種子被認(rèn)為是植物種質(zhì)資源保存的理想材料,但種子在貯藏過程中,其活力會(huì)逐漸喪失,因此尋找保持種子活力的方法至關(guān)重要。miRNA是一類長(zhǎng)度為21-24個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼單鏈小分子RNA,是生命活動(dòng)的關(guān)鍵調(diào)控因子,它們主要通過與靶mRNA的序列互補(bǔ)導(dǎo)致靶mRNA的降解或抑制靶mRNA的翻譯來調(diào)節(jié)基因表達(dá)。在植物中,mi RNA通過調(diào)節(jié)靶mRNA的表達(dá)進(jìn)而調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)方面,如細(xì)胞的分化,疏導(dǎo)組織的形成,根、葉和花等形態(tài)發(fā)生等;此外,它們還參與其他小分子RNA合成的反饋調(diào)節(jié)。本研究以常規(guī)水稻kasalath及其MIM164c、OE164c、MIM168a、OE168a轉(zhuǎn)基因種子為材料,探討了種子自然貯藏或人工老化過程中miR164c和mi R168a表達(dá)與其活力變化的關(guān)系;通過生物信息學(xué)的方法,初步分析了miR164c和miR168a的靶基因及其功能,并運(yùn)用RTqPCR技術(shù)對(duì)靶基因進(jìn)行了驗(yàn)證分析。提出了mi R164c和miR168a作用于靶基因從而調(diào)控種子活力的分子機(jī)制。主要結(jié)果如下:1.通過檢測(cè)室內(nèi)自然開放貯藏（自然老化）0個(gè)月、8個(gè)月以及14個(gè)月的常規(guī)水稻kasalath（野... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

水稻kasalath野生型種子在不同潮霉素濃度下的萌發(fā)情況

圖 3-2 以 100 μg/ml 潮霉素溶液為基質(zhì)的不同類型轉(zhuǎn)基因種子的萌發(fā)情況Fig.3-2 Germination status of the seeds of four kinds of rice transgenesin the medium of 100 μg/ml hygromycin3.1.2 轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子的分子鑒定從收獲的轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子（MIM164c、OE164c、MIM168a、OE168a）中，各挑選出田間農(nóng)藝性狀比較好的 5 個(gè)株系進(jìn)行目的基因的 PCR 分子檢測(cè)。結(jié)果表明，MIM164c 4 個(gè)株系的 DNA 能夠擴(kuò)增出特異性目的條帶， MIM164c陽(yáng)性率占檢測(cè)株系數(shù)的 80%。用同樣的方法檢測(cè)，OE164c 陽(yáng)性率為 80%，MIM168a 陽(yáng)性率為 100%，OE168a 陽(yáng)性率為 100%（圖 3-3）。

圖 3-2 以 100 μg/ml 潮霉素溶液為基質(zhì)的不同類型轉(zhuǎn)基因種子的萌發(fā)情況Fig.3-2 Germination status of the seeds of four kinds of rice transgenesin the medium of 100 μg/ml hygromycin3.1.2 轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子的分子鑒定從收獲的轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子（MIM164c、OE164c、MIM168a、OE中，各挑選出田間農(nóng)藝性狀比較好的 5 個(gè)株系進(jìn)行目的基因的 PCR 分子結(jié)果表明，MIM164c 4 個(gè)株系的 DNA 能夠擴(kuò)增出特異性目的條帶， MI陽(yáng)性率占檢測(cè)株系數(shù)的 80%。用同樣的方法檢測(cè)，OE164c 陽(yáng)性率為 MIM168a 陽(yáng)性率為 100%，OE168a 陽(yáng)性率為 100%（圖 3-3）。

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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