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Pu-miR172d調(diào)控大青楊氣孔發(fā)育響應(yīng)干旱脅迫的機(jī)理研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-25 10:40
  氣孔是植物表皮由兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞圍繞形成的小孔,在調(diào)節(jié)植物光合固碳和水分散失的平衡方面影響頗大。氣孔的發(fā)生是一種復(fù)雜的生物學(xué)過程,受多種基因所調(diào)控。氣孔的發(fā)育不但可以影響植物的生長,也關(guān)系到植物應(yīng)對環(huán)境脅迫的能力。目前,已有一些報(bào)道發(fā)現(xiàn)miRNA可以參與到氣孔的發(fā)生過程,但其分子作用機(jī)制仍然不是很清晰。本研究旨在初步闡明大青楊miR172調(diào)控氣孔發(fā)育響應(yīng)干旱脅迫的分子機(jī)理。利用生物化學(xué)、分子生物學(xué)和基因工程等手段對大青楊Pu-miR172d及其靶基因PuGTL1的分子功能進(jìn)行了分析鑒定。(1)小RNA轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中靶基因預(yù)測結(jié)果發(fā)現(xiàn)Trihelix基因家族成員PuGTL1是Pu-miR172d的靶基因。利用5’RLM-RACE技術(shù)及農(nóng)桿菌瞬時(shí)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了 PuGTL1確實(shí)為Pu-miR172d的靶基因。首次在大青楊中發(fā)現(xiàn)了Pu-miR 72可以結(jié)合Trihelix家族的轉(zhuǎn)錄因子;(2)利用生物信息學(xué)方法和qRT-PCR技術(shù)對毛果楊Trihelix轉(zhuǎn)錄因子家族進(jìn)行初步的分類及功能鑒定。Trihelix家族由56個(gè)成員構(gòu)成,可分為五個(gè)亞族。其中,大多數(shù)基因都可以響應(yīng)滲透脅迫。exImage分析... 

【文章來源】:東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:163 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

Pu-miR172d調(diào)控大青楊氣孔發(fā)育響應(yīng)干旱脅迫的機(jī)理研究


圖2-2三個(gè)時(shí)期花芽相對于葉芽和莖尖的表達(dá)水平??X軸表示?

Pu-miR172d調(diào)控大青楊氣孔發(fā)育響應(yīng)干旱脅迫的機(jī)理研究


圖2-3?miRNA的聚類分析??

花芽發(fā)育,內(nèi)參


通過qRT-PCR分析了?6個(gè)直接或間接與開花相關(guān)的miRNA,這里同樣以葉芽和??莖尖作為對照組。在這些miRNA中,和?m7?777e上調(diào)表達(dá),而miR156e、??和下調(diào)(如圖2-5)。的表達(dá)水平隨著花芽發(fā)育而逐漸??增加。盡管w認(rèn)在花芽發(fā)育中與對照相比表達(dá)量下調(diào),但是仍然具有上升??的趨勢?偟慕Y(jié)果與聚類分析相一致,因此證明了本研宄數(shù)據(jù)結(jié)果的可信性較??高。??^?^?^?、?miR164s?〇?EBi(tI64a?^?,??tRl?6?f??i^i?y.,,?i?J?i?11?ijl?§?111111?i?nil??mrmmmd?>n.i.ii?????■nWMl???i__.il?tiin.1????ill.?■?—??a?nuR。叮浚?b??iR]6?辦?^??tiR393a?a?miH393A???inlKlTle??bj?I?一?}:L」"?jULl?]j?111????|_-?I?i?■?r?&mm?n?I:?hMM?_?■??I:?*?_*1?MM3?MBril?H??n?I??—_l1?_??l??圖2-5六個(gè)花芽發(fā)育相關(guān)miRNA的qRT-PCR驗(yàn)證??5.8S?rRNA作為qRT-PCR的內(nèi)參。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行三次生物重復(fù)。??Fig.2-5?QRT-PCR?of?six?flower-related?miRNAs

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[4]植物C2H2型鋅指蛋白的結(jié)構(gòu)與功能[J]. 黃驥,王建飛,張紅生.  遺傳. 2004(03)
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本文編號(hào):3552303

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