植物內(nèi)生菌是一類種類繁多、在植物體內(nèi)作用廣泛(促進植物生長、抵抗病害等)、易于定殖、發(fā)揮作用持久的微生物資源。為篩選到優(yōu)良抗病促生內(nèi)生微生物應(yīng)用于上海生態(tài)林,本文分別從樟樹、櫻花、水杉三個樹種的組織內(nèi)用組織切片和組織勻漿法進行內(nèi)生菌的分離。在分離到的內(nèi)生菌中篩選出對植物病原具有拮抗作用及有解磷固氮能力的菌株;同時對菌株的耐鹽性進行研究;再對篩選獲得的優(yōu)良菌株進行鑒定;并用綠色熒光蛋白基因標記的方法研究優(yōu)良菌株在樹體內(nèi)的定殖規(guī)律;此外,選用本實驗室前人篩選獲得的優(yōu)良菌株在上海生態(tài)林上進行菌株的田間抗病促生效應(yīng)分析試驗。主要結(jié)果如下:1.從樟樹組織內(nèi)分離到50株細菌、3株真菌。通過平板對抗實驗篩選到5株對殼梭孢潰瘍病病原菌(Fusicoccum sp.)有拮抗作用、6株對擬盤多毛孢枯枝病病原菌(Pestalotiopsis sp.)有拮抗作用、9株對擬莖點潰瘍病病原菌(Phomopsis sp.)有拮抗作用的內(nèi)生細菌。其中,菌株ZS-37及菌株ZS-3對三種病原菌都有拮抗作用,菌株ZS-1對殼梭孢潰瘍病病原菌和擬莖點潰瘍病病原菌兩種病原菌有較好的拮抗效果,菌株ZS-26及菌株ZS-30對擬...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻綜述
    1 上海生態(tài)林概況
        1.1 樟樹病蟲害研究概述
        1.2 櫻花病蟲害研究概述
        1.3 水杉病蟲害研究概述
        1.4 楊樹病蟲害研究概述
    2 植物內(nèi)生菌研究進展
        2.1 植物內(nèi)生菌的定義
        2.2 植物內(nèi)生菌的分布及多樣性
        2.3 內(nèi)生菌的作用
        2.4 內(nèi)生菌分離與優(yōu)良菌株篩選
        2.5 內(nèi)生菌防治植物病害的潛在風險
        2.6 植物內(nèi)生菌的應(yīng)用前景
第二章 三種樹種內(nèi)生菌的分離純化及拮抗菌的篩選
    1 材料與方法
        1.1 供試培養(yǎng)基
        1.2 樣品采集與表面預(yù)處理
            1.2.1 樣品的采集
        1.3 組織切片法分離枝部內(nèi)生菌
        1.4 組織勻漿法分離葉部內(nèi)生菌
        1.5 內(nèi)生菌的純化和保存
        1.6 內(nèi)生拮抗細菌的篩選
            1.6.1 樟樹內(nèi)生拮抗細菌的篩選
            1.6.2 櫻花內(nèi)生拮抗細菌的篩選
            1.6.3 水杉內(nèi)生拮抗菌的篩選
    2 結(jié)果與分析
        2.1 香樟內(nèi)生菌的分離純化及拮抗菌的篩選結(jié)果
            2.1.1 香樟內(nèi)生菌的分離結(jié)果
            2.1.2 樟樹抑菌內(nèi)生細菌的篩選結(jié)果
        2.2 櫻花內(nèi)生菌分離純化及拮抗菌的篩選結(jié)果
            2.2.1 櫻花內(nèi)生菌的分離結(jié)果
            2.2.2 櫻花抑菌內(nèi)生菌的篩選結(jié)果
        2.3 水杉內(nèi)生菌分離純化及拮抗菌的篩選結(jié)果
            2.3.1 水杉內(nèi)生菌的分離結(jié)果
            2.3.2 水杉抑菌內(nèi)生菌的篩選結(jié)果
    3 結(jié)論與討論
第三章 內(nèi)生細菌的解磷、固氮和耐鹽性研究
    1 材料與方法
        1.1 供試培養(yǎng)基
        1.2 內(nèi)生細菌解磷能力的研究
            1.2.1 解磷菌的初步篩選
            1.2.2 內(nèi)生菌 24h解磷能力的測定
        1.3 菌株固氮能力初步測定
        1.4 菌株的耐鹽性的測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 內(nèi)生菌株解磷能力的初步測定
        2.2 內(nèi)生菌株固氮能力的初步檢測
        2.3 內(nèi)生菌耐鹽性檢測結(jié)果
    3 結(jié)論與討論
第四章 三株優(yōu)良內(nèi)生菌株的種類鑒定
    1 材料與方法
        1.1 三株優(yōu)良內(nèi)生菌株的形態(tài)學觀察
        1.2 三株優(yōu)良內(nèi)生菌株的常規(guī)生理生化性狀的鑒定
