高效降解秸稈的短小芽孢桿菌GBSW19及甘露寡糖激發(fā)子的研究
發(fā)布時間:2021-03-09 15:51
作物秸稈是自然界含量巨大、種類豐富、分布廣泛且可再生的一種生物質(zhì)資源,然而在農(nóng)業(yè)上由于對秸稈的不合理處理方式,不僅浪費了秸稈資源,還給環(huán)境和人類安全帶來巨大隱患。作物秸稈原位還田是目前農(nóng)業(yè)上易于操作和推廣的方式,但是秸稈不經(jīng)處理直接還田容易帶來一系列影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)問題,如影響作物播種和出苗,容易使下茬作物發(fā)生病害等。利用能夠降解木質(zhì)纖維素的微生物來加速秸稈降解是一個很好的解決方案,這些微生物主要有芽孢桿菌、木霉菌等。本研究從實驗室保存的分離于西藏的30株芽孢桿菌菌株入手,通過平板初篩,得到26株可以在CMC平板上產(chǎn)生透明圈的菌株,對這些菌株進行胞外酶活復(fù)篩和拮抗病原菌檢測,最終得到了 2株兼具生防潛力且酶活較高的候選菌株BacilluspumilusGBSW19和B.axarquiensis LNXM37。我們進一步在液態(tài)發(fā)酵條件下檢測了這兩個菌株對作物秸稈的降解效果,發(fā)現(xiàn)當以1%體積比接種時,菌株GBSW19在降解9 d時秸稈失重率達25.7%,其中纖維素降解率為28.3%,半纖維素降解率為27.4%,木質(zhì)素降解為45.6%。此外,我們還在在盆栽模擬實驗中模擬了菌株GBSW19和其復(fù)配...
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:155 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)[4]??Figure?2-1?The?structure?of?lignocellulose??l半纖維素酶??
??半纖維素由五碳糖和六碳糖聚合而成的異構(gòu)多糖,其結(jié)構(gòu)差異變化很大(圖2-2)。??不同植物中半纖維素種類和含量均存在差異:比如軟木中的半纖維素主要包括葡甘露??聚糖、木聚糖、阿拉伯半乳聚糖、木葡聚糖和其它葡聚糖,而硬木的半纖維素則豐要??由木聚糖和葡甘露聚糖組成[5]。??半纖維素的有效降解需要多種酶的協(xié)同作用,不同微生物對半纖維素的降解有三??種不同的策略:1、木霉屬(7Wc/?o<ier;?a)和曲霉屬(^4切6/沿7/1?0等需氧真菌能夠分??泌高濃度的多種半纖維素酶類,將其水解成可被周圍微生物利用的單糖或二糖[6];?2、??桿菌(及k:////)和纖維弧菌屬(Ce//v/6Wo)等需氧細菌能夠分泌中等數(shù)量降解多糖主??鏈的酶將半纖維素水解成寡糖,再由某些胞內(nèi)酶進行完全降解[^8];?3、梭菌屬??(C7〇i7/7W/fl)等厭氧細菌已經(jīng)進化能分泌獨特的多酶復(fù)合物-纖維小體(Cellulosomes)??[9]。半纖維素的降解可以暴露出核心的纖維素微纖絲,方便后續(xù)的纖維素酶對其進行??降解。??1.2半纖維素酶的結(jié)構(gòu)及功能??〇..?Xylan??0-^4?〇??nrTtHi-rr-?、,0?Xy?lobiose???1o?assa?〇??^?Caiacto-glucomannan??riO?/??Man?nobiose??^?^?£n>d-c<T5?5mKtas?s?^<^iico?!dases??A^ab?in?og?ai?adan??ft-1,5-L-Arabln*n?、
纖維素的完全降解需要三種酶協(xié)同作用:內(nèi)切纖維素酶(13-1,4葡聚糖酶)從纖維??素內(nèi)部隨機進行切割,分解纖維素微纖絲;外切纖維素酶(纖維二糖水解酶)可以從??還原端以二糖為單位進行切割;葡萄糖苷酶將纖維二糖水解為葡萄糖分子(圖2-3)。??Cellutase?{Individual?Polysaccharide?Chains]??^?Cellulose?tCrystalmeJ?T?^?T?S?1?_?l??<f?ogre?'w?ty?breaking?into?shorter?motecutes?from?efthw?the?reducing?or?non-feducmfiefidsj??C—?Chcose??(b>??t:>ni>?the??v&t?iine?itrvttii^x}?Cellobiases?tP'Glucosidases]?Fermentation??(bre?*;in£?&?fcydf〇>y¥it?Of?ifJvcOSidlc?OOnrf?to?f〇?m?gfucoa)?