種子被認為是植物種質(zhì)資源保存的理想材料,但種子在貯藏過程中,其活力會逐漸喪失,因此尋找保持種子活力的方法至關(guān)重要。miRNA是一類長度為21-24個核苷酸的內(nèi)源性非編碼單鏈小分子RNA,是生命活動的關(guān)鍵調(diào)控因子,它們主要通過與靶mRNA的序列互補導(dǎo)致靶mRNA的降解或抑制靶mRNA的翻譯來調(diào)節(jié)基因表達。在植物中,mi RNA通過調(diào)節(jié)靶mRNA的表達進而調(diào)控植物生長發(fā)育的各個方面,如細胞的分化,疏導(dǎo)組織的形成,根、葉和花等形態(tài)發(fā)生等;此外,它們還參與其他小分子RNA合成的反饋調(diào)節(jié)。本研究以常規(guī)水稻kasalath及其MIM164c、OE164c、MIM168a、OE168a轉(zhuǎn)基因種子為材料,探討了種子自然貯藏或人工老化過程中miR164c和mi R168a表達與其活力變化的關(guān)系;通過生物信息學(xué)的方法,初步分析了miR164c和miR168a的靶基因及其功能,并運用RTqPCR技術(shù)對靶基因進行了驗證分析。提出了mi R164c和miR168a作用于靶基因從而調(diào)控種子活力的分子機制。主要結(jié)果如下:1.通過檢測室內(nèi)自然開放貯藏（自然老化）0個月、8個月以及14個月的常規(guī)水稻kasalath（野... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

水稻kasalath野生型種子在不同潮霉素濃度下的萌發(fā)情況

圖 3-2 以 100 μg/ml 潮霉素溶液為基質(zhì)的不同類型轉(zhuǎn)基因種子的萌發(fā)情況Fig.3-2 Germination status of the seeds of four kinds of rice transgenesin the medium of 100 μg/ml hygromycin3.1.2 轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子的分子鑒定從收獲的轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子（MIM164c、OE164c、MIM168a、OE168a）中，各挑選出田間農(nóng)藝性狀比較好的 5 個株系進行目的基因的 PCR 分子檢測。結(jié)果表明，MIM164c 4 個株系的 DNA 能夠擴增出特異性目的條帶， MIM164c陽性率占檢測株系數(shù)的 80%。用同樣的方法檢測，OE164c 陽性率為 80%，MIM168a 陽性率為 100%，OE168a 陽性率為 100%（圖 3-3）。

圖 3-2 以 100 μg/ml 潮霉素溶液為基質(zhì)的不同類型轉(zhuǎn)基因種子的萌發(fā)情況Fig.3-2 Germination status of the seeds of four kinds of rice transgenesin the medium of 100 μg/ml hygromycin3.1.2 轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子的分子鑒定從收獲的轉(zhuǎn)基因水稻 T3代種子（MIM164c、OE164c、MIM168a、OE中，各挑選出田間農(nóng)藝性狀比較好的 5 個株系進行目的基因的 PCR 分子結(jié)果表明，MIM164c 4 個株系的 DNA 能夠擴增出特異性目的條帶， MI陽性率占檢測株系數(shù)的 80%。用同樣的方法檢測，OE164c 陽性率為 MIM168a 陽性率為 100%，OE168a 陽性率為 100%（圖 3-3）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]高等植物種子活力的生物學(xué)研究進展[J]. 舒英杰,陶源,王爽,馬洪雨,宋利茹,于興旺,麻浩.  西北植物學(xué)報. 2013(08)
[2]植物microRNA及其在植物生長發(fā)育中作用的研究進展[J]. 張停停,劉長洲,趙娟,李小平.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(13)
[3]人工加速老化對2個小麥品種發(fā)芽和種子生理生化特性的影響[J]. 李淑梅,董麗平,孫君艷,馬俊.  吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(05)
[4]人工老化處理對結(jié)球甘藍種子生理生化特性的影響[J]. 孫春青,楊偉,戴忠良,潘躍平.  西北植物學(xué)報. 2012(08)
[5]NAC轉(zhuǎn)錄因子在植物抗病和抗非生物脅迫反應(yīng)中的作用[J]. 孫利軍,李大勇,張慧娟,宋鳳鳴.  遺傳. 2012(08)
[6]種子活力研究進展[J]. 劉毓俠,王鐵固.  玉米科學(xué). 2012(04)
[7]人工老化對紅麻種子活力及基因組DNA的影響[J]. 戴志剛,王鳳敏,陳基權(quán),粟建光,龔友才,溫嵐.  熱帶作物學(xué)報. 2012(06)
[8]藍萼香茶菜種子人工老化過程中生理生化特性的研究[J]. 劉霞,劉菲.  種子. 2012(04)
[9]人工老化誘導(dǎo)的油菜種子活力和抗氧化酶活性變化的研究[J]. 曾欽薇,謝永俊.  云南農(nóng)業(yè)科技. 2012(02)
[10]植物種子衰老與線粒體關(guān)系的研究進展[J]. 田茜,辛霞,盧新雄,陳曉嶺,張金梅.  植物遺傳資源學(xué)報. 2012(02)

博士論文
[1]種子保存過程中生活力喪失特性及其機理研究[D]. 辛霞.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012

碩士論文
[1]人工老化家榆種子程序性死亡胞核形態(tài)學(xué)特征及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑初步研究[D]. 王瓊.北京林業(yè)大學(xué) 2012
[2]種子老化對老芒麥種質(zhì)生理特性及遺傳完整性變化的影響[D]. 周國棟.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[3]老化大豆胚軸細胞死亡生物學(xué)基礎(chǔ)的研究[D]. 林瑩.福建農(nóng)林大學(xué) 2012
[4]miRNA與水稻種子活力的相關(guān)性研究[D]. 成海蘭.湖南師范大學(xué) 2011



本文編號：3134065