        1.3 三株優(yōu)良內(nèi)生菌株的 16S rDNA基因序列測定及系統(tǒng)發(fā)育分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 三株優(yōu)良內(nèi)生菌株的形態(tài)學觀察
        2.2 三株優(yōu)良內(nèi)生菌的生理生化特性
        2.3 三株優(yōu)良內(nèi)生菌 16SrDNA測序結(jié)果及系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
            2.3.1 三株優(yōu)良內(nèi)生菌 16SrDNA基因序列擴增產(chǎn)物分析
            2.3.2 三株優(yōu)勢菌的 16SrDNA基因序列測定結(jié)果
        2.4 菌株的系統(tǒng)發(fā)育分布
    3 結(jié)論與討論
第五章 優(yōu)良內(nèi)生菌株的內(nèi)生定殖規(guī)律的研究
    1 材料與方法
        1.1 材料與儀器
        1.2 菌株和質(zhì)粒
        1.3 標記菌株的構(gòu)建
        1.4 標記菌株的觀察
        1.5 標記菌株的穩(wěn)定性測試
        1.6 標記菌株的體內(nèi)定殖
    2 結(jié)果與分析
        2.1 三株標記菌株的觀察結(jié)果
        2.2 標記菌株的穩(wěn)定性
        2.3 標記菌株在樹體內(nèi)的定殖結(jié)果
    3 結(jié)論與討論
第六章 全文總結(jié)與展望
    1 全文總結(jié)
    2 展望
參考文獻
附錄 幾株優(yōu)良菌株在楊樹、樟樹、櫻花及東方杉上的田間抗病促生效應(yīng)
    1 試驗方案及實驗材料
        1.1 幾株優(yōu)良菌株在楊樹上的田間效應(yīng)
            1.1.1 供試菌株
            1.1.2 培養(yǎng)基與液體菌劑的制備
            1.1.3 試驗地概況
            1.1.4 試驗方法
            1.1.5 試驗設(shè)計
            1.1.7 楊樹病蟲害調(diào)查
            1.1.8 楊樹生長量的測定
        1.2 幾株優(yōu)良菌株在樟樹上的田間效應(yīng)
            1.2.1 供試菌株
            1.2.2 培養(yǎng)基與液體菌劑的制備
            1.2.3 試驗地概況
            1.2.4 試驗方法
            1.2.5 試驗設(shè)計
            1.2.6 樟樹病蟲害調(diào)查
            1.2.7 樟樹生長量的測定
        1.3 幾株優(yōu)良菌株在櫻花上的田間效應(yīng)
            1.3.1 供試菌株
            1.3.2 培養(yǎng)基與液體菌劑的制備
            1.3.3 試驗地概況
            1.3.4 試驗方法
            1.3.5 試驗設(shè)計
            1.3.6 櫻花病蟲害調(diào)查
        1.4 幾株優(yōu)良菌株在東方杉上的田間效應(yīng)
            1.4.1 供試菌株
            1.4.2 培養(yǎng)基與液體菌劑的制備
            1.4.3 試驗地概況
            1.4.4 試驗方法
            1.4.5 試驗設(shè)計
            1.4.6 東方杉生長量的測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 幾株優(yōu)良菌株在楊樹上的田間效應(yīng)
            2.1.1 幾株優(yōu)良菌在楊樹病蟲害防治上的效應(yīng)
            2.1.2 各菌劑對楊樹生長的影響
        2.2 幾株優(yōu)良菌株在樟樹上的田間效應(yīng)
            2.2.1 各菌劑對樟樹病蟲害的防治效應(yīng)及苗木存活率的影響
            2.2.2 各菌劑對樟樹生長量的影響
        2.3 幾株優(yōu)良菌株在櫻花上的田間效應(yīng)
        2.4 幾株優(yōu)良菌株在東方杉上的田間效應(yīng)
            2.4.1 各菌劑對東方杉生長的影響
    3 結(jié)論與討論



本文編號：3820172