黑果腺肋花楸中花色苷含量豐富,可作為天然色素的新來源。為提高黑果腺肋花楸的利用度,本文采用纖維素酶酶解-乙醇提取技術(shù)提取花色苷,并優(yōu)化提取條件;借助AB-8大孔樹脂對花色苷粗提物進行分離純化,通過研究靜態(tài)和動態(tài)吸附解吸條件,優(yōu)化純化工藝;通過測定花色苷對DPPH自由基和羥自由基的清除能力,評價花色苷的抗氧化活性;建立H2O2誘導的HepG2細胞氧化損傷模型,探究花色苷對細胞氧化損傷的保護作用和機制。主要研究結(jié)果如下:1.通過單因素和響應(yīng)面設(shè)計確定酶解-溶劑提取的最優(yōu)條件為:酶用量0.03%,酶處理溫度51.76℃,酶處理時間1.29 h。在此條件下,花色苷提取量為3.16 mg/g,與簡單醇提法相比,提高了 45.24%,說明纖維素酶能顯著提高黑果腺肋花楸花色苷的提取量。2.選用AB-8大孔樹脂對粗品花色苷進行分離純化,通過研究靜態(tài)-動態(tài)吸附解吸條件,確定最佳純化條件為:上樣液濃度10.51 mg/mL,上樣液pH 2.0,上樣液流速1.5 mg/mL,上樣量12 BV(柱體積),水洗量為7BV,乙醇濃度90%,洗脫所需乙醇量為2 BV。在該條件下,純化后樣品為紫黑色粉末,花色苷含量為...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 黑果腺肋花楸的研究進展
        1.1.1 黑果腺肋花楸簡介
        1.1.2 黑果腺肋花楸主要營養(yǎng)物質(zhì)及生理功能
        1.1.3 黑果腺肋花楸的開發(fā)現(xiàn)狀
    1.2 花色苷的概述
        1.2.1 花色苷的結(jié)構(gòu)及化學性質(zhì)
        1.2.2 花色苷的提取方法
        1.2.3 花色苷的純化方法
    1.3 研究的目的、意義及內(nèi)容
        1.3.1 研究目的和意義
        1.3.2 研究內(nèi)容
    1.4 技術(shù)路線
2 黑果腺肋花楸花色苷的提取工藝研究
    2.1 材料、試劑與儀器
        2.1.1 材料
        2.1.2 試劑
        2.1.3 儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 花色苷含量的測定
        2.2.2 單因素實驗
        2.2.3 響應(yīng)面設(shè)計
        2.2.4 數(shù)據(jù)處理
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 花色苷紫外可見光譜結(jié)果分析
        2.3.2 單因素實驗結(jié)果與分析
        2.3.3 響應(yīng)面設(shè)計與分析
    2.4 本章小結(jié)
3 黑果腺肋花楸花色苷純化工藝研究
    3.1 材料、試劑與儀器
        3.1.1 材料與試劑
        3.1.2 儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 黑果腺肋花楸花色苷粗提物的制備
        3.2.2 AB-8大孔樹脂的預處理
        3.2.3 花色苷吸收光譜與工作曲線
        3.2.4 AB-8大孔樹脂靜態(tài)吸附與解吸
        3.2.5 AB-8大孔樹脂動態(tài)吸附與解吸
        3.2.6 AB-8大孔樹脂對黑果腺肋花楸花色苷的純化效果
        3.2.7 數(shù)據(jù)處理
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 花色苷吸收光譜和標準曲線的建立
        3.3.2 最佳純化工藝的確定
        3.3.3 AB-8大孔樹脂對黑果腺肋花楸花色苷的純化效果
    3.4 本章小結(jié)
4 黑果腺肋花楸花色苷抗氧化性研究
    4.1 材料、試劑與儀器
        4.1.1 材料
        4.1.2 試劑
        4.1.3 儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 黑果腺肋花楸花色苷抗氧化活性研究
        4.2.2 細胞復蘇
        4.2.3 細胞培養(yǎng)與傳代
        4.2.4 細胞凍存
        4.2.5 細胞計數(shù)
        4.2.6 MTT法測定花色苷對細胞存活率的影響
        4.2.7 H₂O₂誘導HepG2細胞氧化損傷模型的建立
        4.2.8 花色苷對H₂O₂誘導的HepG2細胞氧化損傷的影響
        4.2.9 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
        4.2.10 數(shù)據(jù)處理
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 花色苷的抗氧化活性
        4.3.2 花色苷對HepG2細胞存活率的影響
        4.3.3 H₂O₂誘導HepG2細胞的氧化損傷
        4.3.4 花色苷對玩H₂O₂誘導的HepG2細胞氧化損傷的影響
        4.3.5 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
    4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
個人簡介
導師簡介
致謝



本文編號：3923962