三七是我國特有的一種中藥材,具有很高的藥用價值和經(jīng)濟價值。三七的生長對土壤、氣候等環(huán)境條件要求特殊,且生長周期長,免耕時間為3-5年。三七的連作障礙嚴重,種植間隔達20年之久。微生物變化,尤其是病原滋生被認為是三七連作障礙的一個重要原因。放線菌是土壤生態(tài)中一個重要的類群,在農(nóng)業(yè)病蟲害的防治中具有重要作用,但是在三七種植生態(tài)中的作用鮮有報道。因此,本研究通過MiSeq高通量測序和純培養(yǎng)相結(jié)合的手段對三七種植土壤的放線菌群落結(jié)構(gòu)和多樣性變化進行分析,并初步評估了純培養(yǎng)菌株對三七根腐病主要病原菌的生防潛力及其對10種三七常用農(nóng)藥的響應(yīng)。研究結(jié)果對于理解放線菌在三七種植中的生態(tài)功能具有重要意義。MiSeq高通量測序結(jié)果表明,非種植土壤中的放線菌主要分布于8目44科的115 屬,在科水平上 unclassified、Pseudonocardiaceae、Micromonosporaceae 為優(yōu)勢類群,在屬水平上unclassified和Mycobacterium為優(yōu)勢放線菌類群,隨著時間的變化,非種植土壤中的放線菌群落結(jié)構(gòu)相對穩(wěn)定。三七種植土壤放線菌主要分布于8目45科的117屬,在科水平上unclassified、Pseudonocardiaceae、Micromonosporaceae為優(yōu)勢類群,在屬水平上unclassified和Mycobacterium為優(yōu)勢放線菌類群。與對照組相比,三七種植土壤中Thermoleophilales和Thermoleophilaceae的豐度顯著降低;而剛種植三七的土壤中Nocardioidaceae和Streptomycetaceae相對豐度明顯升高,但是隨著種植時間增長,其相對豐度大幅度降低,同樣的變化趨勢也體現(xiàn)在屬于Nocardioidaceae的Nocardioides和Marmoricola以及屬于Streptomycetaceae的Streptomyces的豐度變化上。占比例最高的unclassifed類群隨著種植時間的增加略有升高。從三七種植土壤中共分離獲得放線菌446株,分布于7目8科10屬中,Streptomycetale、Streptomycetaceae、Streptomyces均為3個樣品的優(yōu)勢類群,占79%。隨著時間的變化,三七種植土壤與非種植土壤樣品放線菌數(shù)量量呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢,鏈霉菌屬無明顯變化。采用平板對峙培養(yǎng)法和瓊脂擴散法,以Fusarium solani、Epicoccum nigrum、Phomaherbarum、Fusarium oxysporum、Fusarium flocciferum、Alterrnaria panax、Plectosphaerellc cucumeriaa 7株三七病原菌為靶標,篩選對三七病原菌有抑制活性的放線菌。結(jié)果顯示28株放線菌對7株病原菌具有不同程度的抑制作用,其中菌株 PH21294(Streptomyc s spiroverticillauus)對 7 株病原菌抑制作用明顯,對A.panax的抑菌圈直徑達40.0 mm,具有較好的生防應(yīng)用潛力。通過生物量法,評價活性菌株P(guān)H21294(S.spiroverticillatus)對10種三七常用農(nóng)藥的耐受性。結(jié)果表明在低濃度下(0.1 μg/mL)9種三七常用農(nóng)藥可以促進菌株P(guān)H21294的生長。當(dāng)甲霜·錳鋅的濃度為0.1μg/mL時,PH21294的生物量是對照組的6倍。在高濃度時,7種農(nóng)藥能夠抑制PH21294生長;當(dāng)甲硫·福美雙、代森錳鋅濃度為50μg/mL時,異菌脲、殺撲磷和高氯·馬的濃度為110 μg/mL時,多抗霉素和甲霜·錳鋅在濃度為330 μg/mL時,菌株P(guān)H21294均無法生長。.而腐霉利在高濃度下(330μg/mL)仍表現(xiàn)出促進PH21294生長。
【學(xué)位單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S567.236;S154.3
【部分圖文】：

