油茶炭疽病（Camellia oleifera anthracnose）是油茶主要病害之一,嚴重影響油茶品質(zhì)和產(chǎn)量。我們研究發(fā)現(xiàn)其主要的病原菌不止膠孢炭疽菌一種,其中新病原果生刺盤孢菌Colletotrichum fructicola分布廣泛、危害嚴重。本文開展了油茶炭疽病新病原果生刺盤孢菌鑒定和群體遺傳結(jié)構(gòu)的分析；利用油茶內(nèi)生拮抗細菌Y13對C. fructicola進行盆栽苗防效實驗；利用綠色熒光蛋白基因標記誘變后的優(yōu)良油茶內(nèi)生拮抗細菌Y13uv,研究其在油茶體內(nèi)的定殖動態(tài)。主要研究成果如下：（1）基于多基因系統(tǒng)發(fā)育分析的油茶新炭疽病原鑒定。對來自我國6個省市的油茶炭疽病樣本進行病原菌分離,通過形態(tài)學特征結(jié)合多基因譜系分析法構(gòu)建系了統(tǒng)發(fā)育樹。分離到能引起油茶葉炭疽病的病原菌共23株。多基因系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果表明,這23株病原菌與模式菌株ICMP18581在內(nèi)的所有果生刺盤孢菌C. fructicola菌株序列聚為一個進化支,置信度高達100%。由此確定這23株病原菌為果生刺盤孢菌C.fructicola。（2）新炭疽病原果生刺盤孢菌C. fructicola群體遺傳結(jié)構(gòu)分析。對來自我國... 

【文章來源】：中南林業(yè)科技大學湖南省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１回接實驗油茶葉片炭痕病病斑??ａ：自然發(fā)病癥狀；ｂ：接種發(fā)病癥狀??

?０?５?１０?１５?２０??Ｐａｉｒｗｉｓｅ?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ??圖３．３?Ｃ如ｗｃ仇群體核昔酸不配對分布??Ｆｉｇ?３．３?Ｍｉｓｍａｔｃｈ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏ打?ｏｆ?Ｃ方ｗｃ／ｚ．ｃｏ／ａ?ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．巨ｘｐ?ｓｔａｎｄｓ?ｆｏｒ?ｅｘｐｅｃ巧ｄ?ｖａｌｕｅ．?ｓｔａｎｄｓ?ｆｏｒ?ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｖａｌｕｅ．??５基于ＩＴＳ序列的系統(tǒng)發(fā)育分析??我們從ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中選擇刺盤抱屬不同種的１０條Ｉ與實驗推導出的１３種不同單倍型序列（Ｈ１－Ｈ１３）構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹圖３．表明，在系統(tǒng)樹中沒有發(fā)現(xiàn)同一個地區(qū)的單倍型能聚在一起，而是散亂系統(tǒng)樹中，說明其間存在有效基因流，部分地理種群雖然各自具有獨特，但各單倍型的差異不大。從系統(tǒng)發(fā)育樹中，我們還可Ｗ看出，１３種列與?ＧｅｎＢａ址中?Ｃ／ｒｗｃ化〇／口（ＪＸ０１０１７７、ＪＸ０１０１８１、ＪＸ０１０１７３、ＪＸ０１０１００％的置信度聚為一支，由此也驗證了我們分離的１４５個菌株都為果生。??ＪＸ０１０１。。ｆｒｕｒｆｋｏ／＊??—Ｈ９??

通過連續(xù)稀釋轉(zhuǎn)接培養(yǎng)，巧光質(zhì)粒隨著轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加，培養(yǎng)時間的延長，??質(zhì)粒不斷地從Ｙ１３ＵＶ－ＧＦＰ菌體細胞中丟失，巧光蛋白標記菌在總茜落群體中數(shù)??量比例漸漸下降；無選擇壓力條件下轉(zhuǎn)接培養(yǎng)５化后的穩(wěn)定性可達７２％（圖４．２）。??芽抱桿菌在實驗室適宜條件下大約２０?ｍｉｎ分裂一代，而其在自然條件下分裂一??代所需時間為５０？１００ｈ［８３］。結(jié)果表明標記菌株Ｙ１３ＵＶ－ＧＦＰ有較強的遺傳穩(wěn)定性，??可用于檢測其在油茶體內(nèi)的定殖動態(tài)。??腳「??一鄕．＂一￣＂？一??復跑－?？??Ｉ?６０?－??誰??為姍－??柩??２０?－??Ｑ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ???，?Ｉ??１２?３?４５６７８９?１０??轉(zhuǎn)轄次數(shù)（５?ｈ／次〉??圖４．２Ｙ１３ＵＶ－ＧＦＰ的質(zhì)粒穩(wěn)定性檢測??Ｆｉｇ?４．２?Ｐｌａｓｍｉｄ?ｓｔａｂｉｌｉｔｙ?ｄ別ｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?化６?Ｙ１３ＵＶ－ＧＦＰ?ｓｔｒａｉｎｓ??３２??

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3593630