{;ubicque<n?c〇r.v?rii〇<??t〇?alcohols)??圖2-3纖維素完全降解機制[191??Figure?2-3?Hydrolysis?mechanism?for?the?conversion?of?cellulose?to?glucose??有些學(xué)者認為三種酶類在協(xié)同降解纖維素之前,纖維素會出現(xiàn)無序化反應(yīng)[2()_21j??和微纖維[22_241等現(xiàn)象。無序化反應(yīng)是指纖維素的晶體結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,表現(xiàn)為無序性。??對與李氏木霉(7Hc/w辦rwa?reeseO外纖維素酶結(jié)合的纖維素結(jié)構(gòu)進行掃描電鏡觀察
【參考文獻】:
期刊論文
[1]微生物在秸稈還田中的應(yīng)用研究進展[J]. 段杰,崔俊濤. 資源節(jié)約與環(huán)保. 2015(02)
[2]農(nóng)作物秸稈綜合利用的研究進展綜述[J]. 解恒參,趙曉倩. 環(huán)境科學(xué)與管理. 2015(01)
[3]長期秸稈還田對華北潮土肥力、氮庫組分及作物產(chǎn)量的影響[J]. 趙士誠,曹彩云,李科江,仇少君,周衛(wèi),何萍. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報. 2014(06)
[4]基于共聚焦顯微拉曼光譜揭示炭疽病侵染下茶葉細胞壁變化的研究[J]. 李曉麗,羅榴彬,胡小倩,樓兵干,何勇. 光譜學(xué)與光譜分析. 2014(06)
[5]腐熟劑作用下油菜秸稈還田對土壤性狀與單季稻產(chǎn)量的影響[J]. 懷燕,潘建清,陳一定,陸若輝,朱偉鋒. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(05)
[6]土壤有機質(zhì)與農(nóng)作物產(chǎn)量的關(guān)系研究[J]. 宋躍明. 農(nóng)村經(jīng)濟與科技. 2014(01)
[7]秸稈還田對設(shè)施土壤微生物種群數(shù)量的影響[J]. 李鑫,池景良,王志學(xué),孫玉祿. 農(nóng)業(yè)科學(xué)研究. 2013(04)
[8]玉米秸稈低溫降解復(fù)合菌系的篩選[J]. 薩如拉,高聚林,于曉芳,胡樹平. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(19)
[9]長期秸稈還田對旱地玉米產(chǎn)量、效益及水分利用的影響[J]. 周懷平,解文艷,關(guān)春林,楊振興,李紅梅. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報. 2013(02)
[10]2種還田模式下小麥秸稈腐解菌劑應(yīng)用效果研究[J]. 劉海靜,任萍. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2013(03)
碩士論文
[1]低溫纖維素降解菌的篩選及其混合發(fā)酵效果研究[D]. 付秋玥.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]高溫纖維素降解菌的篩選及其復(fù)合菌劑對秸稈降解效果的研究[D]. 王元明.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]中低溫秸稈降解菌的篩選及其秸稈降解效果研究[D]. 劉爽.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[4]兩種木霉混合菌產(chǎn)酶的條件優(yōu)化及其對玉米秸稈降解的研究[D]. 李國強.東北林業(yè)大學(xué) 2011
[5]秸稈還田養(yǎng)分釋放規(guī)律及稻草化感作用研究[D]. 李逢雨.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]長期秸稈還田改土培肥綜合效應(yīng)的研究[D]. 孫偉紅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號:3073092
【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:155 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)[4]??Figure?2-1?The?structure?of?lignocellulose??l半纖維素酶??
