銀杏童期及花芽分化階段過長(zhǎng),極大的阻礙了對(duì)其開花調(diào)控的研究,因此從分子層面揭示銀杏年齡途徑調(diào)控開花的機(jī)理尤為重要。本研究以銀杏幼年、開花一年、開花多年的莖端/花芽為實(shí)驗(yàn)材料,利用高通量測(cè)序技術(shù)與生物信息學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法,鑒定和分析了銀杏三個(gè)年齡階段調(diào)控開花的重要基因和miRNA,并構(gòu)建了銀杏年齡途徑調(diào)控開花網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)圖。主要研究結(jié)果如下:(1)利用高通量測(cè)序技術(shù),構(gòu)建了 9個(gè)小RNA文庫(kù),共得到151.46M Clean Reads,各樣品不少于13.34MClean Reads,Q30均在98%左右。從小RNA文庫(kù)中共鑒定出了 594個(gè)miRNA,已知miRNA89個(gè),新預(yù)測(cè)miRNA505個(gè),其中286個(gè)miRNA鑒定到隸屬于97個(gè)miRNA家族。使用TargetFinder軟件對(duì)miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè),結(jié)果顯示,共預(yù)測(cè)到12762個(gè)靶基因,其中11210個(gè)靶基因從數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得注釋信息。(2)對(duì)miRNA的差異表達(dá)進(jìn)行分析,共篩選出30個(gè)具有顯著表達(dá)差異的miRNA。利用 GO(Gene Ontology)富集分析以及 KEGG(Kyoto Encyclopediaof Gene...

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 銀杏
        1.1.1 銀杏的起源與演化
        1.1.2 銀杏雌雄花芽分化
        1.1.3 銀杏開花研究進(jìn)展
    1.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的發(fā)展及應(yīng)用
        1.2.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)的發(fā)展歷程
        1.2.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的應(yīng)用
    1.3 植物microRNA
        1.3.1 植物miRNA的發(fā)現(xiàn)及其分布
        1.3.2 植物miRNA的生物學(xué)合成機(jī)制
        1.3.3 植物miRNA作用機(jī)理
        1.3.4 miRNA的分離及靶基因預(yù)測(cè)
        1.3.5 miRNA在植物中的調(diào)控作用
    1.4 研究目的及意義
第二章 銀杏年齡途徑調(diào)控開花的miRNA測(cè)序分析
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料與處理
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器與試劑
    2.2 方法
        2.2.1 小RNA的提取
        2.2.2 small RNA文庫(kù)構(gòu)建及質(zhì)控
        2.2.3 small RNA測(cè)序
        2.2.4 small RNA測(cè)序數(shù)據(jù)分析
        2.2.5 熒光定量驗(yàn)證
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 測(cè)序基本數(shù)據(jù)分析
        2.3.2 miRNA的鑒定及靶基因預(yù)測(cè)
        2.3.3 miRNA家族分析
        2.3.4 miRNA差異表達(dá)分析
        2.3.5 差異表達(dá)miRNA靶基因的預(yù)測(cè)及其功能注釋分析
        2.3.6 參與開花調(diào)控的miRNA及靶基因分析
        2.3.7 差異表達(dá)miRNA熒光定量驗(yàn)證
    2.4 小結(jié)
第三章 銀杏年齡途徑調(diào)控開花的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
    3.1 材料
        3.1.1 植物材料與處理
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器與試劑
    3.2 方法
        3.2.1 總RNA提取
        3.2.2 cDNA文庫(kù)構(gòu)建及質(zhì)控
        3.2.3 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
        3.2.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 銀杏莖端/花芽轉(zhuǎn)錄組分析概況
        3.3.2 銀杏Unigene功能注釋
        3.3.3 銀杏Unigene的GO富集分析
        3.3.4 銀杏開花調(diào)控年齡途徑差異表達(dá)基因篩選
        3.3.5 參與銀杏年齡途徑開花調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子分析
    3.4 銀杏開花年齡途徑調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
    3.5 小結(jié)
第四章 結(jié)論和展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    4.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄A 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3767519