毛白楊基因組DNA甲基化遺傳圖譜構(gòu)建與甲基化位點(diǎn)功能解析
發(fā)布時(shí)間:2023-04-11 01:41
表觀遺傳修飾是指不涉及基因組DNA序列的改變、能夠引起可遺傳表型變異的遺傳物質(zhì)的改變,主要形式包括:DNA共價(jià)修飾、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑和非編碼RNA的調(diào)控。其中,基因組DNA甲基化是一種非常普遍的DNA共價(jià)修飾形式,在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)基因的表達(dá)發(fā)揮著重要的調(diào)控作用,其作用機(jī)理正在被逐漸揭開(kāi)。本研究以來(lái)自9個(gè)不同種源的毛白楊種質(zhì)資源庫(kù)432株不同基因型個(gè)體、毛白楊10個(gè)不同組織或器官以及銀腺楊×毛白楊雜交子F1代群體552株不同基因型個(gè)體為材料,利用MSAP技術(shù)對(duì)其基因組DNA甲基化的遺傳變異及其遺傳效應(yīng)進(jìn)行研究。主要獲得以下結(jié)論:1.毛白楊種質(zhì)資源庫(kù)432株不同基因型個(gè)體成熟木質(zhì)部基因組DNA總甲基化相對(duì)水平(6.22%-22.40%,平均12.60±2.51%)高于未甲基化相對(duì)水平(6.19%-15.77%,平均 11.21±1.52%),全甲基化相對(duì)水平(3.10%-15.10,平均 6.31 ± 1.79%)高于半甲基化相對(duì)水平(2.86%-12.87%,平均6.29± 1.75%)。10個(gè)不同組織或器官未甲基化相對(duì)水平均值為36.17%,高于其總...
【文章頁(yè)數(shù)】:165 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 表觀遺傳學(xué)
1.1.1 表觀遺傳學(xué)的定義
1.1.2 表觀遺傳修飾模式
1.2 DNA甲基化共價(jià)修飾
1.2.1 DNA甲基化修飾的機(jī)制
1.2.2 DNA甲基化修飾的生物學(xué)作用
1.3 植物DNA甲基化研究
1.3.1 植物DNA甲基化模式產(chǎn)生機(jī)制
1.3.2 植物DNA甲基化的維持機(jī)制
1.4 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
2 毛白楊種質(zhì)資源庫(kù)基因組DNA甲基化表觀遺傳變異與效應(yīng)分析
2.1 材料與方法
2.1.1 植物材料
2.1.2 表型性狀測(cè)定
2.1.3 基因組DNA提取與檢測(cè)
2.1.4 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性(MSAP)分析
2.1.5 群體表觀遺傳結(jié)構(gòu)分析
2.1.6 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀的關(guān)聯(lián)分析
2.1.7 重要關(guān)聯(lián)位點(diǎn)測(cè)序分析
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性條帶
2.2.2 甲基化/未甲基化類型及相對(duì)水平
2.2.3 毛白楊基因組遺傳和表觀遺傳多樣性
2.2.4 毛白楊群體分化和表觀遺傳結(jié)構(gòu)
2.2.5 毛白楊種質(zhì)資源庫(kù)表型性狀變異與相關(guān)性分析
2.2.6 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀關(guān)聯(lián)分析
2.2.7 候選基因表達(dá)和功能分析
2.2.8 不同甲基化模式對(duì)候選基因表達(dá)和表型性狀的影響效應(yīng)分析
2.3 討論
2.3.1 毛白楊基因組DNA甲基化變異
2.3.2 基因組DNA甲基化修飾的遺傳效應(yīng)
2.4 小結(jié)
3 毛白楊不同組織DNA胞嘧啶甲基化變異研究
3.1 材料與方法
3.1.1 植物材料
3.1.2 基因組DNA和RNA提取
3.1.3 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性(MSAP)分析
3.1.4 多態(tài)性片段克隆測(cè)序
3.1.5 基因甲基化特異性計(jì)算
3.1.6 Real-Time qRT-PCR
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 毛白楊不同組織和器官整體甲基化模式
3.2.2 甲基化位點(diǎn)的組織或器官特異性和動(dòng)態(tài)變化
3.2.3 組織或器官間多態(tài)性片段測(cè)序分析
3.2.4 基因表達(dá)與甲基化的相關(guān)性
3.2.5 維管組織中不同甲基化的木材品質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)模式
3.3 討論
3.3.1 不同組織和器官類型間DNA胞嘧啶甲基化模式的變異
3.3.2 基因表達(dá)水平受DNA胞嘧啶甲基化影響
3.3.3 木材品質(zhì)相關(guān)基因的甲基化
3.4 小結(jié)
4 毛白楊表觀遺傳連鎖圖譜構(gòu)建與表觀QTL分析
4.1 材料與方法
4.1.1 植物材料和基因組DNA提取
4.1.2 表型性狀的測(cè)定
4.1.3 基因組DNA甲基化分析及表觀基因型分型
4.1.4 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀的關(guān)聯(lián)分析
4.1.5 表觀遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
4.1.6 QTL分析
4.1.7 特異甲基化片段的測(cè)序分析
4.1.8 候選基因成熟木質(zhì)部表達(dá)分析(Real-Time qRT-PCR)
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 表型性狀的變異與相關(guān)性分析
4.2.2 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性條帶與甲基化/未甲基化相對(duì)水平
4.2.3 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀單標(biāo)記關(guān)聯(lián)分析
