紅松體胚成熟培養(yǎng)與胚性愈傷組織保存研究
發(fā)布時(shí)間:2023-11-12 12:18
紅松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.),作為闊葉紅松林的建群種,是我國東北東部山區(qū)極其重要的珍貴鄉(xiāng)土優(yōu)質(zhì)用材林和堅(jiān)果經(jīng)濟(jì)林樹種。本研究通過篩選和建立胚性愈傷組織超低溫保存方案,進(jìn)一步優(yōu)化紅松體胚發(fā)生體系,同時(shí)對(duì)不同類型愈傷組織和紅松體胚不同發(fā)育時(shí)期的形態(tài)及生理進(jìn)行探究,以闡述紅松體胚發(fā)生與外源添加物質(zhì)的關(guān)系,揭示不同類型愈傷組織之間的形態(tài)和生理與體胚發(fā)生潛力之間、體胚發(fā)育與形態(tài)和生理變化之間的關(guān)系。主要結(jié)果如下:(1)在紅松胚性愈傷組織誘導(dǎo)過程中,外植體母樹來源顯著影響胚性愈傷組織誘導(dǎo)率,28株母樹中只有10株母樹成功獲得胚性愈傷組織,誘導(dǎo)率最高為22%,最低為2%。意味著基因型在胚性愈傷組織誘導(dǎo)中可能起到?jīng)Q定性作用。(2)在紅松體胚成熟培養(yǎng)過程中,最佳培養(yǎng)方式為分散培養(yǎng)(91個(gè)·g-1FW愈傷組織),最佳成熟培養(yǎng)基為mLV+80 μmol·L-1 ABA+1.2%結(jié)冷膠+0.2 mol·L-1蔗糖,最佳細(xì)胞密度為50 mg愈傷組織每皿。其中,0.2 mol·L-1蔗糖處理對(duì)促進(jìn)體胚發(fā)生數(shù)量影響最大(9.3倍),1.2%結(jié)冷膠處理對(duì)促進(jìn)體胚發(fā)生數(shù)量影響次之...
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生研究現(xiàn)狀
1.1.1 針葉樹體胚發(fā)生研究
1.1.2 體胚發(fā)生中的生理生化研究
1.2 植物種植資源保存研究現(xiàn)狀
1.3 紅松體胚發(fā)生研究進(jìn)展
1.4 本研究的目的與意義
2 紅松體胚發(fā)生體系優(yōu)化
2.1 試驗(yàn)材料與方法
2.1.1 試驗(yàn)材料
2.1.2 試驗(yàn)方法
2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 母樹來源對(duì)胚性愈傷組織誘導(dǎo)的影響
2.3.2 體胚成熟培養(yǎng)方式對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.3 培養(yǎng)基類型對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.4 ABA濃度對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.5 結(jié)冷膠濃度對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.6 蔗糖濃度和細(xì)胞密度對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.7 胚性愈傷組織繼代時(shí)間對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.8 紅松體胚苗萌發(fā)和再生植株移栽
2.4 討論
2.4.1 母樹來源與胚性愈傷組織誘導(dǎo)的關(guān)系
2.4.2 成熟培養(yǎng)方式與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.3 培養(yǎng)基類型與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.4 ABA和結(jié)冷膠濃度與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.5 蔗糖濃度和細(xì)胞密度與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.6 胚性愈傷組織繼代培養(yǎng)時(shí)間與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.5 本章小結(jié)
3 不同發(fā)育時(shí)期紅松體胚形態(tài)變化及生化分析
3.1 試驗(yàn)材料與方法
3.1.1 試驗(yàn)材料
3.1.2 試驗(yàn)方法
3.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 紅松體胚發(fā)育過程中的形態(tài)變化
3.3.2 紅松體胚發(fā)育過程中生化分析
3.4 討論
3.4.1 紅松體胚發(fā)育過程培養(yǎng)物鮮重、干重比和含水量與體胚發(fā)育的關(guān)系
3.4.2 貯藏物質(zhì)與紅松體胚發(fā)育的關(guān)系
3.4.3 抗氧化酶活性與紅松體胚發(fā)育的關(guān)系
3.5 本章小結(jié)
4 紅松不同類型愈傷組織的形態(tài)及生化差異
4.1 試驗(yàn)材料和方法
4.1.1 試驗(yàn)材料
4.1.2 試驗(yàn)方法
4.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 不同類型愈傷組織的形態(tài)與細(xì)胞差異
4.3.2 不同類型愈傷組織的生理分析
4.4 討論
4.4.1 不同類型愈傷組織的形態(tài)差異與體胚發(fā)生潛力的關(guān)系
4.4.2 不同類型愈傷組織的生理生化差異與體胚發(fā)生潛力的關(guān)系
4.5 本章小結(jié)
5 紅松胚性愈傷組織超低溫保存研究
5.1 試驗(yàn)材料與方法