??半纖維素由五碳糖和六碳糖聚合而成的異構(gòu)多糖,其結(jié)構(gòu)差異變化很大(圖2-2)。??不同植物中半纖維素種類和含量均存在差異:比如軟木中的半纖維素主要包括葡甘露??聚糖、木聚糖、阿拉伯半乳聚糖、木葡聚糖和其它葡聚糖,而硬木的半纖維素則豐要??由木聚糖和葡甘露聚糖組成[5]。??半纖維素的有效降解需要多種酶的協(xié)同作用,不同微生物對半纖維素的降解有三??種不同的策略:1、木霉屬(7Wc/?o<ier;?a)和曲霉屬(^4切6/沿7/1?0等需氧真菌能夠分??泌高濃度的多種半纖維素酶類,將其水解成可被周圍微生物利用的單糖或二糖[6];?2、??桿菌(及k:////)和纖維弧菌屬(Ce//v/6Wo)等需氧細菌能夠分泌中等數(shù)量降解多糖主??鏈的酶將半纖維素水解成寡糖,再由某些胞內(nèi)酶進行完全降解[^8];?3、梭菌屬??(C7〇i7/7W/fl)等厭氧細菌已經(jīng)進化能分泌獨特的多酶復(fù)合物-纖維小體(Cellulosomes)??[9]。半纖維素的降解可以暴露出核心的纖維素微纖絲,方便后續(xù)的纖維素酶對其進行??降解。??1.2半纖維素酶的結(jié)構(gòu)及功能??〇..?Xylan??0-^4?〇??nrTtHi-rr-?、,0?Xy?lobiose???1o?assa?〇??^?Caiacto-glucomannan??riO?/??Man?nobiose??^?^?£n>d-c<T5?5mKtas?s?^<^iico?!dases??A^ab?in?og?ai?adan??ft-1,5-L-Arabln*n?、
纖維素的完全降解需要三種酶協(xié)同作用:內(nèi)切纖維素酶(13-1,4葡聚糖酶)從纖維??素內(nèi)部隨機進行切割,分解纖維素微纖絲;外切纖維素酶(纖維二糖水解酶)可以從??還原端以二糖為單位進行切割;葡萄糖苷酶將纖維二糖水解為葡萄糖分子(圖2-3)。??Cellutase?{Individual?Polysaccharide?Chains]??^?Cellulose?tCrystalmeJ?T?^?T?S?1?_?l??<f?ogre?'w?ty?breaking?into?shorter?motecutes?from?efthw?the?reducing?or?non-feducmfiefidsj??C—?Chcose??(b>??t:>ni>?the??v&t?iine?itrvttii^x}?Cellobiases?tP'Glucosidases]?Fermentation??(bre?*;in£?&?fcydf〇>y¥it?Of?ifJvcOSidlc?OOnrf?to?f〇?m?gfucoa)?{;ubicque<n?c〇r.v?rii〇<??t〇?alcohols)??圖2-3纖維素完全降解機制[191??Figure?2-3?Hydrolysis?mechanism?for?the?conversion?of?cellulose?to?glucose??有些學(xué)者認為三種酶類在協(xié)同降解纖維素之前,纖維素會出現(xiàn)無序化反應(yīng)[2()_21j??和微纖維[22_241等現(xiàn)象。無序化反應(yīng)是指纖維素的晶體結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,表現(xiàn)為無序性。??對與李氏木霉(7Hc/w辦rwa?reeseO外纖維素酶結(jié)合的纖維素結(jié)構(gòu)進行掃描電鏡觀察
【參考文獻】:
期刊論文
[1]微生物在秸稈還田中的應(yīng)用研究進展[J]. 段杰,崔俊濤. 資源節(jié)約與環(huán)保. 2015(02)
[2]農(nóng)作物秸稈綜合利用的研究進展綜述[J]. 解恒參,趙曉倩. 環(huán)境科學(xué)與管理. 2015(01)
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[4]基于共聚焦顯微拉曼光譜揭示炭疽病侵染下茶葉細胞壁變化的研究[J]. 李曉麗,羅榴彬,胡小倩,樓兵干,何勇. 光譜學(xué)與光譜分析. 2014(06)
[5]腐熟劑作用下油菜秸稈還田對土壤性狀與單季稻產(chǎn)量的影響[J]. 懷燕,潘建清,陳一定,陸若輝,朱偉鋒. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(05)
[6]土壤有機質(zhì)與農(nóng)作物產(chǎn)量的關(guān)系研究[J]. 宋躍明. 農(nóng)村經(jīng)濟與科技. 2014(01)
[7]秸稈還田對設(shè)施土壤微生物種群數(shù)量的影響[J]. 李鑫,池景良,王志學(xué),孫玉祿. 農(nóng)業(yè)科學(xué)研究. 2013(04)
[8]玉米秸稈低溫降解復(fù)合菌系的篩選[J]. 薩如拉,高聚林,于曉芳,胡樹平. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(19)
[9]長期秸稈還田對旱地玉米產(chǎn)量、效益及水分利用的影響[J]. 周懷平,解文艷,關(guān)春林,楊振興,李紅梅. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報. 2013(02)
[10]2種還田模式下小麥秸稈腐解菌劑應(yīng)用效果研究[J]. 劉海靜,任萍. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2013(03)
碩士論文
[1]低溫纖維素降解菌的篩選及其混合發(fā)酵效果研究[D]. 付秋玥.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]高溫纖維素降解菌的篩選及其復(fù)合菌劑對秸稈降解效果的研究[D]. 王元明.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]中低溫秸稈降解菌的篩選及其秸稈降解效果研究[D]. 劉爽.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[4]兩種木霉混合菌產(chǎn)酶的條件優(yōu)化及其對玉米秸稈降解的研究[D]. 李國強.東北林業(yè)大學(xué) 2011
[5]秸稈還田養(yǎng)分釋放規(guī)律及稻草化感作用研究[D]. 李逢雨.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]長期秸稈還田改土培肥綜合效應(yīng)的研究[D]. 孫偉紅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
本文編號:3073092
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