GATA轉(zhuǎn)錄因子是一類廣泛存在于真核生物中的轉(zhuǎn)錄因子,在植物光響應(yīng)調(diào)控、細(xì)胞分裂素響應(yīng)以及碳、氮代謝等與次生生長相關(guān)的生物學(xué)過程中發(fā)揮重要作用。目前,對GATA家族的基因只局限于對其家族基因及其編碼蛋白基本特性的分析。前期研究中,利用生物信息學(xué)手段推測出GATA12參與植物次生生長。本文對毛果楊(GATA12在其次生生長中的生物學(xué)功能進(jìn)行初步的探討,主要結(jié)果如下。1.從毛果楊中克隆到擬南芥GATA12直系同源基因PtrGATA12全長cDNA序列,與毛果楊GATA家族的PtrGATA18.1和PtrGATAT1相似性到86%,將其命名為PtrGATA12。PtrGATA12編碼373個(gè)氨基酸、分子量為41397.57、等電點(diǎn)（PI）為6.04,且在260-310個(gè)氨基酸處具有GATA家族轉(zhuǎn)錄因子典型結(jié)構(gòu)域:存在C-X2-C-X17-20-C-X2-C鋅指結(jié)構(gòu)域。2.通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得7個(gè)過表達(dá)PtrG4T4A2轉(zhuǎn)基因毛果楊株系,對其中GATA12表達(dá)量最高的3個(gè)株系的表型進(jìn)行了連續(xù)觀測,結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因株系生長正常,表型與野生型無明顯差異,但在生長90天時(shí),PtrGATA12轉(zhuǎn)基因毛... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１木質(zhì)素合成相關(guān)功能基因??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎｖｏｌｖｅｄ?ｉｎ?ｌｉｇｎｉｎ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ??

圖２－１毛果楊ＲＮＡ??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??

?２?ｆｔｒＧＪＵ／２的克隆與表達(dá)分析???２．３．２?構(gòu)建?ｐＥＡＳＹＴＭ－ＢＩｕｎｔ－Ｐ＂?ＧＬ４７＞＾?載體以及克隆??將上述ＲＮＡ進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，以其為模板，以Ｐ／ｒＧ４７＾２－Ｆ／Ｒ為引物，進(jìn)行克隆，Ｐ電泳檢??測結(jié)果如圖２－２Ａ所示。將ＰＣＲ產(chǎn)物進(jìn)行膠回收，并與／７￡＾Ｓｙ？－Ｂｌｕｎｔ載體連接，轉(zhuǎn)化大腸??桿菌，菌液檢測結(jié)果如圖２－２Ｂ所示，選取正確位置的菌液送到生物公司測序，結(jié)果比對與毛??果洋網(wǎng)站數(shù)據(jù)一致，序列全長為１１２２?ｂｐ，將其命名為乃ｒＧＪＵＷ。??圖２－２?ＰＷ２４Ｚ４／２基因ＣＤＳ全長ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物及菌液ＰＣＲ檢測??Ａ：?／ＶＧ＾４７２基因編碼區(qū)全長的ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物；Ｂ：菌液ＰＣＲ檢測??Ｆｉｇ．２－２?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＰｔｒＡＴＧＡＴ１２?ｇｅｎｅ?ＣＤＳ?ａｎｄ?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｌｉｑｕｉｄ?ＰＣＲ?ｏｆ?Ｐｔｉ＜｝ＡＴＡ１２?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ??Ａ：?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＰｔｒＧＡＴＡ１２?ｇｅｎｅ?ＣＤＳ；?Ｂ：?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｌｉｑｕｉｄ?ＰＣＲ?ｏｆ?ＰｔｒＧＡＴＡ１２?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ??２．３．３?／ＶＫＺ４７＾７２的生物信息學(xué)分析??２．３．３．１?ＰｔｒＧＡＴＡＵ??通過尸／７＜＾及／２相關(guān)基因的理化性質(zhì)分析發(fā)現(xiàn)：蛋白的氧基酸總數(shù)位３７３，??且其分子量高達(dá)４１８０８．２９，等電點(diǎn)（ＰＩ）為６．０４，結(jié)構(gòu)式為ＣｍｓＨ＾ｏＮｓＭＯｗＳｗ，由５６４３個(gè)??原子組成，正、負(fù)電荷殘基數(shù)分別是３７與４７個(gè)，其他的ＧＡＴＡ家族成員的情況如下（表２－３）。??表２－３毛果楊Ｇ－４２：４基因概況??Ｔａｂ．２－３?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]植物次生細(xì)胞壁加厚調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 黃成,李來庚.  植物生理學(xué)報(bào). 2016(01)
[2]植物轉(zhuǎn)錄因子分類、預(yù)測和數(shù)據(jù)庫構(gòu)建[J]. 靳進(jìn)樸,郭安源,何坤,張禾,朱其慧,陳新,高歌,羅靜初.  生物技術(shù)通報(bào). 2015(11)
[3]香蕉枯萎病菌GATA轉(zhuǎn)錄因子基因Fnr1的克隆及序列分析[J]. 漆艷香,張欣,張賀,陸英,蒲金基,喻群芳,謝藝賢.  果樹學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]植物GRAS家族轉(zhuǎn)錄因子的研究現(xiàn)狀[J]. 李桂英,田玉富,楊成君.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(14)
[5]植物bHLH轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展[J]. 劉文文,李文學(xué).  生物技術(shù)進(jìn)展. 2013(01)
[6]沙冬青GATA型鋅指蛋白基因序列及表達(dá)分析[J]. 史軍娜,劉美芹,師靜,王艷萍,智冠華,陳玉珍,盧存福.  北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(03)
[7]植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J]. 楊穎,高世慶,唐益苗,冶曉芳,王永波,劉美英,趙昌平.  麥類作物學(xué)報(bào). 2009(04)
[8]鋅指蛋白結(jié)構(gòu)及功能研究進(jìn)展[J]. 趙楠,趙飛,李玉花.  生物技術(shù)通訊. 2009(01)
[9]GATA轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展[J]. 史瑩華,許梓榮.  生物學(xué)通報(bào). 2005(03)
[10]植物細(xì)胞次生壁形成的研究進(jìn)展[J]. 賀新強(qiáng),崔克明.  植物學(xué)通報(bào). 2002(05)

博士論文
[1]楊樹PtoVNS11和PtoMYB156轉(zhuǎn)錄因子在次生壁形成及類黃酮代謝途徑中的功能分析[D]. 楊立.西南大學(xué) 2016
[2]楊樹木質(zhì)素合成酶PAL基因的克隆、鑒定及其表達(dá)載體的構(gòu)建[D]. 薛永常.中國林業(yè)科學(xué)研究院 2001



本文編號：3445029