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馬尾松磷轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PmMYB的克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-11-23 14:31
  磷是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的營(yíng)養(yǎng)元素,同時(shí)也作為限制農(nóng)林生產(chǎn)的關(guān)鍵因素。土壤有效磷的匱乏,嚴(yán)重制約林業(yè)產(chǎn)量的提升,發(fā)掘與利用植物耐低磷相關(guān)基因,創(chuàng)制磷高效利用新種質(zhì)是解決上述問(wèn)題最佳途徑。馬尾松作為我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)樹(shù)種,在農(nóng)林經(jīng)濟(jì)上有著重要的價(jià)值,南方土壤有效磷缺乏嚴(yán)重影響馬尾松的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量,因此挖掘低磷脅迫響應(yīng)的關(guān)鍵基因具有重要的意義。在前期工作基礎(chǔ)上,本文以馬尾松耐低磷種質(zhì)為材料,利用RT-PCR與熒光定量PCR對(duì)低磷脅迫響應(yīng)MYB轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行篩選,采用RACE方法克隆了應(yīng)答低磷脅迫的MYB轉(zhuǎn)錄因子(PmMYB169)全長(zhǎng)序列,并進(jìn)一步探討其時(shí)空表達(dá)特性,在此基礎(chǔ)上,構(gòu)建了表達(dá)載體。研究結(jié)果對(duì)深入理解馬尾松耐低磷的分子機(jī)制,以及通過(guò)基因工程創(chuàng)制耐低磷新種質(zhì)具有重要意義。主要研究結(jié)果如下:1.采用RT-PCR方法,從3種內(nèi)參基因(UBC、GAPDH和18s rRNA)中篩選出最適合的內(nèi)參基因UBC與GAPDH。通過(guò)RT-PCR與熒光定量PCR相結(jié)合的方式,從基因表達(dá)水平上闡述了4個(gè)MYB轉(zhuǎn)錄因子在低磷脅迫中表達(dá)情況。MYB158在整個(gè)低磷脅迫中表達(dá)量持續(xù)下調(diào);MYB233和MYB312在低磷... 

【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

馬尾松磷轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子PmMYB的克隆及功能分析


PmMYB169蛋白結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)

氨基酸序列,多重序列,對(duì)比分析,植物


47圖 3-5 不同植物 MYB 氨基酸序列的多重序列對(duì)比分析Fig. 3-5 Multiple alignment of predicted amino acid sequences of MYB from different plants根據(jù)預(yù)測(cè)的 MYB 結(jié)構(gòu)域,將保守結(jié)構(gòu)域部分進(jìn)行再比對(duì),結(jié)果顯示,PmMYB169 與北美云杉(Picea sitchensis ABR16467.1)結(jié)構(gòu)域區(qū)域同源性最高,

氨基酸序列,氨基酸序列,植物,基因


貴州大學(xué) 2016 屆碩士研究生學(xué)位論文可達(dá)到 87.88%,與楊樹(shù)(Populus trichocarpa XP_002314515.1)、大豆(Glycinemax NP_001235865.1)、番茄(Solanum lycopersicum NP_001233975.1)、石榴(Punica granatum AJD79907.1)等 15 種植物 MYB 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)域同源性都在68%~73%,說(shuō)明馬尾松 PmMYB169 在 MYB 結(jié)構(gòu)域上保守性較高,在進(jìn)化過(guò)程中氨基酸的變化不大,可能在行使功能上具有一致性。保守結(jié)構(gòu)域中具有典型的HTH 結(jié)構(gòu)可與 DNA 區(qū)域相結(jié)合,表明可能具有轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]馬尾松纖維素合成酶基因PmCesA1的克隆及其分析[J]. 阮維程,潘婷,季孔庶.  分子植物育種. 2015(04)
[3]植物根系響應(yīng)低磷脅迫的機(jī)理研究[J]. 梁翠月,廖紅.  生命科學(xué). 2015(03)
[4]棉花轉(zhuǎn)錄因子基因GhMYB的克隆及特征分析[J]. 于月華,倪志勇,梁小莉,劉真芳,陳全家,高文偉.  棉花學(xué)報(bào). 2015(01)
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[6]棉花轉(zhuǎn)錄因子基因(GhMYB11)的克隆與表達(dá)分析[J]. 李菲,柳展基,王立國(guó),劉勤紅,劉任重.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2015(02)
[7]馬尾松CAD基因的克隆及其編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)[J]. 張逢凱,潘婷,盛璐,季孔庶.  分子植物育種. 2014(04)
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[10]用于通路(Gateway)克隆技術(shù)的植物表達(dá)載體研究進(jìn)展[J]. 肖素勤,孫振,軒秀霞,陳麗梅.  植物科學(xué)學(xué)報(bào). 2012(05)

碩士論文
[1]谷子轉(zhuǎn)錄因子基因SiNAC45與SiMYB9的克隆及功能驗(yàn)證[D]. 王二輝.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]大豆耐低磷轉(zhuǎn)錄因子GmPTF1與GmPHR1功能分析[D]. 吳冰.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]兩種苜蓿對(duì)低磷脅迫的響應(yīng)和生理適應(yīng)機(jī)制[D]. 高艷.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]馬尾松遺傳連鎖圖譜構(gòu)建[D]. 陳文霞.南京林業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào):3514077

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