超低溫保存目前被認(rèn)為是非正常性種子長期保存最理想的方式。珙桐（Davidia involucrata Baill）是中國特有的瀕危孑遺植物,其種子同時(shí)具有頑拗性和休眠特性,自然條件下萌發(fā)困難且活力保持時(shí)間短,實(shí)現(xiàn)其種質(zhì)的長期保存具有重要意義。本研究以珙桐離體胚軸為研究對(duì)象,利用變色硅膠對(duì)其進(jìn)行適當(dāng)?shù)目焖倜撍幚砗笸度胍旱４?保存一定時(shí)間后解凍并通過組培方法檢測存活率;在成功實(shí)現(xiàn)超低溫保存后,還通過相對(duì)電導(dǎo)率測定、主要抗氧化酶活性測定等常規(guī)植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn),以及蛋白質(zhì)組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)對(duì)其脫水耐性和低溫耐性的生理機(jī)制進(jìn)行了探討,主要結(jié)果如下:（1）珙桐離體胚軸能耐受一定程度的脫水,并且適當(dāng)脫水后的離體胚軸能夠耐受液氮低溫實(shí)現(xiàn)超低溫保存。脫水至10.7±0.2%含水量時(shí)的存活率為55%,投入液氮保存后的存活率可達(dá)35%。（2）3 h的硅膠快速脫水及其隨后的超低溫保存對(duì)脂質(zhì)過氧化無顯著性影響。（3）3 h的硅膠快速脫水不會(huì)導(dǎo)致珙桐離體胚軸電解質(zhì)發(fā)生顯著滲漏,但隨后的超低溫保存則會(huì)大大增加電解質(zhì)滲漏。（4）珙桐離體胚軸中的抗氧化酶系統(tǒng)對(duì)3 h的硅膠快速脫水及其隨后的超低溫保存具有不同的響應(yīng)機(jī)制... 

【文章來源】：湖北民族大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

活性氧清除的酶和非酶機(jī)制(修改自Coweyetal.,1985;Gillespie,2010)

2 材料與方法2.8 差異表達(dá)蛋白分析差異表達(dá)蛋白鑒定及分析是交由具有專業(yè)鑒定及分析能力的華大基因進(jìn)行分析體實(shí)驗(yàn)方法及步驟如下。2.8.1 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析考慮到珙桐目前沒有可用的全基因組測序信息，為了增加蛋白質(zhì)組學(xué)分析時(shí)蛋定率，特設(shè)置了轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析實(shí)驗(yàn)。轉(zhuǎn)錄組組裝步驟如下（圖 2-1）：

體胚軸在脫水過程中含水量的變化。ges of moisture content in excised embryonic axes from Davidia invration. 可知，新采收的成熟珙桐離體胚軸通過組培的成苗率高達(dá) 81%培成苗率下降，脫水 3 h 后的組培成苗率為 55%，脫水 4 h 后水 3 h 后超低溫保存的組培成苗率為 35%，且皆為正常幼苗 (圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]四川小涼山珙桐更新及種群穩(wěn)定性研究[J]. 雷妮婭,陳勇,李俊清,唐曉軍.  北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(01)
[2]珍稀瀕危植物珙桐不同采收期的種子特性研究[J]. 王偉偉,蘇智先,胡進(jìn)耀,雷濘菲,朱利君,張亞爽.  廣西植物. 2006(02)
[3]珙桐外中果皮對(duì)貯藏種子生活力的影響[J]. 范川,李賢偉,鮮俊仁,陳小紅.  四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(04)
[4]菠菜種子超干貯藏后抗老化作用的生理特性[J]. 李玉紅,陳鵬,王綺,關(guān)志華,程智慧.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2005(08)
[5]湖北七姊妹山珙桐種群結(jié)構(gòu)研究[J]. 馬宇飛,李俊清.  北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2005(03)
[6]天然珙桐群體的RAPD標(biāo)記遺傳多樣性研究[J]. 宋叢文,包滿珠.  林業(yè)科學(xué). 2004(04)
[7]珙桐（Davidia involucrata Baill）木材導(dǎo)管壁的細(xì)微結(jié)構(gòu)特征[J]. 戴大臨,文藝.  電子顯微學(xué)報(bào). 2003(06)
[8]珙桐葉中的黃酮甙成分[J]. 歐陽明安,周劍寧.  廣西植物. 2003(06)
[9]宣恩七姊妹山珙桐群落種間聯(lián)結(jié)分析[J]. 胡理樂,李新,江明喜,黃漢東,滿金山,蘇長江.  武漢植物學(xué)研究. 2003(03)
[10]光葉珙桐的等位酶分析及其生物地理學(xué)意義[J]. 彭玉蘭,胡運(yùn)乾,孫航.  云南植物研究. 2003(01)

博士論文
[1]敖漢苜蓿小花與種子響應(yīng)硼脅迫的蛋白質(zhì)組學(xué)與代謝組學(xué)分析[D]. 陳玲玲.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]桃葉衛(wèi)矛超低溫保存及其效果分析[D]. 李萬義.東北林業(yè)大學(xué) 2017
[2]珙桐種子在萌發(fā)過程中的蛋白質(zhì)組學(xué)分析[D]. 雷蕾.湖北民族學(xué)院 2016
[3]沙芥種子脫水耐性的研究[D]. 孔德娟.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]三個(gè)針葉樹種種子玻璃與超低溫保存研究[D]. 楊學(xué)軍.南京林業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3619725