小黑楊(Populus simonii ×Populus nigra)是楊柳科楊屬喬木,具有抗旱、耐寒、耐瘠薄等優(yōu)良性狀,是北方推廣的造林樹種。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine Aminotransferase,AlaAT)是一種磷酸吡哆醛依賴性的轉(zhuǎn)移酶,在植物碳氮代謝平衡中起關(guān)鍵性作用。本研究利用生物信息學(xué)方法,在楊樹基因組數(shù)據(jù)庫中鑒定了谷丙轉(zhuǎn)氨酶基因家族的4個(gè)同源基因。以小黑楊為試材克隆了PnAlaAT1-4基因,并且對(duì)獲得的cDNA的核苷酸序列、編碼蛋白的氨基酸序列進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。同時(shí),利用實(shí)時(shí)定量PCR方法鑒定了PnAlaATs基因的組織表達(dá)特異性及其在不同氮素條件、日節(jié)律及光照等條件下的表達(dá)模式。構(gòu)建pROK Ⅱ-PnAlaAT3植物表達(dá)載體后通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法遺傳轉(zhuǎn)化小黑楊,獲得了 17個(gè)轉(zhuǎn)基因株系。主要研究結(jié)果如下:(1)利用生物信息學(xué)方法,在毛果楊基因組數(shù)據(jù)庫中鑒定了 AlaAT基因家族的4個(gè)成員。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,該家族含有2個(gè)亞家族,PtAlaAT3和PtAlaAT4屬于亞家族A,編碼谷丙轉(zhuǎn)氨酶;PtAlaAT1和PtAlaAT2屬于亞家族B,編碼谷氨酸:乙醛...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１植物對(duì)氮素的吸收和同化??ＮＲ：硝酸還原酶；ＧＯＧＡＴ：谷氨酰胺合成酶；ｇｌｕｔａｍａｔｅ：谷氨酰胺；ｇｌｕｔａｍｉｎｅ：谷氨酸鹽

?１緒論???１緒論??１．１植物氮素代謝過程??氮素是植物從土壤中吸收量最多的元素，是植物生長發(fā)育過程中必需的大量元素。??氮素的吸收與利用效率直接影響著植物的生長與發(fā)育。??可以被植物從外界吸收和利用的氮素形式主要是銨態(tài)氮、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮、單質(zhì)??態(tài)氮及一些可溶性有機(jī)含氮化....

圖２－２毛果楊基因的結(jié)構(gòu)??

?東北林業(yè)人學(xué)碩＿丨：學(xué)位論文???２．３．３楊樹乃基因的結(jié)構(gòu)分析??通過ＧＳＤＳ在線軟件繪制毛果楊基因的結(jié)構(gòu)圖，結(jié)果如圖２－２所示，亞家??族Ａ中的ＰＭＷ７７和基因具有相似的基因結(jié)構(gòu)，都含有１３個(gè)外顯子，均為??第３至最后一個(gè)外顯子編碼了保守結(jié)構(gòu)域。亞家族Ｂ中的尸Ｍ／ａｄｒｉ和....

圖２－３毛果楊ＰＭ／ｄ７：ｖ基因啟動(dòng)子的順式作用元件示意圖??注：ＡＢＡ?ｅｌｅｍｅｎｔ，脫落酸應(yīng)答兀件；Ｌｉｇｈｔ?ｅｌｅｍｅｎｔ，光應(yīng)答元件；ＭｅＪＡ?ｅｌｅｍｅｎｔ，茉莉酸應(yīng)答元??

?東北林業(yè)人學(xué)碩＿丨：學(xué)位論文???２．３．３楊樹乃基因的結(jié)構(gòu)分析??通過ＧＳＤＳ在線軟件繪制毛果楊基因的結(jié)構(gòu)圖，結(jié)果如圖２－２所示，亞家??族Ａ中的ＰＭＷ７７和基因具有相似的基因結(jié)構(gòu)，都含有１３個(gè)外顯子，均為??第３至最后一個(gè)外顯子編碼了保守結(jié)構(gòu)域。亞家族Ｂ中的尸Ｍ／ａｄｒｉ和....

圖３－１小黑楊取材與氮素處理設(shè)計(jì)模式圖??（３）光和黑暗處理：培養(yǎng)方式如（１），小黑楊株高近３０?ｃｍ時(shí)，進(jìn)行光照和黑暗??處理，每三棵苗一組

１０?ｍｍｏｌ／Ｌ?ｌ?ｉ２ｈ?｜??１?ＨＨＨＩ????ｉ?ｌｉｂ?＼??＼＼?ｔ?３ｈ?）??？?Ｊ隊(duì)：?０．１?ｍｍｏｌ／Ｌ??▲?、???６?７２ｂ?＼??Ｍｇ：?Ｉ?？?＼??ｗＢｆ?Ｒｏｏｔ?ＮＨ＾ＮＯｖ?１?ｍｍｏｌ／Ｌ?Ｌ１??Ｖｉ?ｎ?ｏｒｎ??ｉ?＾?Ｉ?１０....

本文編號(hào)：3976320