研究[D]. 高遠(yuǎn).云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]克雷伯桿菌中FNR蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)模建及二聚作用研究[D]. 李霞.青島科技大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3205079