監(jiān)測不同環(huán)境過程和生態(tài)功能等的最有效的分子途徑。逡逑１．２三七病害與連作障礙關(guān)系逡逑三七（／＾／？似《０／０笑／＞７．記／７發(fā)），是一種多年生宿根草本植物（植株形態(tài)見圖１－１），逡逑又稱為田七、金不換等｜２９］，是我國傳統(tǒng)名貴中藥材。生長要求特殊，主要分布在逡逑文山中、高海拔地區(qū)［３（＞１。三七有防止動脈硬化和血栓形成、降血脂和血粘稠度，逡逑抗腫瘤，還能增強免疫力等［３１＿３６］。三七中的皂苷作用突出，許多三七中的天然物逡逑質(zhì)己經(jīng)被分離出來［％３９１。云南文山是三七的主產(chǎn)地，現(xiàn)在以三七作為主要原料的逡逑商品有百余種，如云南白藥、三七片等。逡逑ｉｆ逡逑ｖ逡逑圖１－１三七植株形態(tài)（王強拍攝）逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｐａｎａｘ邋ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ邋ｐｌａｎｔ邋（ｐｈｏｔｏ邋ｆｒｏｍ邋Ｗａｎｇ邋Ｑｉａｎｇ）逡逑三七生長年限比較長，免耕連作加之蔽蔭潮濕的環(huán)境致使三七容易受到病害的逡逑侵襲。為了控制病害和提高產(chǎn)量大量施撒農(nóng)藥化肥，導(dǎo)致了三七生長環(huán)境生態(tài)失逡逑衡

圖２－１邋ＰＣＲ擴增結(jié)果逡逑－

邐ＣＫ３逡逑樣品逡逑圖２－２三七非種植土壤放線菌群落在科水平上的分布逡逑Ｆｉｇ邋２－２邋Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ邋ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ邋ｉｎ邋ｎｏｎ－ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ邋ｓｏｉｌ邋ｏｆ邋Ｐａｎａｘ邋ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎ＾逡逑ａｔ邋ｔｈｅ邋ｆａｍｉｌｙ邋ｌｅｖｅｌ逡逑如圖２－２所示，在屬的分類水平上分析非種植土壤樣品中放線菌分布，優(yōu)勢類逡逑群為／／＂ｃ／ａ．ｓｗｙｉ＾ｔ／邋（４１．５４％）和邋Ａ＾ｖ，ｃ（，／＾７ｃ／ｅ７７＂／；７邋（９．２４％）。ＣＫ１邋分屬于邋１００邋個屬和逡逑／＂７ｃ７ａ．ｖ可／Ｗ，＂＂ｃ／ａｓ’．ｖ丨NB／Ｗ、逡逑度為邋４３．５７邋％，邋８．５７邋％，８．３４邋°／0。ＣＫ２邋中放線菌分布于邋９３邋個屬和邋ｗ／７ｃ／ａ＾ｉ／？＾／，逡逑１３逡逑

【參考文獻】

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1 陸曉菊;官會林;張正蕓;馬永存;唐蜀昆;;三七連作根際土壤微生物區(qū)系的16S rRNA系統(tǒng)遺傳多樣性[J];微生物學(xué)報;2015年02期

2 鄭有坤;劉凱;熊子君;李文均;徐麗華;趙立興;;藥用植物內(nèi)生放線菌多樣性及天然活性物質(zhì)研究進展[J];中草藥;2014年14期

3 鄭有坤;任丹;盧圣鄂;李小林;張小平;辜運富;;鉛鋅礦區(qū)蜈蚣草內(nèi)生放線菌的多樣性及群落結(jié)構(gòu)[J];環(huán)境科學(xué)學(xué)報;2014年11期

4 崔秀明;黃璐琦;郭蘭萍;劉大會;;中國三七產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展對策[J];中國中藥雜志;2014年04期

5 張永光;劉晴;王宏飛;張道鋒;陳吉岳;張元明;李文均;;新疆阜康鹽堿地可培養(yǎng)兼性嗜堿放線菌多樣性及其酶活篩選[J];微生物學(xué)報;2014年02期

6 阮繼生;;“伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)手冊(第二版)”第5卷與我國的放線菌系統(tǒng)學(xué)研究[J];微生物學(xué)報;2013年06期

7 董艷萍;郭琳;旭格拉·哈布丁;劉佳萌;陳川;蔣忠科;李昕;朱霞琳;曹存巍;張玉彬;孫承航;;塔克拉瑪干沙漠南麓土壤放線菌資源勘探及抗菌活性篩選[J];中國抗生素雜志;2013年04期

8 辛紅梅;郭正彥;范麗霞;胡兆農(nóng);吳文君;;山東半島農(nóng)藥污染點源放線菌多樣性及抑菌活性[J];微生物學(xué)報;2012年04期

9 秦楠;栗東芳;楊瑞馥;;高通量測序技術(shù)及其在微生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J];微生物學(xué)報;2011年04期

10 劉莉;劉大會;金航;馮光泉;張金渝;韋美麗;趙振玲;;三七連作障礙的研究進展[J];山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報;2011年01期

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1 高瑞蘭;陳小紅;錢煦岱;周郁鴻;林筱潔;金錦梅;吳超群;;三七皂苷誘導(dǎo)造血干/祖細胞增殖分化及基因表達譜[A];第10屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2005年

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1 苗翠蘋;三七根際土壤微生物的群落特征[D];云南大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 王文躍;若爾蓋高原土壤放線菌生物多樣性研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

本文編號：2818006