氣孔是植物表皮由兩個保衛(wèi)細胞圍繞形成的小孔,在調節(jié)植物光合固碳和水分散失的平衡方面影響頗大。氣孔的發(fā)生是一種復雜的生物學過程,受多種基因所調控。氣孔的發(fā)育不但可以影響植物的生長,也關系到植物應對環(huán)境脅迫的能力。目前,已有一些報道發(fā)現(xiàn)miRNA可以參與到氣孔的發(fā)生過程,但其分子作用機制仍然不是很清晰。本研究旨在初步闡明大青楊miR172調控氣孔發(fā)育響應干旱脅迫的分子機理。利用生物化學、分子生物學和基因工程等手段對大青楊Pu-miR172d及其靶基因PuGTL1的分子功能進行了分析鑒定。（1）小RNA轉錄組數(shù)據(jù)中靶基因預測結果發(fā)現(xiàn)Trihelix基因家族成員PuGTL1是Pu-miR172d的靶基因。利用5’RLM-RACE技術及農桿菌瞬時轉化實驗驗證了 PuGTL1確實為Pu-miR172d的靶基因。首次在大青楊中發(fā)現(xiàn)了Pu-miR 72可以結合Trihelix家族的轉錄因子;（2）利用生物信息學方法和qRT-PCR技術對毛果楊Trihelix轉錄因子家族進行初步的分類及功能鑒定。Trihelix家族由56個成員構成,可分為五個亞族。其中,大多數(shù)基因都可以響應滲透脅迫。exImage分析... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：163 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－２三個時期花芽相對于葉芽和莖尖的表達水平??Ｘ軸表示?

圖２－３?ｍｉＲＮＡ的聚類分析??

通過ｑＲＴ－ＰＣＲ分析了?６個直接或間接與開花相關的ｍｉＲＮＡ，這里同樣以葉芽和??莖尖作為對照組。在這些ｍｉＲＮＡ中，和？ｍ７？７７７ｅ上調表達，而ｍｉＲ１５６ｅ、??和下調（如圖２－５）。的表達水平隨著花芽發(fā)育而逐漸??增加。盡管ｗ認在花芽發(fā)育中與對照相比表達量下調，但是仍然具有上升??的趨勢。總的結果與聚類分析相一致，因此證明了本研宄數(shù)據(jù)結果的可信性較??高。??＾?＾?＾?、?ｍｉＲ１６４ｓ?〇?ＥＢｉ（ｔＩ６４ａ?＾?，?？ｔＲｌ?６？ｆ??ｉ＾ｉ?ｙ．，，?ｉ?Ｊ?ｉ?１１?ｉｊｌ?§?１１１１１１?ｉ?ｎｉｌ??ｍｒｍｍｍｄ?＞ｎ．ｉ．ｉｉ?????■ｎＷＭｌ?？?ｉ＿＿．ｉｌ?ｔｉｉｎ．１????ｉｌｌ．?■?—??ａ?ｎｕＲ�。叮浚�?ｂ?？ｉＲ］６?辦?＾?？ｔｉＲ３９３ａ?ａ?ｍｉＨ３９３Ａ?？?ｉｎｌＫｌＴｌｅ??ｂｊ?Ｉ?一？｝：Ｌ」＂?ｊＵＬｌ?］ｊ?１１１??？?｜＿－?Ｉ?ｉ?■?ｒ?＆ｍｍ?ｎ?Ｉ：?ｈＭＭ?＿?■？?Ｉ：?＊?＿＊１?ＭＭ３?ＭＢｒｉｌ?Ｈ?？ｎ?Ｉ?？—＿ｌ１?＿?？ｌ??圖２－５六個花芽發(fā)育相關ｍｉＲＮＡ的ｑＲＴ－ＰＣＲ驗證??５．８Ｓ?ｒＲＮＡ作為ｑＲＴ－ＰＣＲ的內參。實驗進行三次生物重復。??Ｆｉｇ．２－５?ＱＲＴ－ＰＣＲ?ｏｆ?ｓｉｘ?ｆｌｏｗｅｒ－ｒｅｌａｔｅｄ?ｍｉＲＮＡｓ

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3552303