油桐(Vernicia fordii)屬于大戟科(Euphorbiaceae),為多年生落葉木本油料作物,是我國(guó)熱帶和亞熱帶特有的經(jīng)濟(jì)林,同時(shí)也是生產(chǎn)生物柴油的重要原材料。油桐種子中含油量為50-60%,油脂中75%是α-酮烯酸(α-eleostearic acid),其決定了桐油的質(zhì)量。隨著能源危機(jī),在中國(guó)油桐作為重要的木本能源植物越來越受到關(guān)注。油桐為雌雄異花同株植物,花序?yàn)閳A錐狀聚傘花序,在當(dāng)年生的枝條頂端形成。在花序中,只有一個(gè)或幾個(gè)雌花生在花序主軸的中心或二級(jí)花序軸的頂端,周圍被雄花圍繞。雄花遠(yuǎn)遠(yuǎn)比雌花多,平均雌雄比為1:27,低產(chǎn)量嚴(yán)重制約了油桐產(chǎn)業(yè)花的發(fā)展。因此,為了改變油桐雌雄花比和提高油桐產(chǎn)量,研究油桐花發(fā)育、性別決定的過程及雌雄花性別決定相關(guān)基因的查找具有十分重要的意義,為下一步的遺傳育種提供理論依據(jù)。本研究主要內(nèi)容如下:1.油桐花發(fā)育1)油桐花芽物候期觀察(合肥),其分化的時(shí)間為每年的6月至7月底之間,分化周期從當(dāng)年的6月或7月至下年的4月份為止。因此根據(jù)物候?qū)W理論將油桐花芽分化分成6個(gè)時(shí)期:枝芽發(fā)育(bud development)、枝條伸長(zhǎng)(shoot elo...

【文章頁數(shù)】：162 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 油桐相關(guān)研究
    1.2 花發(fā)育過程
        1.2.1 開花決定
            1.2.1.1 光周期途徑
            1.2.1.2 春化途徑
            1.2.1.3 自主途徑
            1.2.1.4 赤霉素途徑
            1.2.1.5 開花調(diào)控途徑的整合
        1.2.2 花序分生組織和花分生組織的建立
        1.2.3 花器官的發(fā)育
        1.2.4 花分生組織活性維持和終止
    1.3 植物性別分化
        1.3.1 開花植物的性別表現(xiàn)
        1.3.2 單性花形成的發(fā)育階段和過程
        1.3.3 雌雄同株異花模式植物-玉米的性別決定機(jī)制
            1.3.3.1 玉米花的結(jié)構(gòu)
            1.3.3.2 玉米單性花的形成過程
            1.3.3.3 玉米性別分化突變體
            1.3.3.4 玉米雄蕊敗育的途徑
            1.3.3.5 玉米雌蕊敗育的途徑
    1.4 主要研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
第2章 油桐花發(fā)育形態(tài)學(xué)研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 材料
        2.1.2 試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 方法
        2.2.1 油桐花芽石蠟制片方法
        2.2.2 油桐花芽石蠟切片染色
        2.2.3 掃面電鏡制片的程序
        2.2.4 DAPI染色
        2.2.5 細(xì)胞凋亡的TUNEL檢測(cè)
        2.2.6 花器官長(zhǎng)度的測(cè)量
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        2.3.1 油桐花芽的物候期觀察
        2.3.2 油桐花器官發(fā)育過程
        2.3.3 雌雄花雄蕊發(fā)育的形態(tài)學(xué)觀察
        2.3.4 雌花雄蕊發(fā)育的細(xì)胞學(xué)觀察
    2.4 本章小結(jié)
第3章 油桐雌雄花轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 材料
        3.1.2 試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 油桐花芽RNA的提取與純化
        3.2.2 cDNA文庫的構(gòu)建及測(cè)序
        3.2.3 數(shù)據(jù)預(yù)處理和序列拼接
        3.2.4 數(shù)據(jù)庫注釋
        3.2.5 基因功能分類
        3.2.6 差異表達(dá)基因
        3.2.7 差異基因顯著性富集分析
        3.2.8 差異表達(dá)基因qRT-PCR驗(yàn)證
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.3.1 油桐雌、雄花總RNA質(zhì)量檢測(cè)
        3.3.2 文庫構(gòu)建質(zhì)檢結(jié)果
        3.3.3 測(cè)序質(zhì)控結(jié)果
        3.3.4 轉(zhuǎn)錄組原始數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析
        3.3.5 Unigene功能注釋
        3.3.6 Unigene功能分類
            3.3.6.1 Unigene G0分類
            3.3.6.2 Unigenes KEGG分類
        3.3.7 Unigene差異表達(dá)分析
            3.3.7.1 差異表達(dá)基因(DEGs)的結(jié)果
            3.3.7.2 差異表達(dá)基因的G0富集分析
        3.3.8 油桐雌、雄花特異性差異表達(dá)激素相關(guān)的基因分析
        3.3.9 油桐雌、雄花特異性差異表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)的基因分析
        3.3.10 油桐雌花花分生組織相關(guān)的差異基因
    3.4 本章小結(jié)
第4章 油桐雌雄花蛋白質(zhì)組學(xué)差異分析
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 材料
        4.1.2 試劑
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 油桐花芽蛋白質(zhì)的提取
        4.2.2 蛋白質(zhì)的定量
        4.2.3 第一向等電聚焦電泳(IEF)
        4.2.4 膠條平衡
        4.2.5 灌SDS-PAGE凝膠
        4.2.6 第二向SDS-PAGE電泳
        4.2.7 2-D膠蛋白質(zhì)點(diǎn)的檢測(cè)
        4.2.8 凝膠掃描
        4.2.9 凝膠電泳圖譜分析
        4.2.10 蛋白質(zhì)譜檢測(cè)
        4.2.11 熒光定量PCR
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 二維電泳圖譜分析
        4.3.2 差異蛋白的分析
        4.3.3 差異蛋白鑒定
        4.3.4 雄花特異表達(dá)蛋白
        4.3.5 雌花特異表達(dá)蛋白
    4.4 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄1 TUNEL檢測(cè)溶液的配置
    附錄2 油桐雌、雄花差異表達(dá)基因
    附錄3 雌花差異基因G0富集分析
    附錄4 雄花差異基因G0富集分析
    附錄5 蛋白質(zhì)提取溶液配制
    附錄6 二維電泳溶液配制
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果



本文編號(hào)：3813564