4.2.4 表觀遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
4.2.5 重要表型性狀的表觀QTL(QTLepi)分析
4.2.6 候選基因的影響效應(yīng)分析
4.3 討論
4.3.1 基因組DNA甲基化相對(duì)水平
4.3.2 表觀遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建和表觀QTL分析
4.3.3 表觀遺傳修飾的遺傳效應(yīng)
4.4 小結(jié)
5 研究結(jié)論
附表
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
致謝
本文編號(hào):3789096
【文章頁(yè)數(shù)】:165 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
引言
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 表觀遺傳學(xué)
1.1.1 表觀遺傳學(xué)的定義
1.1.2 表觀遺傳修飾模式
1.2 DNA甲基化共價(jià)修飾
1.2.1 DNA甲基化修飾的機(jī)制
1.2.2 DNA甲基化修飾的生物學(xué)作用
1.3 植物DNA甲基化研究
1.3.1 植物DNA甲基化模式產(chǎn)生機(jī)制
1.3.2 植物DNA甲基化的維持機(jī)制
1.4 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
2 毛白楊種質(zhì)資源庫(kù)基因組DNA甲基化表觀遺傳變異與效應(yīng)分析
2.1 材料與方法
2.1.1 植物材料
2.1.2 表型性狀測(cè)定
2.1.3 基因組DNA提取與檢測(cè)
2.1.4 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性(MSAP)分析
2.1.5 群體表觀遺傳結(jié)構(gòu)分析
2.1.6 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀的關(guān)聯(lián)分析
2.1.7 重要關(guān)聯(lián)位點(diǎn)測(cè)序分析
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性條帶
2.2.2 甲基化/未甲基化類型及相對(duì)水平
2.2.3 毛白楊基因組遺傳和表觀遺傳多樣性
2.2.4 毛白楊群體分化和表觀遺傳結(jié)構(gòu)
2.2.5 毛白楊種質(zhì)資源庫(kù)表型性狀變異與相關(guān)性分析
2.2.6 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀關(guān)聯(lián)分析
2.2.7 候選基因表達(dá)和功能分析
2.2.8 不同甲基化模式對(duì)候選基因表達(dá)和表型性狀的影響效應(yīng)分析
2.3 討論
2.3.1 毛白楊基因組DNA甲基化變異
2.3.2 基因組DNA甲基化修飾的遺傳效應(yīng)
2.4 小結(jié)
3 毛白楊不同組織DNA胞嘧啶甲基化變異研究
3.1 材料與方法
3.1.1 植物材料
3.1.2 基因組DNA和RNA提取
3.1.3 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性(MSAP)分析
3.1.4 多態(tài)性片段克隆測(cè)序
3.1.5 基因甲基化特異性計(jì)算
3.1.6 Real-Time qRT-PCR
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 毛白楊不同組織和器官整體甲基化模式
3.2.2 甲基化位點(diǎn)的組織或器官特異性和動(dòng)態(tài)變化
3.2.3 組織或器官間多態(tài)性片段測(cè)序分析
3.2.4 基因表達(dá)與甲基化的相關(guān)性
3.2.5 維管組織中不同甲基化的木材品質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)模式
3.3 討論
3.3.1 不同組織和器官類型間DNA胞嘧啶甲基化模式的變異
3.3.2 基因表達(dá)水平受DNA胞嘧啶甲基化影響
3.3.3 木材品質(zhì)相關(guān)基因的甲基化
3.4 小結(jié)
4 毛白楊表觀遺傳連鎖圖譜構(gòu)建與表觀QTL分析
4.1 材料與方法
4.1.1 植物材料和基因組DNA提取
4.1.2 表型性狀的測(cè)定
4.1.3 基因組DNA甲基化分析及表觀基因型分型
4.1.4 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀的關(guān)聯(lián)分析
4.1.5 表觀遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
4.1.6 QTL分析
4.1.7 特異甲基化片段的測(cè)序分析
4.1.8 候選基因成熟木質(zhì)部表達(dá)分析(Real-Time qRT-PCR)
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 表型性狀的變異與相關(guān)性分析
4.2.2 甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性條帶與甲基化/未甲基化相對(duì)水平
4.2.3 多態(tài)性MSAP標(biāo)記與表型性狀單標(biāo)記關(guān)聯(lián)分析
4.2.4 表觀遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建
4.2.5 重要表型性狀的表觀QTL(QTLepi)分析
4.2.6 候選基因的影響效應(yīng)分析
4.3 討論
4.3.1 基因組DNA甲基化相對(duì)水平
4.3.2 表觀遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建和表觀QTL分析
4.3.3 表觀遺傳修飾的遺傳效應(yīng)
4.4 小結(jié)
5 研究結(jié)論
附表
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
致謝
本文編號(hào):3789096
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