5.1.1 試驗(yàn)材料
5.1.2 試驗(yàn)方法
5.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 預(yù)培養(yǎng)條件對(duì)胚性愈傷組織存活率的影響
5.3.2 冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞存活率的影響
5.3.3 胚性愈傷組織復(fù)蘇觀察
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ
附錄Ⅱ
附錄Ⅲ
附錄Ⅳ
附錄Ⅴ
附錄Ⅵ
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
附件
本文編號(hào):3863140
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
1.1 植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生研究現(xiàn)狀
1.1.1 針葉樹體胚發(fā)生研究
1.1.2 體胚發(fā)生中的生理生化研究
1.2 植物種植資源保存研究現(xiàn)狀
1.3 紅松體胚發(fā)生研究進(jìn)展
1.4 本研究的目的與意義
2 紅松體胚發(fā)生體系優(yōu)化
2.1 試驗(yàn)材料與方法
2.1.1 試驗(yàn)材料
2.1.2 試驗(yàn)方法
2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 母樹來源對(duì)胚性愈傷組織誘導(dǎo)的影響
2.3.2 體胚成熟培養(yǎng)方式對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.3 培養(yǎng)基類型對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.4 ABA濃度對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.5 結(jié)冷膠濃度對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.6 蔗糖濃度和細(xì)胞密度對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.7 胚性愈傷組織繼代時(shí)間對(duì)體胚成熟數(shù)量的影響
2.3.8 紅松體胚苗萌發(fā)和再生植株移栽
2.4 討論
2.4.1 母樹來源與胚性愈傷組織誘導(dǎo)的關(guān)系
2.4.2 成熟培養(yǎng)方式與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.3 培養(yǎng)基類型與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.4 ABA和結(jié)冷膠濃度與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.5 蔗糖濃度和細(xì)胞密度與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.4.6 胚性愈傷組織繼代培養(yǎng)時(shí)間與體胚成熟數(shù)量的關(guān)系
2.5 本章小結(jié)
3 不同發(fā)育時(shí)期紅松體胚形態(tài)變化及生化分析
3.1 試驗(yàn)材料與方法
3.1.1 試驗(yàn)材料
3.1.2 試驗(yàn)方法
3.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 紅松體胚發(fā)育過程中的形態(tài)變化
3.3.2 紅松體胚發(fā)育過程中生化分析
3.4 討論
3.4.1 紅松體胚發(fā)育過程培養(yǎng)物鮮重、干重比和含水量與體胚發(fā)育的關(guān)系
3.4.2 貯藏物質(zhì)與紅松體胚發(fā)育的關(guān)系
3.4.3 抗氧化酶活性與紅松體胚發(fā)育的關(guān)系
3.5 本章小結(jié)
4 紅松不同類型愈傷組織的形態(tài)及生化差異
4.1 試驗(yàn)材料和方法
4.1.1 試驗(yàn)材料
4.1.2 試驗(yàn)方法
4.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 不同類型愈傷組織的形態(tài)與細(xì)胞差異
4.3.2 不同類型愈傷組織的生理分析
4.4 討論
4.4.1 不同類型愈傷組織的形態(tài)差異與體胚發(fā)生潛力的關(guān)系
4.4.2 不同類型愈傷組織的生理生化差異與體胚發(fā)生潛力的關(guān)系
4.5 本章小結(jié)
5 紅松胚性愈傷組織超低溫保存研究
5.1 試驗(yàn)材料與方法
5.1.1 試驗(yàn)材料
5.1.2 試驗(yàn)方法
5.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 預(yù)培養(yǎng)條件對(duì)胚性愈傷組織存活率的影響
5.3.2 冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞存活率的影響
5.3.3 胚性愈傷組織復(fù)蘇觀察
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ
附錄Ⅱ
附錄Ⅲ
附錄Ⅳ
附錄Ⅴ
附錄Ⅵ
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
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本文編號(hào):3863140
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