松樹(shù)萎蔫病是松屬植物的一種毀滅性疾病,松材線蟲(chóng)(Bursaphelenchus xylophilus)是松樹(shù)萎蔫病的重要病原物,該疾病在全球范圍內(nèi)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失和環(huán)境破壞。從自然界中尋找對(duì)松材線蟲(chóng)具有高致死性的微生物及其代謝產(chǎn)物已成為研發(fā)新型殺線蟲(chóng)劑的一個(gè)研究熱點(diǎn)。本文對(duì)從青島麥島近海海域采集的樣品采用稀釋涂布平板法分離共得到21株海洋放線菌,使用浸漬法對(duì)放線菌培養(yǎng)濾液進(jìn)行殺松材線蟲(chóng)活性測(cè)定,從中篩選出了1株具有較高殺線活性的放線菌HT-8。該菌株分離自海泥,其培養(yǎng)濾液處理松材線蟲(chóng)72 h,松材線蟲(chóng)的校正死亡率高達(dá)88.30%。通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察,生理生化特性和16S rDNA序列測(cè)定及其系統(tǒng)發(fā)育分析,將菌株HT-8鑒定為白蟻鏈霉菌(Streptomyces termitum)。采用單因素法分析菌株HT-8的最佳培養(yǎng)條件,結(jié)果表明,產(chǎn)殺線活性物質(zhì)的最適培養(yǎng)基海水濃度、起始pH、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間分別為1000 mL/L、pH7.5、25℃、7 d;最適接種體菌齡和接種量分別為48 h和6%。對(duì)培養(yǎng)基海水濃度、起始pH、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn),結(jié)果表明,菌株HT-8的培養(yǎng)濾液殺...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 分離樣品來(lái)源與供試蟲(chóng)源
        1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 松材線蟲(chóng)的培養(yǎng)
        1.2.2 培養(yǎng)基的配制
        1.2.3 海洋放線菌的分離
        1.2.4 殺線蟲(chóng)放線菌菌株的篩選
        1.2.5 放線菌HT-8的分類鑒定
        1.2.6 海水濃度，初始pH，培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)菌株HT-8培養(yǎng)濾液殺線蟲(chóng)活性的影響
        1.2.7 菌株HT-8培養(yǎng)條件的正交優(yōu)化
        1.2.8 菌株HT-8菌體胞內(nèi)物質(zhì)殺線活性測(cè)定
        1.2.9 菌株HT-8的培養(yǎng)濾液中活性物質(zhì)穩(wěn)定性的測(cè)定
        1.2.10 菌株HT-8殺線蟲(chóng)活性物質(zhì)提取
        1.2.11 菌株HT-8殺線蟲(chóng)活性物質(zhì)分離和純化
第二章 結(jié)果與分析
    2.1 菌株的分離、篩選和殺線蟲(chóng)活性的測(cè)定
    2.2 殺線蟲(chóng)海洋放線菌HT-8的分類鑒定
        2.2.1 形態(tài)特征及生理生化特性
        2.2.2 菌株HT-8的16S rDNA序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)構(gòu)建
    2.3 不同培養(yǎng)條件對(duì)菌株HT-8的培養(yǎng)濾液殺線蟲(chóng)活性影響
        2.3.1 海水濃度、初始pH值、培養(yǎng)溫度及培養(yǎng)時(shí)間對(duì)菌株HT-8培養(yǎng)濾液殺線蟲(chóng)活性的影響
        2.3.2 菌齡和接種量對(duì)菌株HT-8培養(yǎng)濾液殺線蟲(chóng)活性的影響
    2.4 菌株HT-8培養(yǎng)條件的正交優(yōu)化
    2.5 菌株HT-8菌體胞內(nèi)物質(zhì)殺線活性測(cè)定
    2.6 菌株HT-8的培養(yǎng)濾液中活性物質(zhì)穩(wěn)定性的測(cè)定
        2.6.1 熱穩(wěn)定性
        2.6.2 酸堿度穩(wěn)定性
    2.7 菌株HT-8的不同溶劑提取物殺線活性分析
    2.8 菌株H-8的乙酸乙酯提取物活性成分的分離及活性測(cè)定
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    一、松樹(shù)萎蔫病的研究歷史
    二、松樹(shù)萎蔫病病原體的發(fā)現(xiàn)
    三、松墨天牛的生物學(xué)特征
    四、松材線蟲(chóng)侵染松樹(shù)循環(huán)路徑
    五、相關(guān)細(xì)菌對(duì)松樹(shù)萎蔫病的影響
    六、相關(guān)真菌對(duì)松樹(shù)萎蔫病的影響
    七、松樹(shù)死亡機(jī)制假說(shuō)
    八、松樹(shù)萎蔫病控制策略
    九、展望
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間研究成果
致謝



本文編號(hào)：3846356